高糖经LXRs/LncRNAOR13C9/ABCA1轴加重肾小球血管内皮细胞脂质沉积的机制研究

发布时间：2024-02-13 23:57

　　目的:糖尿病肾病(DKD)是糖尿病常见的微血管并发症,是终末期肾病最常见的病因之一。中国作为糖尿病大国,目前的患病人数已经超过1亿,而糖尿病肾病也成为影响国人生活质量和寿命的重要疾病。临床上可观察到糖尿病患者常伴有脂质代谢的异常,糖尿病肾病患者肾脏组织中也检测到有脂质的沉积,脂类代谢的紊乱可能是导致糖尿病肾病的原因之一。但是高糖对细胞内脂质沉积的影响机制目前还不清楚。本研究以人肾小球血管内皮细胞(HGVECs)为研究对象,采用RT-qPCR、蛋白质免疫印迹(WB)、基因芯片等技术手段探究高糖对细胞内脂质沉积的影响,并明确其具体的机制。方法:1、水溶性胆固醇模拟体内高脂环境HGVECs给予胆固醇(0μg/ml;200μg/ml;400μg/ml;600μg/ml;800μg/ml)干预细胞12h、24h、48h后进行CCK8实验检测细胞的活性,筛选出合适的胆固醇干预浓度和干预时间。2、硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)的含量HGVECs给予胆固醇(0μg/ml;200μg/ml;400μg/ml;600μg/ml;800μg/ml)干预细胞24h后,检测胆固醇对内皮细胞NO合成和分泌的影响...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.正常培养的人肾小球血管内皮细胞（10×10）

常培养的人肾小球血管内皮细胞（细胞活性的影响外胆固醇干预条件，我们通过CC验结果显示，与正常对照组相比，对细胞的活性没有影响，48h时细24h和48h都导致细胞的活性下选取此干预条件来进行后续实验进一步下降。

图2.不同浓度胆固醇干预不同时间下细胞活性的变化（*：与Control组比较

图1.正常培养的人肾小球血管内皮细胞（10×10）水溶性胆固醇对细胞活性的影响了选取合适的体外胆固醇干预条件，我们通过CCK8实验检测不同细胞的活性，实验结果显示，与正常对照组相比，200μg/ml的胆固细胞12h和24h对细胞的活性没有影响，48h时细胞活性....

图3.不同浓度胆固醇干预下的细胞NO含量

天津医科大学硕士学位论文固醇对细胞NO分泌的影响NO是内皮细胞的特有功能，接下来我们检测了胆固醇对于内皮细泌的影响。如下图所示，与空白对照组相比，不同浓度的胆固醇，NO的含量无明显变化，差异无统计学意义（图3）。说明胆固细胞，但是对细胞的NO合成和分泌功能并没有影响....

图4.不同浓度胆固醇干预下细胞内脂质沉积（细胞油红O染色）

图4.不同浓度胆固醇干预下细胞内脂质沉积（细胞油红O染色）5.不同浓度胆固醇干预下细胞内胆固醇含量（酶法）（*：与NC组比较。

本文编号：3897419