人脐带间充质干细胞微泡干预对胶原诱导关节炎大鼠脾脏Foxp3、ROR-γt的影响

发布时间：2020-07-01 10:25

【摘要】：背景:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性、系统性、炎症性自身免疫性疾病,其病理改变是机体免疫功能紊乱导致的滑膜增生、血管翳形成、骨及软骨组织的破坏。有研究表明,Treg/Th17细胞的平衡失调对RA的发生、发展起着至关重要的作用,而Foxp3、ROR-γt分别是调控Treg与Th17分化和发育的正向转录因子。间充质干细胞(Mesenchyma Stem Cells,MSCs)已被证实是一种具有高度增殖能力和多向分化潜能的细胞,可通过调节炎症细胞及因子的表达,达到治疗RA的目的。近几年研究发现,间充质干细胞来源的微泡(Mesenchymal Stem Cells derived Microvesicles,MSC-MVs)同样具有免疫调节作用,同时可避免细胞治疗引起的血管栓塞、异位成骨等风险,因此逐渐成为新型的研究热点。目的:探讨Treg与Thl7细胞相应转录因子Foxp3、ROR-γt在RA脾脏中的表达水平;探讨hUCMSC-MVs治疗RA的疗效及可能的作用机制。方法:选用雌性Wistar大鼠,随机分为6组,每组6只,其中1组设为正常对照组;其余5组通过多点皮下注射弗氏完全佐剂+II型胶原对其进行初次免疫,2周后腹腔再次注射,形成CIA大鼠模型。再次免疫后,次日分别进行尾静脉注射干预,即CIA模型组(等量生理盐水),hUCMSCs组(2×10~6/kg/只),hUCMSC-MVs低浓度组(30 ug/100μl/只)及高浓度组(90 ug/100μl/只),MTX组(MTX0.9 mg/kg/w腹腔注射)。初次免疫42天时留取大鼠脾脏组织,采用RT-PCR法检测技术测定各组脾脏中Foxp3、ROR-γt mRNA的表达水平及Foxp3/ROR-γt表达量比值的变化。结果:1、CIA模型组大鼠脾脏组织中Foxp3及ROR-γt的表达RT-PCR分析结果显示,CIA模型组大鼠脾脏组织中Foxp3 mRNA表达水平下降,ROR-γt mRNA表达水平升高,Foxp3/ROR-γt表达量比值降低,差异有统计学意义(F值分别为78.295、168.131、129.782,P值均0.001)。提示CIA大鼠脾脏中存在Foxp3/ROR-γt的失衡表达,表现为Foxp3低表达,ROR-γt高表达。2、hUCMSC-MVs干预组大鼠脾脏组织中Foxp3、ROR-γt的表达及Foxp3/ROR-γt表达量比值变化,较其它干预组作用的优劣RT-PCR分析结果显示,各干预组均可上调CIA大鼠脾脏组织中Foxp3 mRNA表达水平,下调ROR-γt mRNA表达水平,Foxp3/ROR-γt表达量比值升高;hUCMSC-MVs高浓度组较hUCMSCs及MTX组,Foxp3 mRNA表达水平升高,ROR-γt mRNA的表达水平下降,上调Foxp3/ROR-γt表达量比值的作用明显;hUCMSC-MVs高浓度干预组较hUCMSC-MVs低浓度组作用明显,各组间差异有统计学意义(F值分别为78.295、168.131、129.782,P0.001)。结论:1、CIA大鼠体内存在Foxp3/ROR-γt的失衡表达;2、hUCMSC-MVs对CIA大鼠Treg/Th17失衡的调节机制同hUCMSCs相似,通过上调Foxp3 mRNA的表达水平,下调ROR-γt mRNA的表达水平,调控Foxp3/ROR-γt的失衡表达,进而可能纠正Treg/Th17失衡;3、hUCMSC-MVs的干预能力与其浓度有关,高浓度干预组对CIA大鼠转录因子Foxp3、ROR-rt异常表达的调节作用优于低浓度组,且不弱于hUCMSCs及MTX组。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R593.22
【图文】：

山西医科大学硕士学位论文2 结 果2 hUCMSC-MVs 对 CIA 大鼠脾脏组织 Foxp3、ROR-γt mRNA 表达的影响2.1 Real Time-PCR 检测各实验组大鼠脾脏组织 Foxp3、ROR-γt mRNA 的表达RT-PCR 结果显示：各实验组中脾脏组织 Foxp3、ROR-γt mRNA 均得到表达，Foxp3、ROR-γt mRNA 的扩增曲线和溶解曲线（如图 1、图 2）所示：

山西医科大学硕士学位论文2 结 果2 hUCMSC-MVs 对 CIA 大鼠脾脏组织 Foxp3、ROR-γt mRNA 表达的影响2.1 Real Time-PCR 检测各实验组大鼠脾脏组织 Foxp3、ROR-γt mRNA 的表达RT-PCR 结果显示：各实验组中脾脏组织 Foxp3、ROR-γt mRNA 均得到表达，Foxp3、ROR-γt mRNA 的扩增曲线和溶解曲线（如图 1、图 2）所示：

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本文编号：2736639