离子型谷氨酸受体拮抗剂MK-801和NBQX对胶原诱导型关节炎大鼠的镇痛作用

发布时间：2020-07-18 07:00

【摘要】：目的:在大鼠胶原诱导关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型中,使用不同离子型谷氨酸受体拮抗剂,即N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-asparticacid,NMDA)受体拮抗剂MK-801及非NMDA受体拮抗剂NBQX,通过阻断谷氨酸与相应受体结合而产生镇痛作用,进而研究两种拮抗剂在镇痛作用方面对大鼠行为的影响,以及对分子生物学指标产生的影响,即应用上述拮抗剂后大鼠血清及组织液中环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和Janus激酶-3(Janus-activated kinase,Jak3)等表达的变化。方法:建立大鼠CIA模型,通过体内研究,向大鼠关节腔内注射不同离子型谷氨酸受体拮抗剂MK-801和NBQX,观察CIA大鼠行为和分子生物学指标的改变。行为评估内容包括大鼠的触痛及关节肿胀情况,触痛情况使用机械性缩足阈值(paw-withdrawal threshold,PWT)来评价,同时使用排水法测足容积来评估肿胀情况。分子生物学指标相关研究即由大鼠心脏采血,并取组织匀浆液,检测血清及组织液中在拮抗剂使用后COX-2和Jak3等表达的变化。结果:MK-801和NBQX在单独或联合使用时均能表现出镇痛作用(P0.01),且镇痛作用持续时间均大于24 h,两种拮抗剂均在注射后4 h达到镇痛作用的峰值,且NBQX比MK-801镇痛作用更强(P0.05);MK-801和NBQX在单独及联合使用时,均不能改变CIA大鼠的足跖肿胀(P0.05);MK-801可降低CIA大鼠COX-2的表达(P0.01),NBQX则未见此作用(P0.05);MK-801和NBQX对CIA大鼠的Jak3表达增高均未见产生影响(P0.05)。结论:MK-801及NBQX均可产生镇痛作用,且NBQX比MK-801表现更强,但两者对肿胀均未见效果;NMDA受体与COX-2炎症通路有一定的交叉作用,而对于Jak3尚不能发现其与离子型谷氨酸信号通路存在交叉作用。
【图文】：

动物模型

试剂牛Ⅱ型胶原、完全弗氏佐剂和非N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-asparticacid，NMDA)受体拮抗剂NBQX购自美国Sigma公司，NMDA受体拮抗剂MK-801购自美国Selleck公司，环氧化酶-2(cyclooxygenasez-2，COX-2)、Janus激酶-3(Janus-activatedkinase，Jak3)ELISA试剂盒购自上海丰翔生物科技有限公司。1．2方法1．2．1CIA模型造模方法按文献［6］方法，将牛Ⅱ型胶原与等体积完全弗氏佐剂充分乳化，在无菌条件下自大鼠尾根1．5～2．0cm处皮内注射0．2mL，此为初次免疫，二次免疫以相同方法注射0．1mL，两次免疫间相隔1周(图1)。A，blankcontrolgroup;B，collagen-inducedarthritis．图1动物模型Figure1Animalmodels1．2．2动物分组实验共分为空白对照组、CIA组、CIA+MK-801组、CIA+NBQX组、CIA+MK-801+NBQX组和8．7%二甲基亚砜(dimethylsulfo-xide，DMSO)+CIA组(即溶媒组:选取DMSO终浓度较高值作为该组的DMSO浓度)共6组，每组6只。COX-2为诱导型表达，在空白组不表达，故检测COX-2浓度时不设空白组。1．2．3各指标评估时间(1)触痛评估时间:记录·978·北京大学学报(医学版)JOUＲNALOFPEKINGUNIVEＲSITY(HEALTHSCIENCES)Vol．48No．6Dec．2016

动物模型

【相似文献】