IL-35对成骨细胞分泌血管新生因子的影响

发布时间：2020-07-18 16:52

【摘要】：目的:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是临床表现以滑膜炎、对称性关节炎和骨质破坏为主的慢性自身免疫性疾病。RA炎症所致的骨质丢失和破坏不能及时得到修复与重建,成骨细胞参与的骨形成与破骨细胞参与的骨吸收之间的动态平衡遭到破坏,导致骨量流失、骨密度和骨结构的异常引发骨质疏松(osteoporosis,OP),常伴有关节功能障碍及活动受限。本实验通过研究IL-35对成骨细胞增殖、凋亡及其对成骨细胞分泌血管新生因子的影响,以及上述作用和Wnt/β-catenin信号通路之间的关系,来探讨IL-35对骨形成的影响,为RA合并OP提供新的治疗方向。方法:利用细胞培养技术培养成骨细胞细胞系MC3T3-E1,用不同浓度的IL-35(0-100ng/ml)刺激成骨细胞,CCK8法检测细胞增殖情况,FCM分析细胞凋亡率,RT-PCR检测FGF-2,VEGF及其受体Flt-1和Flk-1 m RNA的表达。加入Wnt/β-catenin抑制剂DKK-1(0.1ug/ml),加入不同浓度的IL-35共孵育,RT-PCR检测VEGF m RNA的表达。结果:加入不同浓度的IL-35刺激后,随IL-35浓度升高,光吸收值增大,与对照组相比,细胞增殖能力增强,差异有统计学意义(P0.05)。经IL-35刺激后,25ng/ml组(4.25±0.35%)。50ng/ml组(3.0±0.14%)和100ng/ml组(1.3±0.28%)成骨细胞的凋亡率明显低于对照组的凋亡率(6.35±0.64%),差异有统计学意义(P0.05),且升高趋势和IL-35浓度梯度成正比。随着IL-35浓度的升高,与对照组相比,成骨细胞内FGF-2,VEGF,Flt-1 m RNA表达量均明显增加(P0.05),未检测到Flk-1m RNA的表达。经DKK-1阻断后,与对照组相比成骨细胞内VEGF m RNA明显减少且与IL-35浓度的升高呈负相关,差异有统计学意义(P0.05)。结论:IL-35可以促进成骨细胞增殖,抑制其凋亡。IL-35可能通过Wnt/β-catenin通路发挥促进成骨细胞分泌血管新生因子FGF-2,VEGF及其受体Flt-1。
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R593.22
【图文】：

中国医科大学硕士学位论文3 结果浓度的 IL-35 对成骨细胞增殖能力的影响浓度 IL-35(0ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml)与成骨细胞，随 IL-35 浓度升高（25-100ng/ml），光吸收值增大，细胞（0ng/ml）明显增强，差异有统计学意义（*P<0.05）。说明 IL细胞增殖，且与 IL-35 浓度呈正相关。

【参考文献】

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本文编号：2761163