七氟醚对小鼠短期记忆提取及海马PSD95、AMPA受体表达的影响

发布时间：2020-05-31 14:11

【摘要】：目的:观察七氟醚对成年小鼠在被动回避实验中潜伏期和错误次数的改变以及海马PSD95和AMPA受体表达的变化,以此评价七氟醚对短期记忆提取的影响并探讨其可能机制。方法:健康清洁级昆明小鼠144只,2~3月龄,雌雄各半,体重30~35 g。按随机数字表,将小鼠随机分为A(n=64)、B(n=80)两组,分别参加避暗实验和跳台实验。根据处理方法的不同,将A组随机分为2组(n=32):对照组(吸入40%O_2 2h),七氟醚组(吸3.3%七氟醚及40%O_2 2h);将B组也分为2组(n=40):对照组,七氟醚组。根据行为学指标测试时点,A实验组中两组小鼠分别在停止吸入七氟醚或氧气后于12h(T_1)、24h(T_2)、48h(T_3)、72h(T_4)分别随机抽取8只小鼠测定其步入潜伏期和5分钟内错误次数,每只小鼠只测试一次。B实验组中两组小鼠分别在停止吸入七氟醚或氧气后于12h(T_1)、24h(T_2)、48h(T_3)、72h(T_4)分别随机抽取10只小鼠测定步下潜伏期和5分钟内错误次数,以此评价七氟醚对记忆提取能力的影响。各时点行为学测试完毕后处死小鼠,制备海马组织标本,行HE染色,光镜下观察海马区病理学结果;采用免疫组化法和Western blot法测定海马PSD95蛋白和AMPA受体的表达水平。结果:(1)行为学实验结果A组:与对照组比较,七氟醚组T_1和T_2时步入潜伏期缩短,5分钟内错误次数增加,差异有统计学意义(P0.05)。与基础成绩比较,对照组步入潜伏期和错误次数差异无统计学意义(P0.05),七氟醚组T_1和T_2时步入潜伏期缩短,错误次数增加,差异有统计学意义(P0.05)。B组:与对照组比较,七氟醚组T_1时步下潜伏期缩短,错误次数增加,差异有统计学意义(P0.05)。与基础成绩比较,对照组步下潜伏期和错误次数,差异无统计学意义(P0.05),七氟醚组T_1时步下潜伏期缩短,错误次数增加,差异有统计学意义(P0.05)。(2)蛋白检测结果与对照组比较,七氟醚组T_1和T_2时海马PSD95受体和AMPA受体表达减少,差异有统计学意义(P0.05)。(3)HE染色结果七氟醚组可见部分神经细胞肿胀,但未见明显的锥体细胞凋亡。结论:七氟醚可抑制成年小鼠短期记忆提取能力,可能与抑制了海马PSD95和AMPA受体表达导致有效的突触传递减少有关。
【图文】：

小鼠,进洞,暗室

图 1-1 自制小鼠麻醉箱Fig 1-1.Box was used for mice anethesia 避暗实验训练期（第 1-2 天）：将小鼠放于避暗仪（见图 1-2）明室中熟悉环境 3m轻打开明室与暗室之间的滑门，记录小鼠第一次进洞的时间即步入潜伏期p through latency，STL），进洞后让其在暗室内适应 1min。在相同实验，每天训练 3 次，，每次 5min，连续训练 2 天，目的为强化小鼠趋暗行为。文献[25]，若 5min 内小鼠不进洞，将其淘汰。

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图 1-1 自制小鼠麻醉箱Fig 1-1.Box was used for mice anethesia实验期（第 1-2 天）：将小鼠放于避暗仪（见图 1-2）明室中熟悉环境打开明室与暗室之间的滑门，记录小鼠第一次进洞的时间即步入潜ough latency，STL），进洞后让其在暗室内适应 1min。在相同实天训练 3 次，每次 5min，连续训练 2 天，目的为强化小鼠趋暗行[25]，若 5min 内小鼠不进洞，将其淘汰。
【学位授予单位】：贵州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R614

【参考文献】