电离辐射和紫杉醇诱导的多核细胞形成中SPATA5L1、Cyclin B2表达的变化

发布时间：2021-07-11 23:06

　　背景及目的:电离辐射与紫杉醇协同作用,可以诱导体外培养的人口腔上皮癌KB细胞产生G2/M期阻滞,形成多核细胞,并最终造成死亡。先前通过基因芯片筛选研究发现在经过电离辐射和/或紫杉醇作用后,有10条与细胞分裂有关的基因存在差异表达。本研究旨在通过Real-time PCR和Western Blot定量分析其中两条基因SPATA5L1、Cyclin B2的表达变化来揭示G2/M期阻滞及多核细胞形成的分子机制。方法:不同剂量60Coγ射线照射联合不同浓度紫杉醇作用于KB细胞,用以下实验观察受照细胞的变化:（1）倒置显微镜观察细胞形态学的变化,细胞克隆形成实验检测细胞增殖抑制效应;（2）利用Real-time PCR技术检测SPATA5L1基因表达随照射剂量和药物浓度变化的情况;（3）Western Blot实验检测电离辐射联合紫杉醇对KB细胞内SPATA5L1、Cyclin B2蛋白含量的影响。结果:（1）电离辐射和紫杉醇协同作用能显著抑制KB细胞的生长增殖,且这种协同效应是照射剂量和药物浓度依赖性的;（2）KB细胞经电离辐射、紫杉醇或两者联合作用后,形成大量多核细胞,并最终死亡;（3）Re... 

【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

各组细胞形态改变（箭头所指为多核细胞）

10图1.2 不同浓度紫杉醇及不同剂量射线作用后KB细胞存活曲线四、讨论细胞克隆形成实验是评价单细胞存活和增殖的一个良好指标，也是放射生物学中常用和可靠的实验方法[15]，通常设定单个细胞繁殖到 50 个细胞以上形成的细胞团称为一个克隆，表示其具有无限增值能力，可以称之为存活细胞。实验发现，KB 细胞受到不同剂量的 γ 射线照射联合不同浓度紫杉醇作用后，细胞克隆形成显著减少，细胞的生长受到了明显的抑制，并且与照射剂量和药物浓度相关，两者存在协同作用，表明紫杉醇具有明显的放射增敏作用。细胞受到照射、药物作用或两者联合作用后，形态上有较明显的变化，出现多核细胞

图 2.1 RT-PCR 扩增产物的琼脂糖凝胶电泳结果异表达基因的验证ime PCR 熔解曲线分析显示 GAPDH、SPATA5L1 均为单峰，表异性扩增，扩增结果可信，见图 2.2。Dissociation Curve24680246

【参考文献】：
期刊论文
[1]电离辐射诱导人口腔上皮癌KB细胞基因表达谱变化的研究[J]. 翁婉雯,许玉杰,王宗站,丁文秀,刘敏.  中国辐射卫生. 2009(03)
[2]紫杉醇放射增敏作用的分子机制[J]. 翁婉雯,许玉杰,万建美,王宗站,丁文秀,刘敏,洪承皎.  癌症. 2009(08)
[3]紫杉醇脂质纳米粒子对KB、SKOV3细胞的抑制作用[J]. 王宗站,许玉杰,汪梅花,刘敏,李智慧,翁婉雯,张刘珍.  肿瘤. 2008(11)
[4]PLLA纳米纤维担载紫杉醇对大鼠胶质瘤C6细胞株毒性研究[J]. 郭海涛,李毅平,李蕴潜,徐效义,王新.  吉林医学. 2007(01)
[5]紫杉醇的药理与临床研究进展[J]. 骆泽宇.  现代中西医结合杂志. 2006(24)
[6]白介素-6与1,25（OH）2维生素D3联合作用下大鼠骨髓破骨细胞的体外诱导培养[J]. 李永明,林珠,唐林,张晓东.  口腔医学. 2005(05)
[7]中心体异常在咖啡因增强顺铂杀伤人肝癌细胞系中的作用[J]. 齐建国,桑建利,林海燕,陈晓波,王永潮.  中国生物化学与分子生物学报. 2004(05)
[8]紫杉醇对尤文肉瘤细胞系诱导凋亡及生长抑制的研究[J]. 康立新,郭卫,郭义.  中国骨肿瘤骨病. 2003(05)
[9]紫杉醇诱导骨肉瘤细胞系凋亡的体外研究[J]. 曾春,郭卫,冯传汉.  中华骨科杂志. 2002(11)
[10]白细胞介素-1与根尖周炎骨吸收[J]. 于金华.  口腔医学. 2002(01)



本文编号：3278756