EGCG对人牙源性角化囊肿上皮细胞增殖和凋亡影响的研究

发布时间：2022-02-19 20:06

　　目的:探究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对牙源性角化囊肿（OKC）上皮细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:采用冷酶消化法,从牙源性角化囊肿囊壁组织分离得到上皮细胞,在角化细胞无血清培养基中进行原代细胞培养。免疫荧光染色法鉴定原代上皮细胞表面标志物广谱角蛋白（CK）、角蛋白10（CK10）、角蛋白14（CK14）以及间充质细胞表面标志物波形蛋白（Vimentin）。分别用0、20、40、80、160、320μmol/L EGCG溶液处理细胞24、48、72 h,CCK-8法检测各组细胞的增殖率。实验分组设计为对照组（0μmol/L）,EGCG低、中、高浓度组（20、160、320μmol/L）,分别处理细胞48 h,流式细胞术PI单染色法检测各组细胞周期分布情况;FITC-Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡情况。实时荧光定量PCR、Western免疫印迹法检测各组细胞Wnt/JNK信号通路关键蛋白FZD3和JNK3的表达。以正常人口腔角质细胞（HOKs）作为对照。采用SPSS 22.0软件对数据进行统计学分析。结果:牙源性角化囊肿上皮细胞可在体外成功培养并传代至... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：97 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
第一章 材料与方法
    1.1 组织及细胞来源
    1.2 材料及试剂
    1.3 试剂配制及储存
    1.4 仪器设备
    1.5 OKC上皮细胞原代和传代培养
    1.6 HOK细胞复苏和传代培养
    1.7 免疫荧光染色鉴定
    1.8 CCK-8 实验检测细胞增殖
    1.9 流式细胞术PI单染色检测细胞周期分布
    1.10 FITC-Annexin V/PI双染色检测细胞凋亡
    1.11 实时荧光定量PCR检测mRNA表达
    1.12 Western免疫印迹检测蛋白表达
    1.13 统计学分析
第二章 结果
    2.1 OKC上皮细胞形态学特点
    2.2 OKC上皮细胞免疫荧光染色鉴定
    2.3 EGCG对细胞增殖的影响
    2.4 EGCG对细胞周期的影响
    2.5 EGCG对细胞凋亡的影响
    2.6 Wnt信号通路相关蛋白FZD3和JNK3在OKC上皮细胞中高表达
    2.7 EGCG下调FZD3和JNK3 的表达
第三章 讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
附录 (20例临床病例)
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]EGCG阻断FZD3和MAPK10基因表达调控颌骨牙源性角化囊性瘤转归[J]. 杨银辉,王耀钟,袁荣涛,贾暮云,林锡江.  口腔医学. 2017(05)
[2]EGCG开窗灌洗治疗颌骨牙源性角化囊性瘤的临床疗效[J]. 杨银辉,袁荣涛,孔丽,王科,贾暮云.  口腔医学. 2016(09)
[3]牙源性角化囊性瘤恶变1例[J]. 许来青,郑广宁,罗晶晶,吴红兵,刘媛媛,郭文豪.  华西口腔医学杂志. 2015(06)
[4]Wnt信号通路相关基因在颌骨牙源性角化囊性瘤中的表达及意义[J]. 孔丽,王炳超,袁荣涛,贾暮云,王科.  上海口腔医学. 2015(01)
[5]开窗减压术治疗颌骨巨大囊性病变的临床研究[J]. 辛俊彤,袁荣涛,卜令学,贾暮云,李宁毅.  口腔医学. 2011(04)
[6]Identification of Known and Novel PTCH Mutations in Both Syndromic and Non-syndromic Keratocystic Odontogenic Tumors[J]. Shuang Pan,Li-li Xu,Li-sha Sun,Tie-jun Li* Department of Oral Pathology,Peking University School and Hospital of Stomatology,Beijing,China.  International Journal of Oral Science. 2009(01)
[7]人口腔黏膜角化上皮细胞的体外培养及生物学特性研究[J]. 胡秀莲,王兴,林野,邱立新.  中国口腔颌面外科杂志. 2004(03)



本文编号：3633535