儿童口腔高毒力变异链球菌HtrA缺陷株的构建及转化力的研究

发布时间：2021-03-02 04:43

　　目的：将前期课题组构建完成的重组质粒载体pUChtrKO加入到已筛选出的变异链球菌HtrA高毒力菌株（以下简称高毒力株）中,通过基因同源重组来构建高毒力变异链球菌HtrA基因缺陷株（以下简称HtrA缺陷株）,将构建完成的HtrA缺陷株和高毒力株分别进行培养计数,评价二者转化力的差异,判断儿童口腔变异链球菌的致龋性是否受HtrA的调控,为乳牙龋的防治找到新靶点。方法：①构建HtrA基因缺陷株：将已筛选出的高毒力菌株常规复苏,厌氧培养,制备感受态刺激肽细胞,然后加入已经构建完成的重组质粒载体,应用基因同源重组技术进行HtrA基因缺陷株的构建。将已经转化的高毒力株倍比稀释后厌氧培养,在光学显微镜下观察细菌形态并生化鉴定。②trA基因缺陷株的鉴定：根据HtrA的基因序列来设计HtrA基因的引物HtrF/HtrR并进行PCR扩增,再对红霉素抗性基因引物P1/P2, HtrA基因上游引物序列合并红霉素抗性基因引物HtrAUF/P1, HtrA基因下游引物序列合并红霉素抗性基因引物HtrAUR/P2进行PCR扩增,并将已经进行了PCR扩增的四个基因片段以含有HtrA基因的变异链球菌标准株DNA作为参... 

【文章来源】：西南医科大学四川省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
材料与方法
结果
讨论
结论
参考文献
英汉缩略词对照表
致谢
抑制变异链球菌生长方法的研究进展（综述）
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
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[8]小麦类甜蛋白基因的转化及转基因植株的抗病性分析[J]. 邢莉萍,王华忠,蒋正宁,倪金龙,曹爱忠,于玲,陈佩度.  作物学报. 2008(03)
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本文编号：3058626