shRNA质粒干扰人脐静脉内皮细胞BMP-2蛋白表达的研究

发布时间：2024-03-09 01:28

　　[背景与目的]颌骨缺损的修复问题一直是临床上难以解决的问题,构建组织工程骨用于缺损部位的移植修复是一项重要的治疗方式。组织工程骨构建方法多用单纯种子细胞接种,虽然能够成骨,但存在诸多弊端,如组织工程骨血管化缓慢,新骨生长迟缓等问题。因此如何在构建组织工程化骨组织的同时,促进小血管的长入以及细胞与支架材料复合物内血供的重建就成为骨组织工程由基础向临床应用的关键性环节。目前多种细胞的联合培养为我们解决这一问题提供了重要的方向。骨形态发生蛋白(BMP)是一组具有类似结构的高度保守的功能蛋白,它们能在体内诱导骨和软骨的形成,并且参与了肿瘤的发生与发展,现研究发现,它们还参与调节许多细胞的增殖、分化和凋亡的生物学过程。我们前期研究发现BMP-2因子是促进血管内皮细胞与骨髓间充质干细胞联合培养体系中种子细胞的增殖和成骨分化的关键因素之一。但BMP-2在联合培养体系中对BMSCs基因表达起什么影响作用还不完全清楚,其中确切机制还待进一步研究。近年来,RNA干扰技术成为基因功能研究强有力的工具,本研究先将人脐静脉内皮细胞进行离体培养,利用RNAi技术封闭该细胞BMP-2基因的表达,检测BMP-2蛋白表...

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2Fig.2illustrative质粒构建模式图

CMV入/BGHSV40Ori图2Fig.2illustrative质粒构建模式图PietureofPlsmideonstruetion在正义链和反义链之间加上了7个寡核昔酸形成的发卡结构，并在其两端分别添加BamHI和Eco租酶切位点，以TTTTTT作为终止信号，确保转....

图81号质粒测序图

图81号质粒测序图Fig.8No.1PlasmidsequencingPieture:卯3的31032033右刘3力3冈3一0330T丁CC六人人久入人C人人C人GC忆互人CTCG人人入T丁C丁CTTC久人人丁万TCG人G丁丁GGC万C丁芍GCGG人TCCC万肠C万C丁C人丁人C....

图92号质粒测序图

图7内皮细胞不同时间点的BMP一2蛋白显影Fig.7BMP一2Protein’5develoPingofhUVECsatdifferenttimes(四)、构建四条质粒质粒的测序结果图2叨3叨3103203犯3叨3刃3的3拍TCC人人人人人人C人G人TCC人人6人T6C丁TT人C....

图13一14质粒转染效果图

图13一14质粒转染效果图F19.13一14effieieneyofPlasmid’5transfeetion优化转染条件的试验结果通过脂质体剂量、质粒DNA剂量和转染时间的不同，观察到转染效率的不同，结果显示质粒3ul，脂质体10ul时，转染6小时的转染效果最理想，如图:

本文编号：3922692