透明质酸钠对颞下颌骨关节病髁突软骨修复作用的动物实验研究

发布时间：2020-11-03 08:07

　　 目的 透明质酸钠行关节腔注射的弹性补充疗法是临床上常见的微创治疗的手段,本实验以狗为研究对象,通过一次性行关节腔注射胶原酶成功构建狗的颞下颌关节骨关节病的模型,然后行透明质酸钠关节腔注射治疗,观察髁突软骨的组织病理学变化,进一步探讨透明质酸钠对颞下颌关节骨关节病的治疗作用,为临床研究工作提供依据。 方法 将6只成年期杂种狗,体重为15-18kg,无明显口颌系统疾病,速眠新Ⅱ号(军需大学兽医研究所)麻醉起效后,在每只狗的左侧颞下颌关节上强一次性注射1%胶原酶1ml (400U/mg)。于注射后1、2、3、4、5、6周分别处死并完整取出髁突及关节盘、放入10%中性福尔马林溶液中固定24小时。标本放置于10%EDTA中性福尔马林液中脱钙2周(每2天更换一次脱钙液),至大头针可以轻易刺透组织为止表明已经基本脱钙完毕。包埋后制作组织切片,进行HE染色和番红O染色,观察髁突软骨的组织学变化,从而构建TMJOA模型；另选6只相同规格杂种狗,在构建双侧TMJOA模型后,于1、2、3周,麻醉状态下于左侧TMJ上腔注射医用透明质酸钠0.5ml (10mg/ml,分子量：84000),右侧注射生理盐水0.5ml作对照,适应性饲养4周后,处死并双侧TMJ取材、固定、脱钙、包埋制作组织切片,进行HE和番红O染色,对比观察双侧髁突软骨组织学变化,并按改良Mankin骨关节病组织学评价系统记分,采用SPSS19.0统计软件对数据进行分析。 结果 动物模型组的6只狗在注射胶原酶后1、2、3、4、5、6周依次出现了表层胶原纤维的水解,蛋白多糖的丢失,软骨表层粗糙不齐,并逐渐出现了关节软骨的剥脱、崩解外,形成软骨裂隙,部分区域骨质暴露,纹理粗糙,出现骨质增生,形成骨赘,成功建立了颞下颌关节骨关节病的动物模型。 治疗组的6只狗在建立双侧颞下颌关节骨关节病后,经3周的透明质酸钠治疗后,发现注射透明质酸钠侧关节病变较对侧轻,软骨层次较为清晰,病变多数局限于表层；生理盐水侧关节病变较重,软骨表面不规整,纤维软骨层次紊乱不清,纤维软骨连续性中断,部分区域纤维软骨变性脱落已被排列杂乱的纤维组织取代；部分标本出现骨裂、骨赘。透明质酸钠侧评分为：3.17±0.75为(n=6),生理盐水侧评分为：7.83±1.67(n=6),用独立样本资料t检验,显示两侧关节病变差异有显著性(P0.01)。番红0染色对比显示,透明质酸钠侧关节软骨染色较为均匀,颜色较深；生理盐水侧关节软骨基质中出现未染色区域。 结论 1、通过一次性关节腔注射胶原酶,可成功建立狗的TMJOA模型,病变从表层胶原纤维水解形成裂隙,软骨表层粗糙不齐逐渐发展到关节软骨的剥脱、崩解外,部分区域骨质暴露,纹理粗糙,出现骨质增生,形成骨赘。整个病变过程伴有软骨基质中蛋白多糖的逐渐丢失。本建模方法相对于手术方法操作简单,病变典型,可重复性一致性较好,可很好的复制骨关节病的整个病变发展过程,是较为理想的建模方法。 2、外源性透明质酸钠行关节腔注射治疗可以促进狗的TMJOA髁突软骨的修复,其具体机制可能为通过促进蛋白多糖的聚集,避免了蛋白多糖的继续流失,阻碍了TMJOA的进一步进展。
【学位单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2012
【中图分类】：R782.6
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、狗的颞下颌骨关节病模型的建立
    1.1 材料和方法
        1.1.1 主要试剂、药品
        1.1.2 主要仪器、设备
        1.1.3 实验动物及造模方法
    1.2 结果
        1.2.1 右侧正常对照组
        1.2.2 实验侧关节组组织病理学表现
    1.3 讨论
        1.3.1 颞下颌关节骨关节病动物模型的建立及其评价
        1.3.2 胶原酶诱发颞下颌骨关节病的病理机制
        1.3.3 颞下颌骨关节病的病理过程
    1.4 小结
二、透明质酸钠修复颞下颌骨关节病髁突软骨的实验研究
    2.1 材料和方法
        2.1.1 主要试剂、药品
        2.1.2 主要仪器、设备
        2.1.3 实验动物、方法
    2.2 结果
        2.2.1 改良Mankin骨关节病组织学评分结果
        2.2.2 组织学评分的统计结果
        2.2.3 番红O染色结果
    2.3 讨论
        2.3.1 透明质酸钠对TMJ关节的生理作用
        2.3.2 透明质酸钠治疗TMJOA的机制探讨
        2.3.3 透明质酸钠治疗TMJOA的组织学评价
    2.4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    颞下颌关节骨关节病治疗的研究现状
    综述参考文献
致谢

【参考文献】

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本文编号：2868321