甘草甜素对人颊黏膜成纤维细胞炎症反应的初步研究

发布时间：2020-10-30 09:22

　　 目的： （1）通过组织块法体外培养人颊黏膜成纤维细胞（HBMPs）建立细胞模型，为后续研究提供实验基础。（2）①观察不同浓度甘草甜素对人颊黏膜成纤维细胞增殖的影响。②通过脂多糖（LPS）刺激建立人颊黏膜成纤维细胞的细胞炎症模型，同时加入甘草甜素进行干预，观察白细胞介素-6（IL-6）的浓度，来探讨甘草甜素对人颊黏膜成纤维细胞炎症反应的作用。 方法： （1）取OLP患者的正常颊黏膜，组织块法培养人颊黏膜成纤维细胞，经过传代、分离、纯化，取第四代细胞进行免疫组织化学染色，证明所得细胞为HBMFs。（2）①取生长良好的颊黏膜成纤维细胞，加入0μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、150μg/ml、200μg/ml的甘草甜素,培养24h、48h、72h后,经MTT法检测每孔的光密度值(OD)。②第4代成纤维细胞为对照组、加入脂多糖为炎症组、同时加入脂多糖和甘草甜素为实验组，用ELISA法分别检测三组IL-6的浓度。 结果： （1）通过组织块法培养的人颊黏膜成纤维细胞，经传代、分离、纯化至第四代，得到纯度高、活性好的HBMPs。倒置显微镜下观察，细胞呈长梭形或者星形，细胞核清晰，圆形或椭圆形居中，胞浆丰富。细胞密度高时交织排列成“网状”或者“束状”。免疫组织化学法显示细胞抗角蛋白染色阴性，抗波形蛋白染色阳性。（2）①MTT法结果：与0μg/ml对照组比较，除了25μg/ml组在24h时间段内差异无统计学意义，其余各组在各时段差异均有统计学意义。甘草甜素对人颊黏膜成纤维细胞的生长有抑制作用，在一定范围内随药物浓度增加和作用时间延长而增强，具有明显的时间和剂量依赖性。②ELISA法结果：对照组有微量的IL-6产生，炎症组分泌IL-6明显高于对照组,差异有显著性(P0.05)。实验组IL-6分泌量明显低于炎症组,差异有显著性(P0.05)。结论： （1）人颊部固有层的主要细胞为成纤维细胞，组织块法培养颊黏膜成纤维细胞为后续实验提供细胞模型。（2）①甘草甜素对人颊黏膜成纤维细胞的生长有抑制作用。②人颊黏膜成纤维细胞经过脂多糖促炎，炎症因子IL-6释放增多，体外模拟口腔扁平苔藓（OLP）的炎症状态。加入甘草甜素进行干预，IL-6的释放显著降低，说明甘草甜素在治疗口腔扁平苔藓的炎症反应中有重要作用，为临床治疗口腔扁平苔藓提供理论依据。
【学位单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2013
【中图分类】：R781.5
【文章目录】：
中英文缩略词简表
摘要
Abstract
前言
第一部分
    一、 实验材料
    二、 实验方法
    三、 实验结果
    四、讨论
第二部分
    一、 实验材料
    二、 实验方法
    三、 实验结果
    四、 讨论
全文结论
参考文献
综述
    参考文献
附录
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【参考文献】

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本文编号：2862276