fibromodulin在正常牙周组织、炎性牙龈组织和牙周损伤愈合过程中的分布与表达

发布时间：2020-11-07 14:14

　　 近年来，对于牙周疾病的病因学和病理学的研究，已经深入到微生物、免疫和生物化学等领域，但是牙周病的治疗方面总是落后于病因病理方面的探讨，达不到与后者相当的水平。许多学者致力于牙周愈合和再生的研究，期望更深地了解牙周组织的活动，探讨使受损的牙周组织再生的方法，为牙周病的治疗提供新的思路。蛋白多糖被认为是一种有用的工具，可以用来控制细胞的某些活动，而这些活动是伤口成功愈合的关键。因此，蛋白多糖可能在牙周组织中起调节作用，有助于损伤牙周组织的愈合。 fibromodulin是富含亮氨酸的小的间质蛋白多糖中的一种，与其同家族的蛋白多糖主要有biglycan，decorin和lumican等。这类蛋白多糖结构相似，与胶原关系密切，并能在细胞外基质中发挥协调作用，参与组织活动的调节。对fibromodulin的研究，在身体的其他组织已经比较深入，已知这种蛋白多糖广泛分布于巩膜、肌腱、角膜、关节软骨、皮肤、主动脉等多种组织的细胞外基质中，在组织自身稳定、损伤愈合、炎症和某种病理条件下(如纤维变性)行使重要功能，然而这些研究少有涉及牙周组织领域。本研究的目的是揭示fibromodulin在正常牙周组织、炎性牙龈组织和牙周损伤愈合过程中的免疫定位，同时将与fibromodulin关系密切的蛋白多糖biglycan，decorin及Ⅰ型、Ⅲ型胶原，同其进行比较，推测fibromodulin在牙周组织中的作用。 实验分四部分进行。 第一部分： 目的：研究fibromodulin在正常牙周组织中的分布和表达，认识fibromodulin在牙周组织自身稳定中的作用。 方法： 1．用免疫组织化学方法，对正常Lewis鼠磨牙牙周组织的fibromodulin的组织分布和细胞定位进行评价。 2.培养人类牙周细胞(牙跟成纤维细胞，牙周韧带成纤维细胞和成骨细胞)。 3.采用逆转录一聚合酶链反应技术，对人类牙周细胞中fibromodulin的表达进行测 定，并凭借NIH凝胶分析软件对fibromodulin进行进一步的半定量分析。 4.同时对decorin，biglyean，I型胶原，Ixx型胶原做同样的实验，并与fibromo血lin 相比较。 结果: 1.fibromodulin分布于牙跟上皮基底上区、牙酿和牙周韧带成纤维细胞及其基质。靠 近口腔牙跟面的区域和牙周韧带一牙槽骨、牙周韧带一牙骨质界面有强阳性表达。 2.与fibromodulin来自同一家族的decorin和biglycan，显示与fibromo血lin不同的 分布和与胶原纤维的联系。decorin强阳性表达于牙龋组织跟沟附近的区域。biglycan则 在牙跟上皮着色明显。 3.从mRNA的表达来看，fibromodulin在成骨细胞中强烈表达，decorin和biglyean 也有类似表现。I型、m型胶原的mRNA在牙跟成纤维细胞中表达水平高于成骨细胞和 牙周韧带成纤维细胞。 结论:fibrornodulin在牙周组织和细胞中的特殊分布和表达，提示fibromoduhn可能 与其他小蛋白多糖相互作用，调节胶原纤维的网络形成，并可能参与牙槽骨和牙骨质矿 化口 第二部分: 目的:研究fibromoduhn在人类炎性牙跟组织中的分布和表达，探讨fibrom。血lin 在炎症状态的牙靓组织中所起的作用。 方法: 1.从人类健康牙靓、牙跟炎和牙周炎患者的牙酿组织中取样。 2.用免疫组织化学的方法，观察fibromodulin在正常牙靓和炎性牙酿中的分布和表 达。 结果: 1.fibromodulin在健康牙跟上皮呈中度着色，在牙踉结缔组织中无明显表达。 2.在炎性牙跟组织中，牙眼成纤维细胞和牙跟结缔组织基质呈现fibromo血lin强着 色形式。 结论:fibromodulin在炎性牙敛组织中表达增强，可能是受炎症诱导，与其他基质成 II 分相互作用，参与牙龋组织的炎症愈合过程。 第三部分: 目的:研究fibromodulin在牙周损伤愈合中的分布和表达，了解fibromodulin在牙 周损伤愈合期间其时间上和空间上的定位，探讨它在牙周损伤愈合过程胶原纤维生成中 与其他小蛋白多糖biglycan和decorin的关系。 方法: 1.建立牙周损伤愈合动物模型。选用成年鼠作为实验对象，损伤下领右侧磨牙的牙 周组织(包括牙槽骨)，同时也损伤下领左侧磨牙的牙周组织(不包括牙槽骨)，定时跟 踪观察28天至损伤愈合。 2.HE染色显示牙周损伤愈合的组织形态学表现。 3.采用免疫组织化学分析方法对不同时间内愈合组织中的fibromodulin，biglycan， decorin，I型胶原和m型胶原进行观察。 结果: 1.HE染色显示，牙周损伤后第1天，炎性细胞渗透入牙跟组织和跟沟，根侧损伤 区周围形成纤维蛋白团块。牙周损伤后第3天和第5天，肉芽组织开始形成，成纤维细 胞样细胞密度很高;移行的牙眼上皮覆盖损伤区;新近形成的胶原纤维呈束状分布。牙 周损伤后第7天和第14天之间，新的牙周韧带形成。牙周损伤后第14天，上皮附着牙 根表面;新骨开始形成。 2.免疫组织化学染色显示，在牙周损伤愈合早期，fibromodulin与胶原纤维束关系 密切，分布于结缔组织I型胶原纤维分布区。higlycall与上皮再生紧密相关。dscorin主 要位于上皮下区，与fibromodulin
【学位单位】：武汉大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2004
【中图分类】：R781.4
【部分图文】：

图1一2正常牙眼组织的组织学表现(HE染色放大倍数:200X)T牙齿;GC牙馥结缔组织;GE牙馥上皮图1一3牙跟组织的对照组织切片(免疫组织化学染色放大倍数:200x)T牙齿;GC牙翻结缔组织;GE牙馥上皮

20()4.4钱虹:fibromodulin在正常牙周组织、炎性牙馥组织和牙周损伤愈合过程中的分布与表达图1一2正常牙眼组织的组织学表现(HE染色放大倍数:200X)T牙齿;GC牙馥结缔组织;GE牙馥上皮图1一3牙跟组织的对照组织切片(免疫组织化学染色放大倍数:200x)T牙齿;GC牙翻结缔组织;GE牙馥上皮

武汉大学口腔医学院博士学位论文2004.4图1一五brornodulin在牙凝上皮和牙叙结缔组织中的分布，其中励拍modulin在靠近口腔面处比靠近牙面处有更强的表达(免疫组织化学染色放大倍数:20(jX)T牙齿;GC牙凝结缔组织;GE牙眼上皮图1一fibromodulin在牙叔上皮的分布，其中基底层树突状细胞有明显的阳性着色(箭头所示)，基底膜细胞表达免疫阴性(免疫组织化学染色放大倍数:40()x)GC牙跟结缔组织;GE牙龋上皮
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