经典Wnt信号通路介导Hippo信号通路调控人牙周膜干细胞成骨分化及机制研究
发布时间：2021-03-05 01:18
实验目的本实验旨在研究通过激活和抑制经典Wnt信号通路对人牙周膜干细胞成骨分化的影响以及在此过程中Hippo信号通路的表达变化;探讨经典Wnt信号通路介导Hippo信号通路调控PDLSCs成骨分化的分子机制,揭示两种信号通路在干细胞成骨分化方面的交叉调控作用,为口腔组织再生工程中种子细胞优化提供理论依据。实验方法1.利用组织块贴壁法分离获得原代人牙周膜干细胞;使用流式细胞术检测干细胞表面标志物的表达水平;细胞经成骨和成脂诱导后检测其多向分化潜能;2.用人重组蛋白Wnta3a,DKK-1处理hPDLSCs,分别激活、阻断经典Wnt信号通路,q-PCR及Western blot检测经典Wnt信号通路中β-catenin、Wnt3a、LRP5、DVL、Axin及GSK3β的表达情况,ALP染色、茜素红染色及AKP半定量分析PDLSCs成骨能力改变;检测Hippo信号通路中TAZ、Mob、LATS1及磷酸化TAZ、Mob、LATS1的变化;荧光素酶报告系统检测经典Wnt信号通路转录区域TCF/LEF活性和Hippo信号通路转录区域TEAD活性;3.通过慢病毒转染,过表达TAZ（oeTAZ）和敲...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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本文编号：3064303
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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本文编号：3064303
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