钩藤碱对自发性高血压大鼠血管内皮功能影响的实验研究

发布时间：2017-06-07 04:22

  本文关键词：钩藤碱对自发性高血压大鼠血管内皮功能影响的实验研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:1.通过观察钩藤碱(rhynchophylline,Rhy)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)单次给药后不同时间的血压影响,确定有效给药剂量。2.研究钩藤碱连续给药后对大鼠血浆不对称二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)、血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、血管紧张素1型受体(Angiotensin type 1 receptor,AT1R)、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)水平及对血清肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、一氧化氮(nitric oxide,NO)含量和一氧化氮合成酶(nitric oxide synthetase,NOS)活性的影响,探讨其长期用药降压效果及对血管内皮的保护作用及机制。方法:1.单次给药:取70只12周龄雄性SHR,根据收缩压(systolic blood pressure,SBP)将实验动物均衡随机分为模型对照组(等容量蒸馏水)、Rhy剂量一、二、三、四、五组(剂量分别为1.25mg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg)以及阳性对照药卡托普利(captopril)组(6.25mg/kg),每组10只,另取10只12周龄雄性SD大鼠作为正常对照组(等容量蒸馏水)。采用尾套法,分别于给药前和给药后0.5、1、2、3h用Bp-6型动物无创血压测试仪测量每只大鼠SBP,连续测量3次,取平均值。2.连续给药:取50只12周龄雄性SHR,根据SBP将实验动物均衡随机分为模型对照组(等容量蒸馏水)、Rhy高、中、低剂量组(剂量分别为5mg/kg、2.5mg/kg、1.25mg/kg)以及阳性对照药卡托普利(captopril)组(6.25mg/kg),每组10只,另取10只12周龄雄性SD大鼠作为正常对照组(等容量蒸馏水),连续给药21d,用Bp-6型动物无创血压测试仪测定连续给药前大鼠尾动脉SBP和给药后第7、14、21d的SBP,末次给药后,用浓度为3.5%的水合氯醛麻醉,经腹主动脉取血,采血浆,用酶联免疫吸附剂测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定血浆中ADMA、AngⅡ、AT1R、ET-1、HGF、NO水平和NOS活性;取大鼠腹主动脉,用4%多聚甲醛溶液固定,石蜡包埋、切片后,用HE染色法观察血管内皮病理学变化,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定法(terminal dexynucleotidyl transferase(TDT)-mediated d UTP nick labeling,TUNEL)检测血管内皮细胞凋亡情况;同时低温取大鼠腹主动脉,采用Western blotting检测血管内皮细胞HGF、c-Met、PPARγ蛋白的表达。结果:1.单次给药后:Rhy各剂量组与模型组相比,均可显著降低SHR的SBP,差异有统计学意义(P0.01)。Rhy剂量1.25mg/kg、2.5mg/kg组降压效果与阳性组无差异。2.连续给药后:①与模型对照组比较,阳性组和Rhy各剂量组的SBP明显降低,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);与阳性组比较,Rhy各剂量组SBP与阳性组SBP无差异,(P0.05)。②与模型对照组比较,Rhy各剂量组可显著降低SHR血浆ADMA、AngⅡ、AT1R、ET-1含量,并能显著升高血清HGF、NO含量和NOS活性,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。③与模型对照组比较,Rhy各剂量组可显著升高SHR血管内皮细胞HGF、c-Met、PPARγ蛋白的表达,且Rhy高、中剂量组差异有统计学意义(P0.05)。④与模型对照组比较,Rhy各剂量组大鼠血管内皮细胞排列较整齐,增厚不明显,与模型对照组比有明显差异。⑤与模型对照组比较,Rhy各剂量组大鼠血管内皮细胞凋亡不明显。结论:1.Rhy剂量10mg/kg、20mg/kg在给药后短时间内基本达到最大降压效果,持续观察血压几乎不再下降,而Rhy剂量1.25mg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg却有持续降压作用,提示Rhy剂量1.25mg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg有很好的降压作用,故选用此三个剂量为Rhy的有效降压剂量。2.Rhy能有效降低血浆ADMA、AngⅡ、AT1R、ET-1含量,升高血清HGF、NO含量和NOS活性,升高血管内皮细胞HGF、c-Met、PPARγ蛋白的表达,有效改善血管内皮细胞的完整性,进而实现保护血管内皮功能的作用。
【关键词】：钩藤碱 自发性高血压大鼠 非对称二甲基精氨酸 内皮素 一氧化氮 一氧化氮合酶
【学位授予单位】：安徽中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5
【目录】：

• 中文摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 英文缩略词(ABREVIATION)11-12
• 第一部分 不同剂量钩藤碱对自发性高血压大鼠的降压作用12-18
• 1 前言12-13
• 2 主要实验材料及条件13
• 2.1 实验药物与试剂13
• 2.2 试验仪器13
• 2.3 实验动物13
• 3 实验方法13-14
• 3.1 动物分组13
• 3.2 给药方法13-14
• 3.3 大鼠尾动脉收缩压的测定14
• 3.4 统计学处理14
• 4 实验结果14-17
• 5 结论17-18
• 第二部分 钩藤碱对自发性高血压大鼠血管内皮功能的影响18-49
• 1 前言18-22
• 1.1 ADMA与血管内皮功能的关系19-20
• 1.2 HGF与血管内皮功能的关系20-22
• 2 主要实验材料及条件22-24
• 2.1 实验药物22-23
• 2.2 试验仪器23-24
• 2.3 实验动物24
• 3 实验方法24-33
• 3.1 动物的分组24-25
• 3.2 给药方法25
• 3.3 动物处理及样本取材25
• 3.4 指标的检测及方法25-33
• 3.5 统计学处理33
• 4 实验结果33-46
• 4.1 Rhy对SHR一般行为学影响33-34
• 4.2 Rhy对SHR尾动脉SBP的影响34-36
• 4.3 Rhy对血浆ADMA含量的影响36-37
• 4.4 Rhy对血浆ET-1 含量的影响37-38
• 4.5 Rhy对血浆AngⅡ含量的影响38-39
• 4.6 Rhy对血浆AT1R含量的影响39-40
• 4.7 Rhy对血清NOS活性的影响40-41
• 4.8 Rhy对血清NO含量的影响41-42
• 4.9 Rhy对血清HGF含量的影响42
• 4.10 Rhy对SHR血管内皮细胞HGF、c-Met、PPARγ 的蛋白表达的影响42-44
• 4.11 Rhy对SHR血管内皮细胞病理学的影响44-45
• 4.12 Rhy对SHR血管内皮细胞凋亡的影响45-46
• 5 讨论46-49
• 5.1 动物模型和阳性药物的选择46
• 5.2 Rhy可有效降低SHR的血压并调节血管内皮功能障碍46-49
• 6 小结49
• 结论49-51
• 参考文献51-58
• 技术路线图58-59
• 综述59-69
• 参考文献65-69
• 个人简介69-70
• 研究生期间发表论文70-71
• 致谢71-72

【参考文献】

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  本文关键词：钩藤碱对自发性高血压大鼠血管内皮功能影响的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：428189