miR-218-5p在人牙周膜干细胞成骨分化早期的功能和机制研究
发布时间:2021-06-28 06:45
研究背景人牙周膜干细胞(human periodontal stem cells,hPDLSCs)来源于牙周膜,属于间充质来源的成体干细胞,其具有分化为组织中特定的功能相关性细胞的多向分化能力和在生命体内能够增殖并形成组织从而维持自身的数量,在体外可以克隆性生长的自我更新能力。当牙周损伤导致牙槽骨缺损后,具有成骨潜能的hPDLSCs迁移至缺损区并分化为成骨细胞,从而修复牙槽骨的缺损。hPDLSCs的成骨潜能在牙周组织的自我更新以及牙周病变组织的修复与再生过程中发挥了重要作用,但目前仍未能够具体阐明hPDLSCs的成骨分化机制,有待进一步的探索。MicroRNA(miRNA,微小RNA)是一类内源性非编码蛋白质的微小RNA,广泛存在于自然界多种真核生物体内,可通过降解靶基因、抑制靶基因翻译或两种方式结合的作用方式发挥抑制mRNA表达的功能。目前已有研究表明,miRNA对干细胞的未分化性及自我更新能力的维持有重要意义。同时,已有研究发现,miRNA具有调控hPDLSCs成骨分化的功能。在成骨分化过程中,特定基因严格按照特定的顺序激活与关闭,控制着成骨分化的不同阶段。而成骨分化的早期将决定未...
【文章来源】:南方医科大学广东省
【文章页数】:83 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1-1人牙周膜干细胞生物学特性测定??A:B:?80%hPDLSCsC:
培养至5?d前生长较缓慢,自5?d至9?d细胞生长较快,进入对数生长期,9?d后生??长趋势减缓,细胞生长曲线近似倒“S”形,说明细胞生长状态良好,符合细胞??生长周期规律。如图1-2。??^?2.5-??〇?2.0-?//??1-??c?1-0-?y??■S??〇?0.5-??<?^?n??〇?〇■?I?i?t?t?I?i?^?.k??0?123456789?10?11?12??Time(Days)??图l-3?CCK8法检测人PDLSCs生长曲线??Fig.?I?-3?hPDLSCs?growth?curve?was?assesed?by?CCK8?assay.??14??
2.结果??2.1?rniR-218-5p过表达及抑制表达慢病毒的构建??2.1.1?miR-218-5P过表达慢病毒阳性克隆的测序结果??测序图的对应序列如图:??TTTTTGGCTTTTTTGTTAGACGAAGCT?丁?GGGCTGCAGGTCGACTCTAGAGGATCCCCG??GGTACCGGGTTTCCAGAACGTCTGTAGCTTTTCTCCTCCTTCCCTCCATTTTCCTCTTG??GTCTTACCTTTGGCCTAGTGGTTGGTGTAGTGATAATGTAGCGAGATTTTCTGTTGTGCT??TGATCTAACCATGTGGTTGCGAGGTATGAGTAAAACATGGTTCCGTCAAGCACCATGG??AACGTCACGCAGCTTTCTACAGCATGACAAGCTGCTGAGGCTTAAATCAGGATTTTCC??TGTCTCTTTCTACAAAATCAAAATGAAAAAAGAGGGCTTTTTAGGCATCTCCGAGCTA??GCCTGTGGAATGTGTGTCAGTTAGGGTGTGGAAAGTCCCCAGGCTCCCCAGCAGGCA??GAAGTATGCAAAGCATGCATCTCAATTAGTCAGCAACCAGGTGTGGAAAGTCCCCAGG??CTCCCCAGCAGGCA??
