脂肪干细胞向成牙骨质细胞诱导分化的体外实验研究

发布时间：2021-06-30 09:05

　　研究背景牙骨质是牙根表面一薄层矿化组织,在牙齿发育过程中牙骨质基质由成牙骨质细胞分泌而形成的。牙骨质是牙齿赖以稳定在牙槽窝内的重要组织结构之一,在维持牙齿的结构稳定性和生理功能中发挥重要作用。然而,牙骨质的再生往往比较困难的,主要是因为牙骨质中的成牙骨细胞量很少,体外分离培养更加不易。尽管学者们对该领域进行了大量研究,对于成牙骨质细胞的获得,仍局限于牙源性细胞,如牙囊细胞、牙胚来源的上皮根鞘细胞、牙周膜干细胞和颌突间充质细胞等,而这些种子细胞都存在取材受限的缺点。因此,成牙骨质细胞的来源问题在很大程度上制约了组织工程化牙骨质和牙周组织再生的发展。脂肪干细胞（Adipose tissue-derived stem cells: ADSCs）由于储备丰富、取材容易、自我增殖和多向分化潜能强等优点,在再生医学中引起许多学者的关注。研究显示,在不同的体外培养环境中,ADSCs可以向成骨细胞、成软骨细胞、心肌细胞、甚至上皮细胞和神经细胞分化,特别是向成骨细胞分化,体外诱导技术比较成熟。成牙骨质细胞与成骨细胞在形态、表型、矿化能力等方面有着诸多相似之处,包括ALP活性、Runx2、I型胶原（Col... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：119 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

原代ADSCs培养4天(100×)

核大 (图 1-3)。原代细胞经 0.25%胰酶(含 0.01%卷起，脱离瓶底壁变圆。ADSCs 传代后 24 h 贴满，倒置显微镜下观察，细胞仍呈长梭形，中间，细胞呈放旋涡状分布。冻存 ADSCs 复苏后细SCs 培养 48 h(100×) 图 1-2 原代 ADSC

图 1-4 SD 大鼠 ADSCs 的生长曲线三、ADSCs 来源鉴定免疫细胞化学法检测，ADSCs 胞浆中 Vimentin 染色呈强阳性，而 CK 染色呈阴性(图 1-5)，表明 ADSCs 高表达 Vimentin，不表达 CK，提示 ADSCs 来源于中胚层。流式细胞分析结果为：ADSCs 中 CD29，CD44，CD90，CD105 的检出率很高，分别是93.09%、75.11%、90.20%、95.86%，STRO-1 的检出率为 30.09%，显示 ADSCs 较高的间充质来源特征，并具有较好的干细胞特性(图 1-6)。胞数细02410 12 32 43 54 65 7 6 87 9 8 109 天

【参考文献】：
期刊论文
[1]Multilineage Differentiation of Dental Pulp Stem Cells from Green Fluorescent Protein Transgenic Mice[J]. Brian E.Grottkau,P.Prasad Purudappa.  International Journal of Oral Science. 2010(01)

博士论文
[1]利用牙囊细胞和脂肪间充质干细胞构建组织工程牙周样结构的研究[D]. 武俊杰.第四军医大学 2008



本文编号：3257458