orexin-1受体抑制剂通过Wnt通路促进骨髓间充质干细胞的成骨分化

发布时间：2018-08-17 11:42

【摘要】：目的研究Wnt/β-catenin信号通路对orexin-1受体抑制剂介导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响。方法(1)分离提取SD大鼠股骨、胫骨的BMSCs,用流式细胞仪进行细胞表型鉴定;(2)实验分组:对照组、10-5mol/L、10-6mol/L质量浓度的orexin-1受体抑制剂溶液,于成骨诱导第5天免疫印迹法和实时荧光定量PCR法观察Wnt/β-catenin信号通路关键靶点蛋白Dickkopf-1、Gsk3β、β-catenin以及基因Gsk3β、β-catenin mRNA表达,以观察Wnt信号通路对orexin-1受体抑制剂诱导大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。结果 10~(-5)mol/L、10~(-6)mol/L的orexin-1受体抑制剂处理BMSCs5天后,Dickkopf-1、β-catenin和GSK3β蛋白表达升高,β-catenin和GSK3βmRNA表达升高。结论 orexin-1受体抑制剂促进大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞方向分化的作用可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关。
[Abstract]:Objective To investigate the effect of Wnt/beta-catenin signaling pathway on the osteogenic differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) mediated by orexin-1 receptor inhibitors.Methods (1) BMSCs from femur and tibia of SD rats were isolated and identified by flow cytometry. Immunoblotting and real-time fluorescence quantitative PCR were used to observe the expression of Dickkopf-1, Gsk3beta, beta-catenin and Gsk3beta, beta-catenin mRNA in Wnt/beta-catenin signaling pathway and orexin-1 receptor inhibitor-induced osteogenic differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells. Results Five days after BMSCs were treated with 10-5 mol/L and 10-6 mol/L orexin-1 receptor inhibitors, the expressions of Dickkopf-1, beta-catenin and GSK3 beta protein were increased, and the expressions of beta-catenin and GSK3 beta mRNA were increased. Conclusion The effect of orexin-1 receptor inhibitors on the differentiation of BMSCs into osteoblasts may be related to the regulation of Wnt/beta-cateni. N signaling pathway.
【作者单位】： 广东医科大学解剖学教研室;广东医科大学药理学教研室;
【基金】：2014年广东医学院科研基金(2XJ1401P) 2015年湛江市非资助科技攻关计划项目(2015B01083) 2015年湛江市资助科技攻关计划(2015A01030)
【分类号】：R580

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