微小RNA在原发性痛风性关节炎患者中的表达及临床意义
发布时间:2019-10-13 20:37
【摘要】:目的:探讨mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223在原发性痛风性关节炎(gouty arthritis,GA)患者的表达及临床意义。方法:(1)实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-q PCR)(Taq Man探针法)检测急性期痛风患者(acute gout,AG)、间歇期痛风患者(intercritical gout,IG)和健康体检者(heathy control,HC)的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223表达水平,并收集GA和HC的临床资料及实验室检查指标。(2)RT-q PCR(Taq Man探针法分别检测HC的PBMCs经浓度为100μg/ml的尿酸盐(monosodium urate,MSU)刺激组和磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)对照组刺激12h后mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223的表达水平。(3)RT-q PCR检测mi R-223的靶基因NLRP3的m RNA在刺激组和对照组的PBMCs中的表达。(4)酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测刺激组和对照组的培养上清液中IL-1β的浓度并比较差异。(5)采用SPSS 17.0统计软件进行分析,计量资料组间比较采用Wilcoxon秩和检验,MSU刺激后基因表达水平采用t检验,变量间的相性采用Spearman相关分析。结果:(1)mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223在三组中的表达存在差异并具有统计学意义(P均0.05),进一步两两比较发现mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223在AG组(0.006±0.023,0.986±1.313,0.086±0.288,8.665±17.396)和IG组(0.004±0.0251,0.277±2.087,0.0905±1.754,7.621±16.531)的表达均低于在HC组(0.180±0.629,4.595±4.273,0.489±2.474,25.992±75.905),差异有统计学意义(Z=34.690,11.334,9.762,11.387;P均0.01),mi R-223、mi R-27a在AG组的表达低于IG组,差异有统计学意义(P均0.01),mi R-23a、mi R-24-2在AG的表达低于IG组,但差异无统计学意义(P0.05)。(2)MSU(100μg/ml)刺激HC的PBMCs 12h后mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223的表达(0.0026±0.0004,1.2665±0.2112,0.0434±0.0028,0.335±0.201)较对照组(0.0168±0.0056,1.6256±0.2634,0.1644±0.0319,1.051±0.236)明显降低,差异有统计学意义(T=-5.04,P0.01;T=-2.61,P0.05;T=-7.55,P0.01;T=-5.164,P0.01)。(3)MSU刺激组和对照组中mi R-223靶基因NLRP3的m RNA表达水平、培养上清液中IL-1β浓度(5.231±0.432,86.235±4.586)较空白对照组的表达(1.156±0.448,12.587±6.342)显著增高,差异有统计学意义(t=14.640,21.042;P0.01)。(4)Spearman相关性分析发现在GA的PBMCs中mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a的表达水平相互之间均呈正相关(r=0.548,0.690,0.523;P均0.01);mi R-24-2、mi R-223在GA的PBMCs的表达均与总胆固醇呈正相关(r=0.46,0.45;P均0.05),mi R-24-2的表达与载脂蛋白B100浓度呈正相关(r=0.44;P0.05)。结论:mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223在原发性痛风性关节炎患者及在经MSU刺激正常人PBMCs中的表达均显著降低,其中mi R-223的低表达减弱了对NLRP3炎性体的抑制作用,从而促使炎症因子IL-1β的释放,提示其可能参与原发性痛风性关节炎的炎症反应的调节,同时mi R-24-2、mi R-223可能还参与原发性痛风患者的脂代谢的调节。
【图文】:
AmiRNA合成图
成熟MicroRNA合成图
【学位授予单位】:川北医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R589.7
本文编号:2548879
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【学位授予单位】:川北医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R589.7
【参考文献】
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,本文编号:2548879
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