VEGFsiRNA对人舌癌Tca8113细胞移植瘤生长影响的研究

发布时间：2020-10-16 07:40

　　 目的观察小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)抑制血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达对裸鼠皮下人舌癌Tca8113细胞移植瘤的治疗作用。 方法构建人舌癌Tca8113细胞20只裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为4组。将两对针对VEGF的siRNA真核表达载体(Pu-VEGF-siRNA1,Pu-VEGF-siRNA2)脂质体法作瘤体内及瘤周注射;以注射空质粒组作实验对照组;未注射组作空白对照组。观察各组裸鼠肿瘤生长情况。注射每3天1次共10次,最后1次注射3天后测量瘤体积,剥离瘤体并称重,流式细胞仪检测肿瘤细胞悬液的细胞周期比例, RT-PCR检测瘤组织VEGF-mRNA表达,免疫印迹技术(Western blot)检测瘤组织VEGF蛋白表达。免疫组织化学法观察VEGF阳性染色及微血管密度,Tunel法观察组织细胞凋亡。 结果Pu-VEGF-siRNA2组移植瘤体积和瘤重较对照组低,细胞G1期比例增加,瘤组织VEGF-mRNA表达及VEGF蛋白表达,组织切片VEGF阳性表达率,阳性细胞平均灰度值及微血管密度均较空质粒组及空白对照组低(P0.05),并有更多的凋亡细胞(P0.01)。而Pu-VEGF-siRNA1组未观察到上述差别(P0.05)。 结论siRNA能在体内抑制舌癌VEGF表达,减少肿瘤血管生成,延缓肿瘤生长。不同的干扰片段体内作用效果存在差异。
【学位单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2009
【中图分类】：R739.8
【部分图文】：

型的建立及处理 Tca8113 细胞用含 10％小牛血清的 RPMI 1640 培养胞培养箱中培养增殖。实验用裸鼠，雌性， 4~6 25～27℃无菌恒温、恒湿( 45% ～50%) 的半屏障料、饮用水及垫料经高压灭菌处理，每 3 d 更换生长期细胞胰酶消化吹打离心，调整浓度至 1×10 30 只裸鼠一侧背部皮下，建立裸鼠皮下人舌癌移大部分成瘤。剥取其中一只裸鼠的移植瘤，病理切例及血管窦，并见有核分裂相, 证实为肿瘤组织。

各组荷瘤裸鼠大体观察

q=0.3447、1.0266， P>0.05。空质粒组与空白对照组间各指标差别均无统计学意义（P>0.05）1 2 3 4图3 人舌癌移植瘤离体观察: 1: siRNA1组, 2: siRNA2组, 3: 空质粒组, 4: 空白对照组。
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本文编号：2842965