重度牙周炎对Aβ诱导的大鼠学习记忆功能及脑内炎症因子表达的影响
发布时间：2020-10-21 07:50
目的:探讨牙周组织炎症对Aβ诱导的大鼠学习记忆功能减退发生发展的影响及脑内炎症因子表达的影响。方法:将96只雄性SD大鼠随机分成3组:空白组(Control组,12只)、对照组36只【含Aβ1μl对照组(Aβ1μl组,12只)、Aβ2μl对照组(Aβ2μl组,12只)和模型对照组(Aβ5μl组,12只)】和实验组48只【含牙周炎组(CP组,12只)、Aβ1μl实验组(CP+Aβ1μl组,12只)、Aβ2μl实验组(CP+Aβ2μl组,12只)和模型实验组(CP+Aβ5μl组,12只)】。实验组48只大鼠建立大鼠重度牙周炎模型后,将除CP组外的实验组大鼠(共36只),与对照组大鼠一起,行海马区Aβ_(25-35)注射,其中Aβ1μl组及CP+Aβ1μl组每只大鼠每侧海马注射1μlAβ_(25-35);Aβ2μl组及CP+Aβ2μl组每只大鼠每侧海马注射2μlAβ_(25-35);Aβ5μl组及CP+Aβ5μl组每只大鼠每侧海马注射5μlAβ_(25-35)制备散发性老年痴呆(sporadic Alzheimer’s Disease,SAD)动物模型。从海马区注射Aβ_(25-35)后第14天开始,连续4天使用Morris水迷宫法检测重度牙周炎及海马区注射Aβ_(25-35)对大鼠的空间学习记忆功能的影响,并在该测试结束后第二天,进行空间探索实验。空间探索结束后立即安乐处死所有大鼠并对全脑、脑皮质及海马区脑组织、上颌双侧牙槽骨进行取材;截取SD大鼠一侧上颌骨制作石蜡切片,进行HE染色后观察其组织学变化,另一侧经亚甲蓝染色后以微焦相机拍摄数码照片,观察牙槽骨吸收的情况;制作脑组织的病理切片,HE染色观察大鼠海马CA3区神经元形态及密度,ELISA法检测脑皮质及海马区IL-1、IL-6、CRP、TNF-α、Aβ_(1-40)的蛋白含量。结果:(1)牙周组织病理学切片显示:空白组、对照组大鼠牙槽骨及牙周组织均无明显异常改变。实验组出现重度牙周炎症状,实验组的SD大鼠上颌第二磨牙牙槽嵴顶退缩,上皮表面糜烂,部分上皮钉突网状增生,大量炎细胞浸润,胶原纤维增生,可见破骨细胞。数码照片观察可见:所有实验组大鼠上颌第二磨牙牙槽骨高度明显下降,根分叉暴露,骨吸收达根尖1/3。(2)对各组的Morris水迷宫实验数据分析显示,与空白组相比,Aβ5μl组及CP+Aβ5μl组逃逸潜伏期较长,学习记忆能力较差,且具有显著统计学差异;其余组的逃逸潜伏期较空白组相比均存在差异,差异均无统计学意义;实验组与对照组海马区注射相同剂量Aβ_(25-35)的各组之间的逃逸潜伏期的差异不具有统计学意义。此外各组大鼠在游泳速度上未见显著差异。(3)本实验结果显示,在所有脑皮质及海马区脑组织中,均可检测到IL-1、IL-6、CRP、TNF-α、Aβ_(1-40)的存在。相较于空白组,以上四种炎症因子及Aβ_(1-40)的含量在所有对照组及实验组海马区及脑皮质中均有升高且大部分上升具有统计学差异。与对照组相比,几乎所有实验组海马区及脑皮质以上四种炎症因子及Aβ_(1-40)的含量均有升高且部分上升具有统计学差异。(4)脑组织石蜡切片HE染色结果显示:空白组和PD组大鼠海马神经元数量丰富,结构完整,核仁清晰可见。Aβ5μl组及CP+Aβ5μl组大鼠海马区神经元排列层次减少,部分细胞出现明显的深染、细胞核固缩现象,细胞间隙增大,CA3区神经元数量较空白组显著减少,且差异具有统计学意义;其余组大鼠海马神经元均有不同程度数量减少及部分深染、细胞核固缩的现象。结论:合并重度牙周炎对Aβ诱导的大鼠学习记忆功能减退的影响无显著差异,但重度牙周炎可能通过促进SD大鼠脑内炎症因子的表达和累积,加速阿尔兹海默病的发生和加重阿尔兹海默病发展。
【学位单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R781.42
【部分图文】：
遵义医学院硕士学位论文 杨逢春B2 结果2.1 实验组牙周组织破坏情况肉眼观察上颌第二磨牙牙周组织，相比于空白组，实验组丝线及钢丝均存留在颈部，且丝线附近见软垢及牙石存在，牙龈红肿、充血，探诊出血，有牙周袋形成附着丧失，牙齿松动度为Ⅱ～Ⅲ°，而空白组及对照组的牙周情况未见明显异常。HE 染色结果显示，相比于空白组及对照组，实验组大鼠的上颌第二磨牙近远邻面软组织退缩，牙槽嵴顶退缩，牙槽骨吸收严重，可见破骨细胞，上皮表面糜烂上皮钉突局部成网状增生，新生毛细血管增生，胶原纤维增生（见图 2-1）。A