【参考文献】:
期刊论文
[1]miRNA-143靶向MACC1抑制宫颈癌细胞侵袭[J]. 许常娟,邓丹玲,丁彦青,廖雯婷. 中国肿瘤临床. 2015(18)
[2]牙源性干细胞的研究进展[J]. 张琳琳,安莹,陈发明,金岩. 实用口腔医学杂志. 2015(03)
[3]人牙周膜干细胞的分离培养及体外诱导分化研究[J]. 徐斌,徐婕,刘宏伟. 口腔医学研究. 2011(08)
[4]改良法分离培养人牙周膜干细胞[J]. 申涛,常慧君,简从相,杨彦春,周继祥. 华西口腔医学杂志. 2011(01)
[5]人牙周膜细胞群多向分化潜能的实验研究[J]. 刘娟,赵红宇,轩东英,谢宝仪,章锦才. 华西口腔医学杂志. 2010(02)
博士论文
[1]MiR-503调控破骨细胞分化及其在绝经后骨质疏松症中作用机制[D]. 谢亘青.中南大学 2013
本文编号:3253831
【文章来源】:南方医科大学广东省
【文章页数】:83 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1-1人牙周膜干细胞生物学特性测定??A:B:?80%hPDLSCsC:
培养至5?d前生长较缓慢,自5?d至9?d细胞生长较快,进入对数生长期,9?d后生??长趋势减缓,细胞生长曲线近似倒“S”形,说明细胞生长状态良好,符合细胞??生长周期规律。如图1-2。??^?2.5-??〇?2.0-?//??1-??c?1-0-?y??■S??〇?0.5-??<?^?n??〇?〇■?I?i?t?t?I?i?^?.k??0?123456789?10?11?12??Time(Days)??图l-3?CCK8法检测人PDLSCs生长曲线??Fig.?I?-3?hPDLSCs?growth?curve?was?assesed?by?CCK8?assay.??14??
2.结果??2.1?rniR-218-5p过表达及抑制表达慢病毒的构建??2.1.1?miR-218-5P过表达慢病毒阳性克隆的测序结果??测序图的对应序列如图:??TTTTTGGCTTTTTTGTTAGACGAAGCT?丁?GGGCTGCAGGTCGACTCTAGAGGATCCCCG??GGTACCGGGTTTCCAGAACGTCTGTAGCTTTTCTCCTCCTTCCCTCCATTTTCCTCTTG??GTCTTACCTTTGGCCTAGTGGTTGGTGTAGTGATAATGTAGCGAGATTTTCTGTTGTGCT??TGATCTAACCATGTGGTTGCGAGGTATGAGTAAAACATGGTTCCGTCAAGCACCATGG??AACGTCACGCAGCTTTCTACAGCATGACAAGCTGCTGAGGCTTAAATCAGGATTTTCC??TGTCTCTTTCTACAAAATCAAAATGAAAAAAGAGGGCTTTTTAGGCATCTCCGAGCTA??GCCTGTGGAATGTGTGTCAGTTAGGGTGTGGAAAGTCCCCAGGCTCCCCAGCAGGCA??GAAGTATGCAAAGCATGCATCTCAATTAGTCAGCAACCAGGTGTGGAAAGTCCCCAGG??CTCCCCAGCAGGCA??
【参考文献】:
期刊论文
[1]miRNA-143靶向MACC1抑制宫颈癌细胞侵袭[J]. 许常娟,邓丹玲,丁彦青,廖雯婷. 中国肿瘤临床. 2015(18)
[2]牙源性干细胞的研究进展[J]. 张琳琳,安莹,陈发明,金岩. 实用口腔医学杂志. 2015(03)
[3]人牙周膜干细胞的分离培养及体外诱导分化研究[J]. 徐斌,徐婕,刘宏伟. 口腔医学研究. 2011(08)
[4]改良法分离培养人牙周膜干细胞[J]. 申涛,常慧君,简从相,杨彦春,周继祥. 华西口腔医学杂志. 2011(01)
[5]人牙周膜细胞群多向分化潜能的实验研究[J]. 刘娟,赵红宇,轩东英,谢宝仪,章锦才. 华西口腔医学杂志. 2010(02)
博士论文
[1]MiR-503调控破骨细胞分化及其在绝经后骨质疏松症中作用机制[D]. 谢亘青.中南大学 2013
本文编号:3253831
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/kouq/3253831.html
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