沉默钙敏感受体对大鼠尿钙排泄影响及对紧密连接蛋白14的作用

发布时间：2024-05-12 22:15

　　目的了解沉默大鼠钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)基因后,肾脏组织紧密连接蛋白14(the tight junction protein claudin 14,CLDN14)的表达情况及24 h尿钙排泄量变化情况。方法 (1)建立遗传高钙尿结石形成(GHS)大鼠模型;(2)CaSR-miRNA干扰病毒分别干扰GHS组大鼠和正常尿钙对照组大鼠(NC)作为实验组,生理盐水干预作为对照组。(3)处死大鼠取双肾并测24 h尿钙;(4)RT-PCR和Western Blot技术检测大鼠肾上皮细胞CLDN14的mRNA和蛋白表达水平。结果 (1)CaSR-miRNA干扰病毒后,与对照组大鼠相比,GHS大鼠组尿钙排泄量减少,差异有统计学意义(P <0.05);NC组大鼠尿钙排泄量变化不明显,差异无统计学意义(P> 0.05)。(2)GHS组大鼠CLDN14 mRNA和蛋白表达量减少,差异有统计学意义(P <0.05);NC组大鼠CLDN14 mRNA和蛋白表达无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 (1)干扰病毒体内干扰GHS...

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【部分图文】：

图3干扰后GHS组与NC组大鼠CLDN14基因的mRNA表达水平图

慢病毒干扰后，CHS组CLDN14mRNA表达水平下降，较对照组差异有统计学意义（P<0.05）；与对照组相比，NC组CLDN14mRNA表达水平较变化不明显，差异无统计学意义（P>0.05）（图3）。2.4Westernblot检测CLDN14的蛋白表达

图4GHS组大鼠钙CLDN14的蛋白表达检测结果

GHS组与NC组上CLDN14蛋白质表达图（以β-actin为内参，以各条带control组为校准）见图4、5。其灰度值统计图见图6。图5NC组大鼠钙CLDN14的蛋白表达检测结果

图5NC组大鼠钙CLDN14的蛋白表达检测结果

图4GHS组大鼠钙CLDN14的蛋白表达检测结果图6干扰后GHS组与NC组大鼠CLDN14蛋白的表达水平变化图

图6干扰后GHS组与NC组大鼠CLDN14蛋白的表达水平变化图

图5NC组大鼠钙CLDN14的蛋白表达检测结果3讨论

本文编号：3971973