A图 2-2 A 实验组大鼠重度牙周炎牙槽骨数码照片（代表图）;B 空白组及对照组大鼠牙槽骨数码照片（代表图）Fig 2-2 A.digital photos of alveolar bone in rats with severe periodontitis in experimental group (representativemap).;B digital photos of alveolar bone in blank group and control group (representative map)2.2 重度牙周炎对 Aβ25-35 海马区注射后大鼠学习记忆功能和运动能力的影响以 Morris 水迷宫实验对各组大鼠进行行为学测试。用重复测量数据方差分析法分析各组大鼠在 4 天水迷宫实验中的逃逸潜伏期，球形检验 P=0.252，接受球形检验结果显示时间因素有统计学差异，说明各组大鼠的逃逸潜伏期随时间的变化而变化；分组主效应亦有统计学差异，说明逃逸潜伏期随分组的不同而具有差异；但时间和分组的交互效应无统计学差异。B
图 2-3 各组每天平均逃逸潜伏期，( ± ,n=8),+vs 空白组 P<0.01。Fig2-3 mean escape latency in each group of 4 days’trials,( ,n=8)+P<0.01vsControl group.在第 5 天的实验中，对各组大鼠的游泳速度和穿越平台次数进行分析，结果显示各组大鼠的游泳速度无显著差异，表明各组大鼠不因游泳速度的差异而导致逃逸潜伏期的不同；各组大鼠穿越平台次数均无显著差异。(见图 2-4）
【参考文献】
本文编号：2849851
【学位单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R781.42
【部分图文】：
遵义医学院硕士学位论文 杨逢春B2 结果2.1 实验组牙周组织破坏情况肉眼观察上颌第二磨牙牙周组织，相比于空白组，实验组丝线及钢丝均存留在颈部，且丝线附近见软垢及牙石存在，牙龈红肿、充血，探诊出血，有牙周袋形成附着丧失，牙齿松动度为Ⅱ～Ⅲ°，而空白组及对照组的牙周情况未见明显异常。HE 染色结果显示，相比于空白组及对照组，实验组大鼠的上颌第二磨牙近远邻面软组织退缩，牙槽嵴顶退缩，牙槽骨吸收严重，可见破骨细胞，上皮表面糜烂上皮钉突局部成网状增生，新生毛细血管增生，胶原纤维增生（见图 2-1）。A
A图 2-2 A 实验组大鼠重度牙周炎牙槽骨数码照片（代表图）;B 空白组及对照组大鼠牙槽骨数码照片（代表图）Fig 2-2 A.digital photos of alveolar bone in rats with severe periodontitis in experimental group (representativemap).;B digital photos of alveolar bone in blank group and control group (representative map)2.2 重度牙周炎对 Aβ25-35 海马区注射后大鼠学习记忆功能和运动能力的影响以 Morris 水迷宫实验对各组大鼠进行行为学测试。用重复测量数据方差分析法分析各组大鼠在 4 天水迷宫实验中的逃逸潜伏期，球形检验 P=0.252，接受球形检验结果显示时间因素有统计学差异，说明各组大鼠的逃逸潜伏期随时间的变化而变化；分组主效应亦有统计学差异，说明逃逸潜伏期随分组的不同而具有差异；但时间和分组的交互效应无统计学差异。B
图 2-3 各组每天平均逃逸潜伏期，( ± ,n=8),+vs 空白组 P<0.01。Fig2-3 mean escape latency in each group of 4 days’trials,( ,n=8)+P<0.01vsControl group.在第 5 天的实验中，对各组大鼠的游泳速度和穿越平台次数进行分析，结果显示各组大鼠的游泳速度无显著差异，表明各组大鼠不因游泳速度的差异而导致逃逸潜伏期的不同；各组大鼠穿越平台次数均无显著差异。(见图 2-4）
【参考文献】
相关期刊论文 前4条
1 欧阳翔英;;关于重度牙周炎的诊断标准[J];中华口腔医学杂志;2017年02期
2 李林;;中国阿尔茨海默病研究进展[J];中国药理学与毒理学杂志;2015年05期
3 封敏;卢圣锋;张承舜;余曙光;;国内大鼠Morris水迷宫实验现状与分析[J];辽宁中医杂志;2011年11期
4 陈罗西;郭玲玲;李亮;;Morris圆形水迷宫的应用及其相关检测指标分析[J];辽宁中医药大学学报;2008年08期
本文编号：2849851
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