干酪乳杆菌调控对虾原肌球蛋白口服致敏反应的效果及机理研究

发布时间：2020-09-08 21:36

　　 近些年,食物过敏现象频发,过敏人群数量日益增多。在亚洲地区,水产品过敏人群比例居高不下,严重影响人民的日常生活,甚至危害生命。益生菌可通过调节肠道菌群缓解食物过敏,是一种潜在的、有效的食物过敏治疗手段,但其详细的、深入的作用机理还未被完全阐述。从酸马奶中分离出的干酪乳杆菌Zhang(Lactobacillus casei Zhang,LcZhang)不仅在乳品发酵中被广泛使用,而且具有调节小鼠肠道免疫、改善肠道菌群等多项功能,但目前对于其缓解食物过敏的效果及机理鲜有报道。此外,抗生素作为过敏人群增多的一个重要因素,而其详细的作用机制尚不明确。鉴于此,本实验通过原核重组表达获得无毒的黏膜佐剂——霍乱毒素B亚基(cholera toxin B subunit,CTB),以及佐剂与过敏原原肌球蛋白(Tropomyosin,TM)融合蛋白——CTB-TM。随后,通过构建TM、CTB-TM以及抗生素处理(TM+Abx)三种不同口服致敏模型以及LcZhang干预模型,探究不同口服致敏模型的致敏效果以及LcZhang对不同致敏模型小鼠过敏反应的影响。以小鼠体重变化、临床过敏症状、血清中特异性抗体IgE、IgG2a、IgG1、组胺含量、肠粘膜损伤(病理切片及TslP、Il33基因相对表达量)评价食物过敏口服致敏模型是否构建成功,并探究抗生素对食物过敏反应的作用,以及低剂量CTB-TM重组蛋白是否可产生致敏效果,并替代天然蛋白用于食物过敏研究。同时,从T细胞免疫平衡、肠道菌群稳态以及口服耐受性探究LcZhang对TM单独致敏、TM+Abx混合致敏两种致敏模型潜在作用机制及差异。主要得出以下结论:(1)原核表达融合蛋白MBP-CTB-EGFP具有跨膜功能,与过敏原TM混合后能致敏小鼠,可作为黏膜佐剂用于食物过敏动物模型构建;(2)TM、TM+Abx、CTB-TM 致敏小鼠血清中 TM 特异性 IgE、IgG2a、IgG1显著上升,小肠黏膜组织发生病变,Tslp基因mRNA表达量上调,其中TM+Abx组变化最为显著,表明口服致敏模型构建成功,且抗生素能加剧食物过敏反应;(3)致敏第二周开始灌胃LcZhang可有效缓解TM单独致敏小鼠的食物过敏症状,主要包括血清中IgE水平下降,肠道组织损伤修复,以及Tslp、Il33基因表达量下降等。但对TM+Abx致敏小鼠以及CTB-TM致敏小鼠的缓解作用不佳。表明LcZhang缓解食物过敏具有针对性,不同的致敏方式可能有不同的治疗效果;(4)LcZhang通过调节细胞因子分泌、细胞因子及转录因子相关基因表达以及Th1/Th2/Th17细胞比例等途经缓解食物过敏症状,但抗生素可削弱其治疗功效;(5)LcZhang对TM单独致敏、TM+Abx混合致敏小鼠肠道中耐受相关基因mRNA表达量,脾脏中T细胞、B细胞、DC细胞的成熟分化,以及肠道内容物菌群分布与丰度具有不同的调节作用。表明抗生素对食物过敏的产生及益生菌的预防治疗均有影响。本研究进一步探究了水产品主要过敏原TM 口服致敏的潜在机制,并揭示了 LcZhang缓解TM过敏的效果及初步机理,以及抗生素对食物过敏的产生及益生菌治疗的影响,为食物过敏的机制研究提供理论基础,为食物过敏的预防及治疗提供新的思路,以期最终能减少食物过敏的发生。
【学位单位】：浙江工商大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R593.1;TS254.1
【部分图文】：

浙江工商大学硕士学位论文逦逡逑（Ｍａｊｏｒｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｃｏｍｐｌｅｘ，ＭＨＣ）邋ＩＩ邋类蛋白，从丨ｆｌ］摄取抗原丨２３邋２４邋２６丨；（５）ＣＸ３ＣＲ１邋＋逡逑噬细胞通过延仲“触角”摄取肠腔中抗原，并可将抗原呈递给附近的ＣＤ１０３＋ＤＣｓ＾逡逑］逡逑０逡逑

