地黄提取物抑制斑马鱼的摄食性肥胖的研究

发布时间：2020-07-19 19:03

【摘要】：肥胖是由脂肪堆积而造成的一种慢性疾病。肥胖有可能导致体内脂肪代谢的紊乱,严重影响人们的生活质量和健康水平。预防和治疗肥胖的药物和保健品的研制已经得到高度重视。但目前治疗肥胖症的有效并且安全的药物并不多。地黄是一种传统的中药,在我国大部分地区都有种植,有清热凉血、强身健体等功效。有研究表明,地黄提取物对体外培养的脂肪细胞的分化和生成有抑制作用,但相关的体内实验研究还比较有限。本论文选用高脂摄食诱导的肥胖斑马鱼作为模型,研究了地黄提取物对抑制斑马鱼肥胖的作用。首先,本文探讨了地黄水提取物和地黄乙醇提取物对斑马鱼体重、体长和体高等形态指标影响。实验把雌性斑马鱼和雄性斑马鱼分别设置为低脂喂食组(non-DIO)、高脂喂食组(DIO)、高脂喂食+地黄水提物组(DIO+water)和高脂喂食+地黄乙醇提物组(DIO+alcohol)。统计发现,无论是在雄性斑马鱼还是在雌性斑马鱼中,高脂喂食组(DIO)的体重、体长、体高都显著的高于低脂喂食组(non-DIO),这说明高脂摄食成功诱导了肥胖斑马鱼模型；还发现,在雄性斑马鱼中,无论高脂喂食+地黄水提物组(DIO+water)还是高脂喂食+地黄乙醇提物组(DIO+alcohol)在体重、体长、体高上都显著低于高脂喂食组(DIO),说明无论是地黄水提物还是地黄乙醇提物都能显著抑制雄性斑马鱼的肥胖。其次,本文探讨了地黄水提取物和地黄乙醇提取物对斑马鱼生化指标的影响。实验发现,高脂喂食组(DIO)血清中甘油三脂(TG)和胆固醇(TC)的浓度显著高于低脂喂食组(non-DIO);高脂喂食+地黄水提物组(DIO+water)和高脂喂食+地黄乙醇提物组(DIO+alcohol)血清中甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)的浓度显著低于高脂喂食组(DIO),说明地黄水提物和地黄乙醇提物都能降低摄食诱导的肥胖斑马鱼血清中甘油三酯和胆固醇的浓度。由于肥胖可能会影响机体的免疫系统,我们又检测了地黄提取物对抗氧化酶系统的影响。实验发现,高脂喂食组(DIO)与低脂喂食组(non-DIO)相比,SOD、GPX、 CAT酶活性都显著下降；无论是高脂喂食+地黄水提物组(DIO+water)还是高脂喂食+地黄乙醇提物组(DIO+alcohol),与高脂喂食组(DIO)相比,SOD、GPX、CAT酶活力都显著升高,说明地黄水提物和地黄乙醇提物能显著改善肥胖斑马鱼体内SOD、GPX、CAT酶的活性,增强肥胖斑马鱼的非特异性免疫功能。再次,本文探讨了地黄水提取物和地黄乙醇提取物对斑马鱼肥胖相关基因表达的影响。实验发现,CD36、GalRla、SCD1基因在高脂喂食组(DIO)中的表达显著高于低脂喂食组(non-DIO),而leptin、Gpr84、LPL基因在高脂喂食组(DIO)的表达显著低于低脂喂食组。地黄提取物则能够显著下调(D36、GalR1a、 SCD1基因的表达,上调leptin、Gpr84、LPL基因的表达,表明地黄提取物能有效调控斑马鱼肥胖相关基因的表达。由于脂肪组织与免疫反应有着密切的联系,本实验又检测了地黄提取物对斑马鱼肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。发现TNF-α基因在高脂喂食组(DIO)中的表达显著低于其在低脂喂食组(non-DIO)中的表达；同时,无论是在高脂喂食+地黄水提物组(DIO+water)还是在高脂喂食+地黄乙醇提物组(DIO+alcohol)中,TNF-a基因都比其在高脂喂食组(DIO)中高表达,说明地黄提取物在调控斑马鱼的免疫力上可能也起重要的作用。最后,本文探讨了地黄提取物对斑马鱼幼鱼脂滴形成的影响。本实验选用斑马鱼胚胎,待其发育到开口吃食时,分成低脂喂食组(non-DIO)、高脂喂食组(DIO)、高脂喂食+地黄水提物组(DIO+water)和高脂喂食+地黄乙醇提物组(DIO+alcohol),喂养到22天时,用脂类染料尼罗红对斑马鱼幼鱼染色,在荧光显微镜下观察脂滴的形成情况。结果显示,地黄提取物能抑制斑马鱼幼鱼脂滴的生成。总之,我们以肥胖斑马鱼为模型,从形态指标、生化指标、分子指标等多方面证实地黄提取物可有效抑制斑马鱼的肥胖,这就使得地黄提取物在研究肥胖方面具有潜在的开发前景。
【学位授予单位】：中国海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R589.2

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