虫草菌粉对急性百草枯中毒大鼠肺损伤的治疗作用及相关机制研究

发布时间：2020-09-08 20:05

　　 目的:研究分析虫草菌粉对急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺损伤的治疗作用及相关机制。方法:选用健康成年SD大鼠210只(雌雄各半),随机分为A、B、C、D组:A组(健康对照组)35只:给予一次2.5ml生理盐水腹腔注射,每日给予5ml生理盐水灌胃;B组(单纯染毒组)35只:给予一次PQ 20mg/kg腹腔注射,PQ浓度2mg/ml,每日给予5ml生理盐水灌胃;C组(虫草菌粉治疗C1、C2、C3组,低、中、高剂量各35只)105只:给予一次PQ 20mg/kg腹腔注射,PQ浓度2mg/ml。低、中、高剂量每日给予虫草菌粉0.3g/kg、1.5g/kg、5g/kg,5ml生理盐水稀释后灌胃;D组(维生素E治疗组)35只:给予一次PQ 20mg/kg腹腔注射,PQ浓度2mg/ml。每日给予维生素E 10mg/kg,5ml生理盐水稀释后灌胃。各组大鼠均于造模后1d、3d、7d、14d、21d、28d、35d进行观察,观察其一般状况,毛色、呼吸、精神状态、进食等。染毒组、治疗组(低、中、高剂量)、维生素E治疗组分别于以上时间节点各取5只大鼠,心脏取血处死,留取血液标本,测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),于第7天、第21天取支气管肺泡灌洗液、血液标本送检T淋巴细胞亚群。空白对照组也在相同时间点取5只大鼠测定以上指标,同时,以上各组取大鼠左主支气管及整个左肺,用滤纸吸干血渍,予以支气管肺泡灌洗(BALF),右肺前叶组织制备病理切片,进行苏木精-伊红染色(HE),在光镜下进行病理观察。BALF和外周血中T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)的表达采取荧光直接标记法、流式细胞仪检测。应用免疫组化方法检测PQ中毒肺组织中α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)的表达。α1-AT免疫组化染色阳性切片于40HP物镜下选取10个视野观测染色阳性细胞胞浆平均吸光度(OD),其单位面积的相对含量可反应染色强度。结果:1.大鼠一般情况:A组大鼠各时间点精神状态、活动度均表现良好,呼吸平稳,活泼好动,皮毛光泽发亮,进食多,难以捕捉;C(中、高剂量)组、D组早期出现精神稍差,活动后稍气促,重者活动后口唇、肢端、尾端轻度紫绀,经治疗后一周症状缓解,进食增加,好动,精神状态正常;C(低剂量)组早期症状较中、高剂量组重,毛发松散,静息时即出现口唇、肢端、尾端轻度紫绀,进食减少,精神差,治疗后症状缓解时间较中、高剂量组长。B组染毒后精神状态差,毛发松散,步态蹒跚,进食减少,匍匐不动,易捕捉,气促明显,口唇、肢端、尾端明显紫绀。2.肺组织损伤情况:C(中、高剂量)组与B组比较病理学变化明显,肺组织损伤程度明显改善,低剂量组较B组有一定改善。D组与A组比较,病理学变化明显,肺组织损伤程度明显改善。3.血清中MDA、SOD、GSH-Px水平:C(低、中、高剂量)组与B组比较,水平均优于B组(P0.01,P0.05);D组与A组比较,水平均显著优于A组(P0.05)。4.外周血中T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+):第1、3周时,C1、C2、C3组静脉血中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+较B组上升(P0.01,P0.05),虫草菌粉治疗剂量越大,治疗时间越长,CD4+/CD8+比值趋于正常。D组静脉血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均较B组上升(P0.01,P0.05)。5.BALF中T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+):第1、3周时,C1、C2、C3组BALF中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平较B组上升(P0.01,P0.05),虫草菌粉治疗剂量越大,治疗时间越长,CD4+/CD8+比值趋于正常。D组BALF中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较B组上升(P0.01,P0.05)。6.肺组织中α1-AT:C组与B组比较,C(低、中、高剂量)组肺组织中α1-AT表达明显高于B组有统计学意义(P0.05),B组与D组比较无统计学意义(P0.05)。结论:虫草菌粉对PQ中毒引起的急性肺损伤有较好的治疗作用,可清除氧自由基,提高机体抗氧化损伤、抑制脂质过氧化,并可促进α1-AT表达,平衡抗胰蛋白酶与蛋白酶水平,且提高CD3+、CD4+水平,改善CD4+/CD8+比值,调节免疫,从而减轻PQ中毒引起的肺组织损伤。
【学位单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R595.4
【部分图文】：

疗剂量越大，下降越明显 35天前C1组与C3组比较，有明显差异，C3组MDA下降明显（P＜0.05 ,P＜0.01） 21天前C2组与C3组比较，有明显差异，C3组MDA下降明显 [表1，图1]

差异（P＜0.05 ,P＜0.01），其余时间点无明显差异，有显著差异（P>0.05） 虫草菌粉治疗组C（低ǎ中ǎ高）组随治疗时间延长，上升约明显，剂量越大，上升越明显 D组与C3组比较无统计学意义（P＞0.05） [表2，图2]表 2 血清 SOD 含量( x s)（U/ml）A 组（n=35） B 组（n=35） C1 组（n=35） C2 组（n=35） C3 组（n=35） D 组（n=35）1d 360.2 15.8 293.4 16.4**299.6 15.3**%

本文编号：2814585