LMP-1在年轻恒牙和成熟恒牙的牙髓及牙乳头中的表达

发布时间：2020-10-20 19:19

　　 目的 在牙齿发育期间,牙乳头间充质细胞分化为成牙本质细胞,形成原发性牙本质；在牙齿萌出后,无论年轻恒牙,还是成熟恒牙,牙髓在受创伤和感染时,牙髓组织中的成牙本质细胞和新分化的成牙本质细胞样细胞就会形成第三期牙本质,表明牙髓组织具有较强的自我防御能力和自身修复潜能。关于成牙本质细胞和成牙本质细胞样细胞的分化以及牙本质形成的确切机制还不完全清楚,但目前认为一些生物分子如转录因子、信号分子、生长因子、细胞外基质分子等参与调节牙髓组织中的细胞增殖、分化和基质合成。 LIM矿化蛋白1 (LIM mineralization protein-1, LMP-1)是LIM结构域蛋白家族成员,是一种胞内非分泌蛋白,它广泛存在于各种组织中。LMP-1调控成骨细胞的分化和成熟以及骨的形成。近年来有文献报道LMP-1在人健康成熟牙髓牙本质复合体中的前期牙本质、成牙本质细胞、未矿化的修复性牙本质、成牙本质细胞样细胞、血管内皮细胞和牙髓成纤维细胞中均有表达；提示LMP-1在牙髓细胞和成牙本质细胞的分化,牙本质基质的矿化中起着重要作用。但目前有关LMP-1在年轻恒牙和成熟恒牙牙髓及牙乳头组织中表达差异的研究未见报道。而对这一问题的深入研究和探讨,将有助于我们进一步认识牙髓牙本质复合体的发育、成熟以及年轻恒牙牙髓修复能力的生物学机制,并为临床研究活髓保存治疗技术提供新的思路。 本实验应用RT-PCR和Western-blot技术,首次检测并比较LMP-1在人年轻恒牙和成熟恒牙牙髓及牙乳头组织中的表达,以探寻其在牙髓牙本质复合体发育和成熟中的作用,为临床探寻新的活髓保存治疗方法提供理论依据和实验基础。 材料和方法 收集48例因正畸或阻生拔除的健康无龋的牙齿,研究对象年龄为11-30岁,均无全身系统性疾病,近三个月未曾服用免疫制剂和抗菌药物。牙齿拔除后立即将年轻恒牙的牙乳头用镊子分离,冻存；然后将牙齿纵向劈开,完整取出牙髓组织,冻存。成熟恒牙直接将牙齿纵向劈开,完整取出牙髓组织,冻存。 按恒牙牙根发育的八个阶段,结合临床和X光片检查,将R2／3,R3／4的年轻恒牙的牙乳头组织归为第1组,共24例；将R2／3,R3／4的年轻恒牙的牙髓组织归为第2组(根尖孔未闭合组,根尖孔呈喇叭口状),共24例；将Ac的成熟恒牙的牙髓组织归为第3组(根尖孔闭合组),共24例；(R2／3代表牙根形成2／3；R3／4代表牙根形成3／4；Ac代表根尖已封闭)。每组中有12例样本用于RT-PCR检测,另12例样本用于Western-blot检测。 采用RT-PCR和Western-blot技术对LMP-1进行基因水平和蛋白水平的检测,采用SPSS 11.0软件包,应用单因素方差分析方法对图像分析的结果(即灰度值)进行统计学分析,检验水准α=0.05,P0.05有统计学意义。 结果 无论是在mRNA水平还是在蛋白质水平,LMP-1在年轻恒牙的牙乳头组织、年轻恒牙的牙髓组织和成熟恒牙的牙髓组织中均有表达,但表达强度不同。LMP-1在年轻恒牙牙髓组织中的表达较其在年轻恒牙牙乳头组织以及成熟恒牙牙髓组织中的表达明显上调,具有统计学差异(P0.05)。 结论 1、本实验用RT-PCR和Western-blot技术首次检测出LMP-1在年轻恒牙的牙乳头组织,年轻恒牙的牙髓组织及成熟恒牙的牙髓组织中有表达。 2、年轻恒牙牙髓组织中LMP-1的表达高于其在年轻恒牙牙乳头组织中的表达,并且高于成熟恒牙牙髓组织中的表达。
【学位单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2010
【中图分类】：R788
【部分图文】：

第2组中的表达明显高于其它两组，具有统计学差异，尸<0.05;而LMP一1在第l组与第3组中的表达相比，不具有统计学差异，尸>0.05。(图l，图2，表l)500坤100坤500bP100坤.口口口口口......介actin图1，各组组织中LMP一1与p一 actinmRNA的Rl’ -pCR产物电泳结果注:1一4为第1组，年轻恒牙的牙乳头组织;5一8为第2组，年轻恒牙的牙髓组织;9一12为第3组，成熟恒牙的牙髓组织; M:MarkerLMP小Z14bPp一aetin:439bP表1，Rl’ -PCR检测各组组织中LMP一lmRNA表达的图像分析结果组别例数(n)灰度值的比值(见士‘)1212 0.2483士0.0921 0.4617士0.2379’ 0.3050士0.0946△注:’与第l组相t匕，‘与第3组相比

尸<0.05)。其中LMP一1在第2组中的表达明显高于其它两组，具有统计学差异，尸<0.05;而LMP一1在第1组与第3组中的表达相比，不具有统计学差异，P>0.05。(图3，图4，表2) 123456789U护wel60KDp一c血42KD图3，LMP一1与p一actin在各组组织中的蛋白表达注:1一3为第一组，年轻恒牙的牙乳头组织;4一6为第二组，年轻恒牙的牙髓组织;7一9为第三组，成熟恒牙的牙髓组织。

尸<0.05)。其中LMP一1在第2组中的表达明显高于其它两组，具有统计学差异，尸<0.05;而LMP一1在第1组与第3组中的表达相比，不具有统计学差异，P>0.05。(图3，图4，表2) 123456789U护wel60KDp一c血42KD图3，LMP一1与p一actin在各组组织中的蛋白表达注:1一3为第一组，年轻恒牙的牙乳头组织;4一6为第二组，年轻恒牙的牙髓组织;7一9为第三组，成熟恒牙的牙髓组织。
【参考文献】

相关期刊论文 前5条

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2 王忠东;牙髓自身修复潜能的研究进展[J];国外医学.口腔医学分册;1996年02期

3 刘素彩,赵志刚,赵长安,张志勇,刘靖,李恩;LMP-1 mRNA反义寡核苷酸抑制大鼠成骨细胞的分化[J];基础医学与临床;2002年02期

4 王效英;张旗;王强;陈卓;陈智;;胞内信号转导分子LIM矿化蛋白1在人牙髓细胞体外矿化过程中表达的实验研究[J];口腔医学研究;2006年03期

5 王效英;张旗;王强;陈卓;陈智;;胞内信号转导分子LIM矿化蛋白-1在人牙周膜细胞体外矿化过程中表达的实验研究[J];牙体牙髓牙周病学杂志;2007年01期

本文编号：2849058