胚胎鼠唾液腺上皮细胞的自组装研究

发布时间：2021-08-05 11:55

　　目的：在三维培养条件下,观察胚胎鼠唾液腺上皮细胞分枝样结构的形成过程并研究其自组装机制,探讨唾液腺再生的方法。方法：（1）获取15天胚胎SD大鼠下颌下腺行组织块法培养。分离、纯化获得原代下颌下腺上皮细胞并传代培养；对第2代下颌下腺上皮细胞行CK19, Vimentin, Laminin免疫细胞化学鉴定及透射电镜细胞超微结构观察。（2）将第2代细胞接种至Matrigel上,进行三维培养。共分2组：第一组：实验组,在基础培养基内加抗E-cadherin及抗β-catenin。第二组：对照组,单纯基础培养基培养。在培养第1,3,6,9天内倒置显微镜下动态观察2组三维培养细胞的形态学变化。取培养第6,12天的组织固定,连续切片后行PAS染色,淀粉酶免疫组化染色,CK19免疫荧光等检测。E-cadherin,β-catenin的免疫细胞化学及激光共聚焦显微镜检测,图像采集分析MOD值,统计学软件分析。结果：（1）低浓度血清培养可以获得纯化较高的、CK19、Laminin阳性表达的下颌下腺上皮细胞。第2代下颌下腺上皮细胞在透射电镜下见细胞核大,胞浆内含大量酶原颗粒及丰富的线粒体,粗面内质网和高尔基... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

胚胎鼠下领下腺上皮细胞形态(x200)

随机取第2代胚胎鼠下领下腺上皮细胞爬片行免疫细胞化学染色，检测鉴定细胞表面标志CK19、V而entin、Laminin，CK19检测镜下可见细胞质内棕色强阳性表达，V而entin检测细胞未见棕黄色颗粒表达，大部分细胞Laminin胞浆呈棕色表达。见图3。

6天观察细胞呈不规则片状生长，有分枝形成，细胞形成分枝较短，排列较为粗乱，不规则。12天细胞生长更为密集，细胞网络状结构不明显，镜下未发现有明显的腺泡样三维结构形成。见图5。

【参考文献】：
期刊论文
[1]腺体组织损伤后体外分离下颌下腺干/祖细胞后的克隆化培养[J]. 蒋练,黄桂林,姜群,王春宇,潘光华,张霓霓,王君胜.  中国组织工程研究与临床康复. 2009(49)
[2]损伤下颌下腺模型中涎腺干/祖细胞分离及特征的初步研究[J]. 黄桂林,姜群,王天果,潘光华,王春宇,张霓霓.  实用口腔医学杂志. 2009(02)



本文编号：3323710