视交叉上核Egr基因振荡紊乱在围术期痛觉过敏中的作用及机制研究

发布时间：2020-06-14 09:12

【摘要】：第一部分七氟醚吸入麻醉对急性REM睡眠剥夺大鼠痛觉过敏的影响目的:探讨七氟醚吸入麻醉是否加重急性REM睡眠剥夺大鼠痛觉过敏,及其痛觉过敏的程度。方法:选取10月龄大小雄性SPF级健康Sprague-Dawley大鼠共76只,每只体重约为300g,采用随机数字表法分为4组(n=19):睡眠剥夺组(SD组),大鼠于睡眠剥夺水笼中行96hr急性REM睡眠剥夺;七氟醚吸入麻醉组(SEV组),大鼠放置入SD组旁有平台无水笼中96hr后于吸入麻醉玻璃箱中给予2.5%七氟醚吸入3hr;睡眠剥夺+七氟醚吸入麻醉组(SD+SEV组),大鼠先于睡眠剥夺水笼中行96hr急性REM睡眠剥夺后再于吸入麻醉玻璃箱中给予2.5%七氟醚吸入3hr;正常对照组(Control组),大鼠于SD组旁有平台无水笼中未行其他特殊处理。分别于睡眠剥夺前(T0)、七氟醚吸入后1d、3d和7d(T1-3)测定机械缩足反射阈值MWT;测定大鼠七氟醚吸入后苏醒时间。结果:1.与Control组比较,SD组、SEV组在T0-3时MWT降低(P0.05);2.与SD组比较,SD+SEV组在T0-3时MWT降低(P0.05);3.与其他组比较,SD+SEV组的MWT在T1-T3时进行性降低(P0.05),MWT恢复时间较前延长(P0.05),而术后苏醒时间无明显差别(P㧐0.05)。结论:七氟醚吸入麻醉会加重急性REM睡眠剥夺大鼠痛觉过敏并延长其恢复时间。第二部分视交叉上核Egr基因信号通路调控围术期痛觉过敏的机制目的:探讨Egr基因信号通路在急性REM睡眠剥夺大鼠经七氟醚麻醉后产生痛觉过敏中的调控作用。方法:选取10月龄大小雄性SPF级健康SD大鼠共72只,采用随机数字表法分为4组:睡眠剥夺组(SD组,n=18),大鼠于睡眠剥夺水笼中行96hr急性REM睡眠剥夺;七氟醚吸入麻醉组(SEV组,n=18),大鼠放置入SD组旁有平台无水笼中96hr后给予2.5%七氟醚吸入3hr;睡眠剥夺+七氟醚吸入麻醉组(SD+SEV组,n=18),大鼠先行96 h急性REM睡眠剥夺后再给予2.5%七氟醚吸入3 hr;正常对照组(Control组,n=18),大鼠于SD组旁有平台无睡眠剥夺笼中饲养,未行其他特殊处理。分别于七氟醚吸入后1 d、3 d和7 d(T1-3)处死大鼠,取大鼠视交叉上核组织采用western印迹分析Egr-1和Egr-2的表达水平;采集大鼠静脉血样,采用ELISA法检测血清IL-2、Egr-1和Egr-2的浓度;取大鼠脊髓背根神经节组织行免疫组织化学染色分析IL-2的表达。结果:1.与Control组比较,SD组、SD+SEV组T1-3时视交叉上核Egr-1和Egr-2表达上调(P0.05),SEV组T1-3时视交叉上核Egr-1表达上调,T1时Egr-2表达上调(P0.05);与SD组、SEV组比较,SD+SEV组T1-3时Egr-1和Egr-2表达上调(P0.05);2.与Control组比较,SD组、SEV组、SD+SEV组血清Egr-1、Egr-2、IL-2增高(P0.05)。与SD组、SEV组比较,SD+SEV组血清Egr-1、Egr-2、IL-2增高(P0.05)。SD组血清Egr-2随着时间的延长表达降低(P0.05),SEV组血清Egr-2随着时间的延长表达降低(P0.05);3.与Control组比较,SD组、SEV组T1-3时脊髓IL-2表达阳性细胞IOD增高;与SD组、SEV组比较,SD+SEV组T1-3时脊髓IL-2表达阳性细胞IOD增高(P0.05)。结论:急性REM睡眠剥夺后行七氟醚麻醉可能通过Egr/IL-2信号通路诱发痛觉过敏。
【学位授予单位】：武汉大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R614
【图文】：

实验设计,七氟醚,睡眠剥夺

图 1-1：实验设计。大鼠依次行 96hr 睡眠剥夺、3hr 2.5%七氟醚吸入。实验大鼠分别于睡眠剥夺前（T0），七氟醚吸入后 1d、3d 和 7d（T1、T2、T3）时行机械缩足反射阈值（Mechanical withdrawal threshold， MWT）检测。以 7:00am 为授时（Zeitgeber time，ZT）0 时，睡眠剥夺和七氟醚吸入起始时间是 ZT12 时。

体重,大鼠

7图 1-2：四组大鼠 T3时的体重(g, n=19,x±s)。注：＋P <0.05 vs.Control；※P<0.vs. SD；#P<0.05 vs. SEV；★P<0.05 vs. Control（T0）。

【参考文献】