逦逦逦变性逦９５逦°Ｃ逦１０ｓ逦、逡逑应逦＿逦６0邋0Ｃ逦，0Ｓ逦．逡逑４０逡逑延伸逦７２逦°Ｃ逦１５ｓ逡逑＞９５邋°Ｃ逦５ｓ逡逑线逦６０逦°Ｃ逦６０ｓ逦１逡逑Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ逦９５逦°Ｃ逦０．１１邋°Ｃ邋／ｓ逡逑据分析逡逑到的所有数据使用软件ＧｒａｐｈＰａｄ邋Ｐｒｉｓｍ邋７．００进行独立样本ｔ检，结果未做说明时均以（平均值±标准偏差）形式呈现，以／＾〈Ｏ．示差异不显著（Ｐ＞０．０５），显著性差异以＊表示，＊b6＜０．０５，邋＊＊Ｐ＊＊尸邋＜０．０００１。逡逑与讨论逡逑中ＴＭ的纯化及ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析逡逑ＫＤａ邋Ｍａｒｋｅｒ逦１逦２逦３逦４逦５逦６逡逑

（ｎ＝１０）逡逑食物过敏会导致机体多个部位发生不良反应，如皮肤瘙痒、呼吸困难、腹泻等，因逡逑此，临床过敏症状评分是评价食物过敏是否产生以及严重程度的重要指标。如图３－４所逡逑示，与ＣＴＢ组相比，致敏组产生明显过敏症状，ＴＭ致敏与ＴＭ＋Ａｂｘ致敏小鼠症状更逡逑为严重，ＣＴＢ－ＴＭ致敏小鼠症状较轻。ＬｃＺｈａｎｇ干预后，ＴＭ＋ｐｒｏ组过敏症状减轻，初逡逑步表明ＬｃＺｈａｎｇ能缓解食物过敏反应。但ＴＭ＋Ａｂｘ＋ｐｒｏ组与ＣＴＢ－ＴＭ＋ｐｒｏ组未明显下逡逑降，也表明ＬｃＺｈａｎｇ对这三类致敏小鼠存在不同的调节作用。逡逑４４逡逑

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 沈川;;被称为“新世纪流行病” 食物过敏是因为吃的花样太多?[J];环境与生活;2019年05期

2 李易;;幼儿园幼儿食物过敏情况的调查与研究[J];华夏教师;2018年31期

3 ;“食物过敏与食品致敏原”专题征稿函[J];食品安全质量检测学报;2018年24期

4 ;一半成人食物过敏者的反应开始于成年期[J];中国食品学报;2017年10期

5 马冠生;;食物过敏,不只是痒痒这么简单[J];生命与灾害;2017年12期

6 王雪辉;;142例婴幼儿食物过敏的临床特征及危险因素分析[J];中国妇幼保健;2018年04期

7 郝子悦;;犬食物过敏的诊治[J];中国工作犬业;2018年03期

8 ;孩子的食物过敏能够预防吗?[J];心血管病防治知识(科普版);2018年04期

9 秦扬;;成人食物过敏[J];心血管病防治知识(科普版);2011年10期

10 叶卉初;钱晨;侯安存;;儿童食物过敏的诊断与治疗进展[J];临床和实验医学杂志;2018年20期

相关会议论文 前10条

1 解洪丽;邵明军;刘传合;孙中厚;沙莉;陈育智;李敬光;吴永宁;;全国31城市儿童食物过敏患病情况调查[A];第八次全国中西医结合变态反应学术会议暨首届深圳市中西医结合变态反应学术会议暨第十届深圳呼吸论坛论文汇编[C];2016年

2 卢华君;;温州市区婴幼儿食物过敏的临床特征研究[A];2015年浙江省医学会儿科学分会学术年会暨儿内科疾病诊治新进展国家级继续教育学习班论文汇编[C];2015年

3 朱云霞;;婴幼儿食物过敏诊治建议[A];2015浙江省医学会母婴健康素养课件[C];2015年

4 孙晋波;李在玲;;IL-10基因多态性与婴儿食物过敏相关性研究[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编（上册）[C];2010年

5 黄敏;王小平;丘蓉;巫剑峰;李靖;;韶关农村地区儿童食物过敏流行病学调查分析[A];中华医学会2010年全国变态反应学术会议暨中欧变态反应高峰论坛参会指南/论文汇编[C];2010年

