泄浊解毒、活血通络方对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及对肾组织中血管生成素样蛋白2表达的影响

发布时间：2017-05-14 12:16

  本文关键词：泄浊解毒、活血通络方对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及对肾组织中血管生成素样蛋白2表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:本实验通过高糖高脂饲料饲养联合小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射建立糖尿病(DM)大鼠动物模型,应用泄浊解毒、活血通络方、厄贝沙坦及两者联用进行干预治疗,通过观察实验动物一般情况、各项生化指标、肾脏病理形态学变化以及肾组织中血管生成素样蛋白2(Angiopoietin-like protein 2,Angptl 2)的表达水平,来探讨泄浊解毒、活血通络方保护DN大鼠肾脏的可能作用机制。方法:健康雄性Sprague-Dauley大鼠85只,体重170±10g,适应性的饲养一周。随机选出15只为正常组(NG),给予普通的饲料喂养。其余70只大鼠给予高糖高脂饲料喂养,12周后给予一次性的腹腔注射STZ35mg/kg,正常组大鼠给予相当剂量的0.1mol/L枸橼酸缓冲液一次性腹腔注射。72小时后测随机血糖≥16.7mmol/L,为DM造模成功,在造模过程中死亡2只,血糖不达标1只,都予以剔除。将造模成功的大鼠随机分为4组:模型组(MG)17只、中药组(ZG)17只、西药组(XG)17只、中药加西药组(JG)16只。正常组与模型组大鼠给予相当剂量的生理盐水灌胃,各治疗组大鼠给予相应的药物灌胃。于给药期间的第4周、8周、12周监测体重、血糖及尿蛋白。第16周末,禁食12小时,不禁水,收集24小时尿液,检测24小时尿蛋白定量,称量体重,10%水合氯醛麻醉动物,腹主动脉取血检测各项生化指标,留取肾脏标本,用于光镜、电镜下观察肾脏病理形态学变化,Angptl 2 m RNA含量的检测及免疫组化中Angptl 2的表达。结果:1实验大鼠的一般情况正常组大鼠精神状态良好,饮食正常,毛色光泽,反应灵敏体重逐渐增加。造模组大鼠均出现多饮、多食、多尿、精神萎靡、毛色黯淡、倦怠少动、肌肉瘦削等症状,其中以模型组的症状严重。在实验造模的过程中,注射STZ 72小时内大鼠死亡2只,血糖不达标1只,予以剔除;在给药的过程中,模型组死亡4只,中药组死亡1只,西药组死亡2只,予以剔除;中药组2只,西药组1只,中药+西药1只血糖缓解,予以剔除。2各组大鼠BW、KW、HI(右肾重/体重)的比较与正常组比较,模型组及各治疗组的体重均明显减轻(P0.05);模型组及各治疗组之间体重无明显差别(P0.05)。与正常组比较,模型组及各治疗组的肥大指数均明显升高(P0.05);模型组及各治疗组之间肥大指数比较无明显差别(P0.05)。各组右肾重比较无明显差异(P0.05)。3各组大鼠24UTP的比较与正常组相比,各治疗组与模型组的24h UTP均明显增多(P0.05);与模型组相比,各治疗组的24h UTP均明显减少(P0.05);各治疗组之间相比,中药加西药组低于中药组、西药组(P0.05);中药组与西药组比较无明显差异(P0.05)。4各组大鼠Hb A1c的比较与正常组相比,造模各组的Hb A1c明显升高(P0.05);模型组与西药组高于中药组与中药+西药组(P0.05);模型组与西药组之间无明显差别(P0.05);中药组与中药+西药组之间无明显差别(P0.05)。5各组大鼠TC、TG的比较与正常组比较,各治疗组及模型组TC和TG水平明显升高(P0.05);与模型组比较,各治疗组TC、TG明显降低(P0.05);各治疗组之间比较,中药+西药组TC、TG低于中药组、西药组(P0.05);中药组与西药组比较无统计学意义(P0.05)。6各组大鼠TP、ALB的比较与正常组相比,模型组与各治疗组TP和ALB水平均显著降低(P0.05);与模型组相比,各治疗组均升高(P0.05);各治疗之间相比,中药+西药组高于中药组、西药组(P0.05);中药组、西药组之间无明显差异(P0.05)。7各组大鼠BUN、Scr的比较正常组、模型组、中药组、西药组、中药+西药组BUN、Scr之间相比无明显差异(P0.05)。8肾脏病理形态学观察8.1光镜观察正常组大鼠肾脏组织结构清晰正常,肾小球结构未见异常,肾小球毛细血管基底膜、系膜基质正常无增厚;模型组大鼠肾脏肾小球明显肥大,肾小球毛细血管基底膜、系膜基质增厚,系膜细胞增生,足突融合。与模型组相比,各治疗组肾脏病理改变明显减轻。8.2电镜观察正常组大鼠肾脏组织结构清晰正常,肾小球毛细血管基底膜无增厚,足细胞足突排列整齐,未见融合;模型组大鼠肾脏可见肾小球毛细血管基底膜明显增厚且不均匀,系膜基质增多,足突广泛融合;各治疗组的病理改变较模型组减轻,各治疗组间无明显差别。9免疫组织化学法检测肾组织Angptl 2的表达正常组在肾小球有少量Angptl 2表达或未见明显表达;与正常组相比,造模组大鼠肾小球中Angptl 2的表达量明显增加(P0.05);与模型组相比,各治疗组Angptl 2的表达量明显减少(P0.05);与中药组、西药组相比,中药+西药组Angptl 2的表达量减少(P0.05);中药组与西药组之间Angptl 2的表达量无明显差异(P0.05)。10 Real-Time PCR检测肾组织Angptl 2 m RNA的表达与正常组相比,模型组和各治疗组大鼠Angptl 2 m RNA表达量均明显增加(P0.05);与模型组相比,各治疗组Angptl 2 m RNA表达量明显减少(P0.05);各治疗组之间相比,中药+西药组Angptl 2的表达量少于中药组及西药组(P0.05);中药组与西药组之间Angptl 2的表达量无明显差异(P0.05)。结论:1泄浊解毒、活血通络方可以明显减少DN大鼠的24h尿蛋白定量、升高血浆白蛋白及总蛋白、降低血糖、改善血脂代谢紊乱、减轻肾脏病理损害,具有保护肾脏的作用。2泄浊解毒、活血通络方可以下调DN大鼠Angptl 2的表达,推测下调Angptl 2是其治疗糖尿病肾病的可能作用机制之一。
【关键词】：泄浊解毒 活血通络方 糖尿病肾病 Angptl 2 厄贝沙坦 动物实验
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-12
• 英文缩写12-14
• 前言14
• 材料与方法14-22
• 结果22-24
• 附图24-33
• 附表33-37
• 讨论37-44
• 结论44
• 参考文献44-48
• 综述 中医对糖尿病肾病的认识48-55
• 参考文献53-55
• 致谢55-56
• 个人简历56

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 南征;朴春丽;何泽;王秀阁;韩香莲;孙胜君;陈锐;;消渴肾病诊治新论[J];环球中医药;2012年08期

2 王珍;王梦迪;刘笑慈;王，

本文编号：365163