静水压联合IGF-1干预对山羊颞下颌关节盘细胞F-actin表达影响的实验研究

发布时间：2023-04-09 20:51

　　目的：探讨静水压联合IGF-1对体外单层培养的山羊颞下颌关节(temporomandibular joint, TMJ)盘细胞骨架丝状肌动蛋白(F-actin)的影响,分析静水压、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1, IGF-1)与F-actin的关系变化对细胞生物学行为改变的影响。 方法：取4只1月龄左右山羊头,采用酶消化法分离培养颞下颌关节盘细胞,并采用Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色鉴定。取体外单层培养的第2、3代混合培养的颞下颌关节盘细胞,根据细胞干预方法不同将实验分为4组：A组由完全培养基培养,为对照组；B组以强度为0.2MPa、频率1Hz的静水压作用3h；C组以含IGF-1(10ng/ml)的完全培养基进行干预；D组采用静水压与IGF-1联合干预,方法同B、C组。分别于24、72h时以异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)标记的鬼笔环肽对F-actin行免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜下观察F-actin变化；图像分析软件测定单个细胞荧光强度。 结果：经形态学观察及免疫组织化学染色鉴定,所培养...

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 静水压在组织工程中的应用
    1.2 胰岛素样生长因子-Ⅰ在组织工程中的应用
    1.3 纤维软骨细胞生物力学与致炎因子的关系
    1.4 不同力学加载方式与纤维软骨生物力学的关系
        1.4.1 拉伸力与纤维软骨细胞生物力学的关系
        1.4.2 压缩力与纤维软骨细胞生物力学的关系
        1.4.3 剪切力与纤维软骨细胞生物力学的关系
    1.5 机械力学刺激对F-ACTIN表达影响的研究
第二章 IGF-1对山羊TMJ盘细胞F-ACTIN表达的影响
    2.1 实验材料
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 主要仪器
        2.1.3 主要器械
        2.1.4 主要试剂的配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 山羊颞下颌关节盘细胞的体外分离、原代、传代培养、冻存、复苏
        2.2.2 纤维软骨细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组化鉴定
        2.2.3 IGF-1对TMJ盘细胞F-actin表达的影响
    2.3 实验结果
        2.3.1 TMJ盘细胞形态学观察
        2.3.2 关节盘细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组化染色结果
        2.3.3 IGF-1对TMJ盘细胞F-actin表达的影响的结果
    2.4 讨论
第三章 实验二静水压合并工GF-1对山羊颞下颌关节盘细胞F-ACTIN表达的影响
    3.1 实验材料
        3.1.1 主要仪器及设备
        3.1.2 主要试剂
    3.2 实验方法
        3.2.1 山羊TMJ盘贴壁细胞受力
        3.2.2 各组干预结束后F-actin的免疫荧光染色
    3.3 统计方法
    3.4 实验结果
    3.5 讨论
第四章 结论
    4.1 主要结论
    4.2 研究展望
参考文献
综述
    参考文献
在学期间的研究成果
中英文缩略词
致谢



本文编号：3787715