噻拉嗪对离体培养鼠脑神经元神经递质和信号转导系统的影响

发布时间：2020-05-07 10:26

【摘要】：中枢神经系统内的神经递质和信号转导通路是研究麻醉机理的重要途径。据文献报道,在体实验中麻醉药物作用于动物机体,会不同程度地影响神经递质的含量和信号转导通路的相关指标进而发挥麻醉作用,但对离体神经元细胞的麻醉药物试验至今尚未见相关报道。本实验通过对体外培养的大鼠大脑神经元细胞给药,研究噻拉嗪对离体神经元细胞的药物刺激作用。通过检测神经递质的分泌和信号转导通路相关指标,来探究噻拉嗪麻醉剂对中枢神经系统的麻醉机制,为噻拉嗪的临床麻醉应用提供相应的理论依据。此外,本试验建立了适宜的神经元细胞体外原代培养方案,神经元细胞生长状态良好,且密度高,能够达到离体细胞药物刺激实验的标准,具有较为理想的试验平行性；使用LC-MS/MS检测神经递质方法可靠、准确性好、灵敏度高、重现性好,可以将该方法应用于噻拉嗪麻醉剂的作用机制研究。实验结果显示：在对神经递质探究的实验中,噻拉嗪能引起离体神经元细胞分泌的抑制性氨基酸神经递质Gly含量显著提高,GABA含量先降低再显著升高,二者整体均呈升高趋势；能够引起神经元细胞分泌的兴奋性氨基酸神经递质Asp和Glu的含量显著降低,后期逐渐恢复至空白组水平；对神经元细胞分泌的5-羟色胺类神经递质5-HT和5-HIAA含量有明显的升高作用；对神经元细胞分泌的儿茶酚胺类神经递质DA和NE的含量具有显著的抑制作用。在对信号转导通路的实验结果中发现,噻拉嗪对Na+-K+-ATP酶与Ca2+-Mg2+-ATP酶活性具有明显的抑制作用；对cAMP信号转导通路中cAMP含量的影响呈先上升再下降的趋势；在对NO-cGMP信号通路的影响研究中,发现在不同浓度的噻拉嗪作用下,NO的含量减少、NOS的活性降低、cGMP含量呈下降的趋势。本实验得出结论：噻拉嗪对中枢神经系统的抑制可能是通过促进神经元分泌抑制性神经递质GABA、Gly和5-HT来实现的,其镇静作用可能是与抑制神经元分泌NE和Glu有关；Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶可能是噻拉嗪产生麻醉作用的靶位之一,cAMP信号转导通路参与了噻拉嗪的麻醉作用机制之中,噻拉嗪对NO-cGMP信号通路的抑制,可能主要是通过抑制NOS的活性来实现的。
【学位授予单位】：东北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：S859.791

【参考文献】