利拉鲁肽通过下调microRNA 27b表达促进白色脂肪棕色化

发布时间：2020-05-19 13:14

【摘要】：目的:明确利拉鲁肽对高脂喂养大鼠白色脂肪组织和3T3-L1细胞分化的脂肪细胞棕色化的影响,并探究其可能的作用机制。方法:1动物实验将40只SD大鼠随机分为5组,利拉鲁肽低、中、高剂量组分别皮下注射相应剂量利拉鲁肽,对照组和高脂组给予等体积生理盐水皮下注射。药物干预12周末将大鼠称重后处死,留取附睾白色脂肪组织;HE染色观察大鼠附睾白色脂肪组织的形态学变化;Real-Time PCR检测miR-27b的表达水平;Real-Time PCR及Western Blot技术分别检测UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA及蛋白表达水平。2细胞实验复苏3T3-L1前脂肪细胞并诱导为成熟的脂肪细胞。将成熟脂肪细胞随机分为3组,分别给予阴性对照或不同浓度利拉鲁肽干预48小时。通过油红O染色法以及甘油三酯试剂盒检测细胞内甘油三酯的含量,同时运用PCR技术检测mi R-27b水平,PCR技术和Western Blot技术检测棕色化标志基因UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA和蛋白表达。成熟脂肪细胞随机分为转染组和对照组,进行miR-27b转染后,每组再随机分为2组,分别给予利拉鲁肽和阴性对照干预48小时后收集细胞。PCR及Western Blot技术检测棕色化标志基因UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA和蛋白的表达。结果:1动物实验:药物干预12周后,高脂组大鼠体重明显高于对照组(P0.05),利拉鲁肽各剂量组大鼠体重均低于对照组和高脂组(P0.05),利拉鲁肽各剂量组脂肪细胞体积较高脂组大鼠附睾白色脂肪明显减小;与对照组相比,利拉鲁肽各组脂肪细胞体积无明显变化,上述指标在利拉鲁肽各剂量组之间均无统计学差异(P0.05)。与对照组相比,高脂组大鼠白色脂肪组织中mi R-27b表达升高(P0.05);与高脂组相比,利拉鲁肽各剂量组白色脂肪组织中miR-27b表达下降(P0.05);利拉鲁肽各剂量组之间miR-27b表达无统计学差异(P0.05)。高脂组大鼠脂肪组织中棕色化标志基因UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA及蛋白表达较对照组下降(P0.05);与高脂组相比,利拉鲁肽各剂量组UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA及蛋白表达增加(P0.05);上述指标的mRNA及蛋白达量在利拉鲁肽各剂量组之间无统计学差异(P0.05)。2细胞实验:与Vechile组相比,1uM和10uM组细胞内脂滴体积明显减小,甘油三酯含量明显降低(P0.05)。与Vechile组相比,1uM和10uM组细胞内miR-27b表达下降(P0.05),棕色化标志基因UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA及蛋白表达增加(P0.05)。与mimic-nc+con组相比,miR-27b+con组棕色化标志基因UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA及蛋白表达降低(P0.05);与mi R-27b+con组相比,miR-27b+Lira组内上述棕色化标志基因mRNA及蛋白表达增加(P0.05)。结论:利拉鲁肽可降低肥胖大鼠体重,还可降低肥胖大鼠脂肪组织及3T3-L1脂肪细胞内脂质含量。利拉鲁肽能够促进大鼠白色脂肪组织及成熟3T3-L1脂肪细胞的白色脂肪棕色化过程,并可能通过下调mi R-27b实现该作用。
【图文】：

高脂,大鼠,脂肪组织,HE染色

周末正常对照组，高脂组，利拉鲁肽低、中、高剂量组脂肪组织 HE 染色（×200）E staining of white adipose tissue in Con group, HF grou, Lira-M group and Lira-H group at the end of 12th weekC o n H F L ir a - L L ir a - M L ir a - H0123m iR - 2 7 bRelativemRNAexpressionC o nH FL ir a - LL ir a - ML ir a - H** #* #* #图 3 12 周末各组大鼠白色脂肪组织 miR-27b 表达iR-27b expression in white adipose tissue in rats at the en

脂肪细胞,油红,对照组

6 干预 48 小时后，对照组、1uM 及 10uM 利拉鲁肽组脂肪细胞油红染色（×200）ig.6 Representative images of adipocytes treated with vehicle, 1 uM and uM lira for 48 hours by Oil Red O staining（×200）6810TglevelVehicle1uM10uM**
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R589.2

【参考文献】