6 陶爱林;;食物过敏及食物过敏原性评价[A];中华医学会2010年全国变态反应学术会议暨中欧变态反应高峰论坛参会指南/论文汇编[C];2010年

7 孙晋波;李在玲;;低出生体重儿婴幼儿期食物过敏危险因素研究[A];中华医学会2011年全国变态反应学术会议论文集[C];2011年

8 陈静;黎海芪;廖艳;赵泓;陈洁;;我国3城市0-1岁儿童食物过敏流行病学调查[A];中华医学会第十七次全国儿科学术大会论文汇编（上册）[C];2012年

9 邵明军;刘传合;沙莉;李志英;李硕;罗燕青;陈育智;;北京城区0～14岁儿童食物过敏患病率调查[A];中华医学会第十三届全国儿科呼吸学术会议论文汇编[C];2012年

10 赵泓;李中跃;饶艳霞;徐小芹;孙晓莺;陈洁;;杭州市区0～3岁儿童食物过敏现状调查[A];2012年江浙沪儿科学术年会暨浙江省医学会儿科学分会学术年会、儿内科疾病诊治新进展国家级学习班论文汇编[C];2012年

相关重要报纸文章 前10条

1 宗华;肠道微生物缺失 婴儿易食物过敏[N];中国科学报;2019年

2 北京大学第三医院儿科副主任医师 周薇;经常腹泻便秘 亦可能是食物过敏[N];健康报;2012年

3 北京协和医院变态反应科主任 尹佳;当心食物过敏致命[N];光明日报;2013年

4 中南大学湘雅医院感染科 黄勋;宝宝食物过敏咋办[N];大众卫生报;2001年

5 王秀春;食物过敏——儿童厌食又一因[N];民族医药报;2005年

6 欧阳乐;关注食物过敏 保护公众健康[N];中国食品安全报;2011年

7 健康时报记者 魏雅宁;怀孕前半年查查食物过敏[N];健康时报;2010年

8 韦龙;哪些因素易致儿童食物过敏[N];中国消费者报;2003年

9 吴宗文;食物过敏有遗传倾向[N];大众卫生报;2009年

10 甘丘平;食物过敏应从小预防[N];中国石油报;2002年

相关博士学位论文 前7条

1 周丽卿;1.活化肥大细胞在食物过敏引起的脑免疫状态和行为学改变中起着至关重要作用 2.探寻以急性缺血性脑卒中缺血再灌注损伤中活化Bax为靶点的神经保护性多肽药物[D];重庆医科大学;2017年

2 邓珊;中国人群蒿花粉相关食物过敏精准诊断的研究[D];北京协和医学院;2016年

3 胡燕;儿童食物过敏的流行病学及发病机制研究[D];重庆医科大学;2002年

4 黄琼;五指山小型猪在体消化模型和食物致敏模型的建立及其机制研究[D];中国疾病预防控制中心;2010年

5 袁海鹏;功能性消化不良十二指肠免疫激活及神经递质变化的研究[D];山东大学;2012年

6 赵祥杰;家蚕蛹糖苷水解酶18家族几丁质酶的致敏形成机制[D];华南理工大学;2016年

7 刘志强;半抗原诱导食物过敏发生机制及肥大细胞对Th2型过敏反应的调控作用[D];郑州大学;2013年

相关硕士学位论文 前10条

1 谢梦华;干酪乳杆菌调控对虾原肌球蛋白口服致敏反应的效果及机理研究[D];浙江工商大学;2018年

2 张国强;皮肤斑贴试验在儿童食物过敏中的诊断价值[D];重庆医科大学;2018年

3 罗燕;婴儿双歧杆菌超氧化物歧化酶抑制卵白蛋白诱导过敏反应的探索[D];南昌大学;2016年

4 徐莎莎;耳突麒麟菜寡糖的抗食物过敏研究[D];集美大学;2017年

5 陈旭琳;脂肪间充质干细胞、非甲基化CpG-ODN对食物过敏幼鼠模型外周血中CD4~+CD25~+Treg的影响[D];安徽医科大学;2017年

6 邱芬;三种过敏原检测方法在婴幼儿AD食物过敏的应用价值[D];南华大学;2016年

7 孙露;非IgE介导消化道食物过敏的临床特点[D];重庆医科大学;2014年

8 闫俊梅;食物过敏的诊断方法探讨及治疗效果评价[D];重庆医科大学;2011年

9 高越;乌鲁木齐市一级幼儿园3～7岁儿童过敏性鼻炎患病现况研究[D];新疆医科大学;2011年

10 王有朝;坛紫菜R-藻蓝蛋白的抗食物过敏性质研究[D];集美大学;2013年

本文编号：2814671