胞外酸化对大鼠关节软骨细胞焦亡的影响及可能机制

发布时间：2017-10-24 22:27

  本文关键词：胞外酸化对大鼠关节软骨细胞焦亡的影响及可能机制

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【摘要】：目的观察胞外酸化对大鼠关节软骨细胞焦亡的影响,研究该过程中可能机制。方法利用酶消化法获得原代大鼠关节软骨细胞。软骨细胞分为不同pH处理组(pH7.4、pH 7.0、pH 6.5和pH 6.0)以及pH6.0酸化不同时间组(0、6、12、24、48 h),经ROS还原剂NAC预处理的酸化组和正常组,Real-time PCR和Western blot观察各组促炎细胞因子IL-1β、IL-18和炎症小体组成成分ASC、NLRP3、caspase-1基因和蛋白的表达情况,ELISA检测各组细胞培养基中的IL-1β、IL-18含量,AO/EB染色和LDH细胞毒性检测试剂盒分析细胞的死亡情况,ROS测定试剂盒观察细胞内ROS荧光强弱。结果与pH 7.4组比较,酸化组的促炎细胞因子IL-1β、IL-18和炎症小体组成成分ASC、NLRP3、caspase-1基因和蛋白的表达明显增加,荧光显微镜观察到ROS荧光明显增强,AO/EB染色和LDH检测实验发现酸化可以诱导软骨细胞死亡,且pH 6.0酸化处理组效果最明显;ROS还原剂NAC预处理可以明显下调IL-1β、IL-18、ASC、NLRP3、caspase-1基因和蛋白的表达,并且明显减弱软骨细胞内ROS荧光,同时明显下调细胞死亡率。结论胞外酸化可能通过上调细胞内ROS的含量,促使软骨细胞发生焦亡。
【作者单位】： 安徽医科大学药学院;
【关键词】： 关节炎 关节软骨细胞 细胞焦亡 炎症小体 ROS NAC
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No 81271949,30873080)
【分类号】：R593.22
【正文快照】： R593.22类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种难治性多系统的免疫性疾病,累及患者的外周关节,具有较高的致残、致畸性,对人类的健康危害很大[1]。研究表明,关节腔内炎性代谢物聚集导致的关节液p H值下降(可降至6.0及以下)是RA发病的主要原因之一,可导致软骨细胞过度凋

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本文编号：1090845