NBD（NEMO-bonding domain）多肽对破骨细胞生成影响的体外研究

发布时间：2020-10-16 01:33

　　 目的：探讨NBD多肽对破骨前体细胞分化为破骨细胞及其骨吸收功能的影响,从而为骨质溶解吸收性疾病的治疗提供新的研究药物。 材料和方法：选取小鼠来源的细胞株RAW264.7作为破骨细胞前体细胞,使用RANKL诱导前体细胞分化为破骨样细胞,研究NBD多肽在此过程及骨吸收过程中所起的作用。实验分为三个组：溶剂(DMSO)对照组、NBD1(NBD多肽浓度10uM)组和NBD2(NBD多肽浓度20uM)组。检测方法包括：1.用比色法检测抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性；2.用TRAP染色法观察并计数TRAP+多核细胞(TRAP+MNCs);3.用实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测破骨细胞相关基因(TRAP基因、组织蛋白酶K基因、降钙素受体基因)的表达水平；4.用Alamar Blue细胞活性试剂检测RAW264.7增殖及活性；5.用扫描电子显微镜观察牛股骨磨片表面的破骨细胞骨吸收陷窝。 结果：NBD1和NBD2组与溶剂(DMSO)对照组相比,TRAP活性下降均有统计学意义,TRAP活性相对值分别为0.77±0.069(NBDl),0.68±0.104(NBD2); DMSO对照组、NBD1和NBD2组中TRAP+MNCs数目分别是235.67±12.66,192±10.58,169±8.54,两个实验组较对照组变化具有显著性差异。破骨相关基因检测结果显示,两个实验组trap基因表达较对照组均有降低且具有统计学意义,分别为对照组表达水平的0.844±0.057(NBD1)和0.789±0.022(NBD2)。实验组的cathepsin K基因表达水平较对照组分别为0.907±0.039(NBD1)和0.854±0.041(NBD2),相对表达量均有降低且具有统计学意义。calcitonin receptor基因表达水平较对照组上升,分别为1.322±0.187(NBD1),1.498±0.128(NBD2), NBD1组没有统计学差异(p0.05),NBD2组和对照组相比,差异具有统计学意义。增殖检测结果为实验组和对照组之间RAW264.7的增殖及活性没有显著性变化。扫面电镜观察骨磨片表面,NBD组中的骨片表面骨吸收陷窝较对照组明显减少。 结论：结果表明NBD多肽能够抑制破骨细胞形成及其骨吸收活动。
【学位单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2013
【中图分类】：R780.2
【文章目录】：
致谢
中文摘要
Abstract
英文缩略词表
目录
前言
1 材料与方法
2 实验结果
3 讨论
参考文献
综述
    参考文献
附件
    临床病例报告
        病例一
        病例二
        病例三
        病例四
        病例五
    病例讨论
        病例讨论参考文献
个人简历

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 陈明;郑琼;方真华;勘武生;;阿伦膦酸钠对骨髓生成破骨细胞及骨吸收作用的影响[J];中国矫形外科杂志;2008年04期

2 毕龙;胡蕴玉;黄鲁豫;孟国林;李丹;吕荣;白建萍;;骨关节结核发病机制的相关实验研究[J];中国骨肿瘤骨病;2006年05期

3 孙彦;孟永亮;;葡萄糖对大鼠骨髓破骨细胞骨吸收陷窝的影响[J];科技信息;2009年21期

4 张鲲;陈晓亮;宋娓;王德春;;番茄红素对活性氧族介导破骨细胞骨吸收功能的影响[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年37期

5 镐英杰;王珍;李秀群;裴福兴;;一氧化氮外源性供体L-arginine对破骨细胞骨吸收功能的影响[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年45期

6 秦路平;张巧艳;田野苹;郑汉臣;黄矛;黄宝康;;蛇床子总香豆素抑制大鼠多核破骨细胞的形成和分化[J];Acta Pharmacologica Sinica;2003年02期

7 高建军,金慰芳,王洪复;骨片吸收陷窝光镜计数法定量测定破骨细胞功能[J];上海医科大学学报;1998年01期

8 葛冬霞;李良;吴江;陈槐卿;;1,25(OH)_2维生素D_3诱导大鼠骨髓单核细胞形成破骨细胞[J];四川大学学报(医学版);2007年02期

9 杨晓莉;王文君;李大金;金慰芳;周文江;;更年春方对破骨细胞的分化与凋亡及骨吸收活性的影响[J];上海中医药杂志;2008年05期

10 冯婷;顾志鹏;任大伟;张小华;万昌秀;余喜讯;;掺锶聚磷酸钙对破骨细胞的影响[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年01期

相关博士学位论文 前10条

1 鲁秀敏;FGFR1对破骨细胞分化成熟与骨吸收功能的调控作用及机制研究[D];第三军医大学;2008年

2 李建宇;拉伸应变作用下成骨细胞对破骨细胞分化与凋亡的影响及其机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2013年

3 朱恒;间充质干细胞调节破骨细胞发育和功能的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年

4 吴宗键;阿伦磷酸纳预防人工关节无菌松动实验研究[D];军医进修学院;2001年

5 白生宾;氟对破骨细胞增殖的影响及可能的分子机制[D];中南大学;2012年

6 李平;流体剪切力作用下破骨细胞的钙响应特征及机制[D];北京协和医学院;2012年

7 朱保民;流体剪切力对破骨细胞降钙素受体（CTR）及整合素αVβ3 mRNA表达影响的研究[D];四川大学;2005年

8 童水龙;人破骨细胞刺激因子的结构生物学研究及普通变形杆菌的LAD初步晶体学研究[D];中国科学技术大学;2008年

9 曹亚飞;中药骨康对破骨细胞活性及凋亡的影响[D];广州中医药大学;2002年

10 王峰;正畸牙周组织改建中破骨细胞分化因子和发生抑制因子表达的研究[D];第四军医大学;2004年

相关硕士学位论文 前10条

1 沈菊香;NBD（NEMO-bonding domain）多肽对破骨细胞生成影响的体外研究[D];浙江大学;2013年

2 方庆;环孢素A抑制骨水泥颗粒诱导的破骨细胞形成及功能的实验研究[D];第四军医大学;2008年

3 沈龙祥;RNA干扰靶向atp6i基因抑制破骨细胞骨吸收的实验研究[D];浙江中医药大学;2006年

4 刘应芬;流体剪应力对去卵巢骨质疏松大鼠破骨细胞骨吸收功能的影响[D];四川大学;2007年

5 龙丽;氟化钠对体外培养骨细胞影响的研究[D];新疆医科大学;2003年

6 薛永峰;体外诱导培养鸡胚破骨细胞及钙、磷对其活性的影响[D];扬州大学;2010年

7 史册;破骨细胞分化调控同口颌系统巨细胞病变发生的初步研究[D];吉林大学;2010年

8 郝庆新;拉伸应变对破骨细胞凋亡的影响及其作用机制的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年

9 陈雁南;局部应用OPG对鼠正畸牙移动影响的研究[D];重庆医科大学;2008年

10 陈建明;重组人骨形成蛋白-2对破骨样细胞形成的影响[D];福建医科大学;2008年

本文编号：2842545