SB431542调控牙龈间充质干细胞成骨分化修复小型猪颌骨缺损

发布时间：2021-03-19 16:54

　　[目的]探索牙龈间充质干细胞作为骨组织工程种子细胞的可行性,以及TGF-β抑制剂SB431542对牙龈间充质干细胞体外增殖和体内外成骨分化的影响。[方法]收集临床种植二期手术及口腔颌面外科阻生智齿拔除术中切除的健康废用牙龈组织,进行原代细胞的分离培养。应用流式细胞术（Flow Cytometry,FCM）检测间充质干细胞表面标志物CD73、CD90及造血干细胞表面标志物CD34、CD45的表达,并检测其成骨定向分化能力,进行其为间充质干细胞的生物学鉴定;通过CCK-8增殖实验检测GMSCs的增殖能力以及1 μM SB431542对GMSCs增殖的影响;细胞随机分为三组:空白组细胞给予间充质干细胞培养基、对照组细胞给予干细胞成骨诱导培养基、实验组细胞给予添加1 μM SB431542的间充质干细胞成骨诱导培养基,进行成骨分化的诱导;茜素红染色检测三组细胞在添加不同培养基体外培养21天后的矿化结节形成情况,拍照并利用Image Pro Plus 6.0软件进行图形分析,利用GraphPad Prism 7软件进行数据分析;通过RT-PCR（Real-Time Polymerase Chai... 

【文章来源】：南京大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１原代培养结果（Ａ．原代培养组织块Ｂ．原代培养４ｄ细胞从组织爬出Ｃ．形态、大小均一，??

南京大学硕士学位论文???ＣＤ７３（９９．４％）、ＣＤ９０（９９．７％）均呈阳性表达，造血干细胞表面标志物ＣＤ３４（０．２％）、??Ｃ?Ｄ?４?５?（０．１?％）阴性表达，检测结果显示表面标志物的表达水平和间充质来源的干??细胞特征符合。??

?ＣＣＫ８增殖实验：ＳＢ４３１５４２对ＧＭＳＣｓ增殖无明显影响??．４?ＲＴ－ＰＣＲ检测各成骨相关基因的表达??ＰＣＲ检测结果显示，实验组ＡＬＰ、ＯＣＮ、Ｒｕｎｘ２、ＯＰＮ、ＣＯＬ基因的表达水平均高于对照组，差异有统计学意义〇Ｐ＜０．０５）；茜素示：添加ＳＢ４３１５４２的ＧＭＳＣｓ矿化结节形成量高于对照组和空白计学意义〇Ｐ＜０．０５）。??＊?？?＊??＊??＊???１００?－１??

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]BMP-Smad信号通路在成骨与破骨细胞生成中的作用[D]. 李安娜.山东大学 2014



本文编号：3089899