变形链球菌粘附相关基因表达调控与粘附关系的研究

发布时间：2021-08-20 22:20

　　龋病是危害人类健康最常见的口腔疾病之一，其发生与牙菌斑生物膜密切相关。变形链球菌（Streptococcus mutans，S．mutans）（以下简称变链菌）是龋病的主要致病菌，也是牙菌斑生物膜中重要的定植菌，变链菌对牙面的粘附是其定植、致龋的基础。变链菌的粘附经过初始粘附（非蔗糖依赖性粘附）和蔗糖依赖性粘附两个阶段最后形成牙菌斑生物膜，是一个多因素参与的复杂过程。以往研究发现变链菌不同菌株的致龋毒力存在很大差异，推测此差异的物质基础是致龋毒力因子基因的变异。因此变链菌致龋毒力因子基因多态性成为研究的热点，与粘附相关的各毒力因子基因多态性及其与变链菌致龋毒力的关系可见报道。然而，也有证据显示，致龋毒力因子基因表达的量似乎比基因多态性更能影响变链菌毒力。近年来，关于变链菌基因表达调控的研究受到越来越多学者的关注。本研究通过测定不同培养条件下变链菌粘附能力的改变及其粘附相关基因表达的变化，了解变链菌粘附相关基因表达调控与粘附毒力的相关关系。方法：采用放射性同位素标记细菌，定量检测不同培养条件下变链菌初始粘附及蔗糖依赖性粘附能力的变化。同时构建变链菌基因表达谱检测芯片，利用基因芯片技术筛选... 

【文章来源】：四川大学四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：113 页

【学位级别】：博士

【图文】：

变链菌总RNA的1%琼脂糖凝胶电泳图

本实验中目的基因及内参基因在各组样品中均能被特异性扩增，凝胶电泳显示各基因在各实验组中的CDNA产物均为单一条带，产物与实验设计吻合(见图5)。图5目的基因及内参基因产物电泳图 Fig.5EleetroPhorasisofProductsoftargetgenes and16SrRNAgene注:1、2号泳道内为spaP基因扩增产物4、5号泳道内为srtA基因扩增产物7、8号泳道内为16SrRNA基因扩增产物2.3目的基因及内参基因的标准曲线取一样品CDNA连续稀释为10一4至10一7倍作为标准模板，实时荧光定量!〕CR扩增sPa尸基因、sI’胡基因及内参基因，得到Ct值和相应模板拷贝数，分别得到目的基因及内参基因的标准曲线，如图6所示。目的基因印a尸、二胡和内参基因的标准曲线回归系数均大于0.96，三者

图6sPaP基因、‘刊月基因及内参基因的标准曲线Fig.6StandardcurvesofsPaP，sr叼and165rRNAgenesA图样品cDNAsPaP基因标准曲线B图样品cDNA:rtA基因标准曲线C图样品cDNA内参基因标准曲线2.4不同浓度葡萄糖条件下变链菌sPaP基因、s以基因及内参基变链菌临床株及参考株UA159在pH7.O的0.2、1、5%葡萄糖下，其基因的表达情况见表8、9，图7、8。统计分析结果见表10菌临床株4801和参考株UA159在不同葡萄糖条件下目的基因及内参曲线分别如图9、10所示。

【参考文献】：
期刊论文
[1]变形链球菌F-ATP酶亚基基因uncA遗传多态性的研究[J]. 杨德琴,刘天佳,庄姮,亓庆国,李颂,刘建国.  中华口腔医学杂志. 2006(01)
[2]AP-PCR基因指纹用于变形链球菌传播株与非传播株的筛选[J]. 李颂,刘天佳,庄姮,杨锦波,杨德琴,刘昭慧.  华西口腔医学杂志. 2003(05)
[3]变形链球菌葡糖基转移酶遗传多态性与龋病发生关系的研究[J]. 陈舟,刘天佳,杨锦波,庄姮,黄晓晶.  华西口腔医学杂志. 2002(06)
[4]变形链球菌（血清型C）临床分离株AP-PCR基因分型[J]. 黄晓晶,刘天佳,陈国弟,辛军平,陈舟.  中华口腔医学杂志. 2001(04)
[5]高龋及无龋者变形链球菌临床分离株致龋性研究 Ⅰ对唾液包被羟磷灰石的粘附实验[J]. 黄晓晶,刘天佳,陈舟,詹玲,杨锦波.  华西口腔医学杂志. 2000(06)

博士论文
[1]变形链球菌糖代谢相关基因的差异性表达与其致龋性关系的研究[D]. 陆玉.四川大学 2006
[2]变形链球菌产酸相关基因表达水平及其与致龋性关系的研究[D]. 皮根莉.四川大学 2006



本文编号：3354333