晚期糖基化终末产物调控平滑肌细胞钙化的机制研究

发布时间：2019-05-29 00:49

【摘要】：目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)调控其受体促进人股动脉平滑肌细胞钙化的机制。方法2014年1月—2015年3月,将股动脉中膜平滑肌层剪成1~2 mm组织块培养,选取3~8代平滑肌细胞用于实验。将平滑肌细胞分为4组,A组单纯于DMEM培养基中培养,B组于含10 mmol/Lβ磷酸甘油钠的DMEM培养基中培养,C、D组分别于含10 mmol/Lβ磷酸甘油钠的DMEM培养基中加入20、40 mg/L AGEs,各组平滑肌细胞干预培养96 h。合成3对随机AGEs受体(RAGE)siRNA,以50 nmol/L转染C组平滑肌细胞,24 h后进行siRNA沉默效果检测,选取转染效率较高的序列用于实验。分别取转染前后平滑肌细胞,采用Von Kossa染色实验观察平滑肌细胞内钙沉积情况,采用Western blotting法检测RAGE、β-catenin、骨保护素(OPG)表达水平。结果未转染的平滑肌细胞中,A组无钙化斑块形成,B组可见明显的钙化斑块;C、D组细胞质、细胞核呈现粉红色的数量增加,钙化斑块明显增多。经转染后,C组平滑肌细胞细胞质、细胞核呈现粉红色的数量较未转染细胞减少,钙化斑块形成受到抑制。未转染的各组平滑肌细胞RAGE、β-catenin、OPG表达水平比较,差异均有统计学意义(P0.05);其中,C组平滑肌细胞RAGE、β-catenin、OPG表达水平高于B组,D组平滑肌细胞RAGE、β-catenin、OPG表达水平高于B、C组(P0.05)。C组平滑肌细胞转染后RAGE、β-catenin、OPG表达水平均低于转染前(P0.01)。结论 AGEs通过与其受体结合而介导平滑肌细胞钙化,其机制可能为RAGE激活Wnt/β-catenin信号通路,使β-catenin下游蛋白OPG表达水平升高。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of advanced glycosylation end product (AGEs) regulating its receptor promoting calcification of human femoral artery smooth muscle cells. Methods from January 2014 to March 2015, the media smooth muscle layer of thigh artery was cut into 1 鈮，

本文编号：2487509