卡泊三醇联合iBRD9调节Nur77敲除小鼠肠道菌群改善肠黏膜屏障和炎症因子分泌

发布时间：2020-10-27 04:44

　　 目的:探究Nur77敲除小鼠肠道菌群的变化与肥胖的关系,以及卡泊三醇联合BRD9抑制剂(iBDR9)干预后是否发生转变。方法:将7周龄野生型C57BL/6J小鼠和Nur77敲除小鼠,分别随机分为两组(对照组和干预组),每组7只鼠。适应性养1周,野生小鼠对照组予以载体腹腔注射处理,野生小鼠干预组予以卡泊三醇联合iBRD9腹腔注射给药,Nur77敲除小鼠两组处理方法与之相同,4组分别为野生小鼠对照组(WT-V),野生小鼠干预组(WT-T),Nur77敲除小鼠对照组(KO-V),Nur77敲除小鼠干预组(KO-T)。每周注射3次,共给药12周。测小鼠体重、饮食、体成分、血清学水平以及粪便16SrRNA测序。结果:1、KO-V与WT-V相比体重显著增多,KO-T与KO-V相比体重显著减轻,四组小鼠饲料消耗量无显著差异。2、KO-V体脂率显著高于WT-V,Nur77敲除鼠干预后体脂率显著降低,四组小鼠瘦体重率均无统计学差异。3、组间群落结构差异显著性检验,显示KO-V与WT-V组间群落结构有显著性差异,KO-V与KOT组组间群落结构有显著性差异。4、组间差异物种分析,通过对WT-V-WT-T-KOV-KO-T的LEfSe分析,我们发现KO-V-KO-T的biomarker共有2个,包括Alistipes、Rikenellaceae;WT-V-KO-V的biomarker共有5个,包括Lachnospiraceae、Parvibacter、Alistipes、Rikenellaceae、Prevotellaceae。5、肠道菌群物种相对丰度,拟杆菌(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)占细菌群体的主要部分(93.24%-97.43%)。KO-V较WT-V中拟杆菌含量高,KO-T拟杆菌降低,且有统计学差异。疣微菌门(Verrucomicrobia)KO-V较WT-V少,KO-T有比较明显的增多,Akkermansiaceae科丰度与之相同,提示卡泊三醇联合iBRD9干预后Nur77敲除小鼠肠黏膜屏障有所改善。6、Nur77敲除小鼠的肠黏膜连接蛋白mRNA相对表达量咬合蛋白(Ocln)和紧密连接蛋白3(Cldn3)降低,KO-T显著增多,黏膜闭合小环蛋白-1(ZO-1)中KO-T较KO-V明显增多;抗菌肽溶菌酶C(Lyz1)、胰岛再生源蛋白IIIγ(Reg3γ)、磷脂酶A2Ⅱ族(Pla2g2)、血管生成素4(Ang4)mRNA相对表达量中,Reg3γ的mRNA相对表达量KO-V有明显降低,KO-T明显增多;KO-V较WT-V炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)的mRNA相对表达量均增多,KO-T组TNF-α和IL-6明显减少。7、KO-V较WT-V血清LPS明显增多,KO-T显著下降,和肠道菌群拟杆菌趋势相同。血清TNF-α、IL-1β在KOV较WT-V野生小鼠明显增多,KO-T中IL-6有明显改善。结论:Nur77敲除鼠发生的肥胖,可能与全身低度炎症有关,而血中及全身的低度炎症可能来源于Nur77缺乏所致的肠道菌群紊乱、肠粘膜屏障功能受损,使肠道产生的LPS更易通过肠道粘膜屏障而吸收入血导致肥胖。卡泊三醇联合iBRD9通过调节Nur77敲除鼠的肠道菌群、改善肠粘膜屏障功能,减少LPS的产生以及吸收入血,降低全身低度炎症进而减轻肥胖。
【学位单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R589.2
【部分图文】：

2.3.8 数据统计与分析用GraphPadPrism 软件进行单因素方差分析，组间多重比较采用法 Tukey's 法。检验显著性水平为双侧 P<0.05。用 Spearman 相关性分析，进行相关性分析。3 实验结果3.1 小鼠体重变化及基础血清测量3.1.1 小鼠体重、进食量和体成分的测量从 17 周龄开始，Nur77 敲除小鼠体重显著增加，给药干预后显著降低，与野生鼠体重接近（图 1A）。而小鼠饲料消耗量无显著差异（图 1B）。体重的差异主要体现在体脂上，如图 1C 所示，Nur77 敲除小鼠体脂肪率显著增加，给药干预后显著降低，与野生鼠接近。小鼠瘦体重率无显著差异（图 1D）。

3.2.1 各组小鼠肠道微生物群落丰富度和多样性分析使用 ACE 指数、Chao1 指数（图 2A,B）估计微生物丰富度(Communityrichness)，使用Shannon指数和Simpson指数（图2C,D）估计微生物多样性(Communitydiversity)，通过 Wilcoxon 秩和检验，测得微生物丰富度和多样性在各组间不具有明显差异。

图 3 小鼠的肠道微生物群结构图（A）为维恩图显示了群体间肠道微生物群中的独特和共享的 OUT。图（B）为使用基于加权 UniFrac 距离的 PCoA 生成。3.2.2 各组小鼠组间差异物种分析利用 LDAEffectSize（LEfSe）分析对组间的物种丰度数据通过秩和检验的方法检测不同分组间的差异物种，并通过 LDA（线性判别分析）评估差异物种的影响大小（图 4）。在科水平上，我们发现 KO-V-KO-T 的生物标志菌为 Rikenellaceae；WT-V-KO-V 的 为 Lachnospiraceae 、 Rikenellaceae 和 Prevotellaceae 。 Alistipes 为Rikenellaceae 的属水平。
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 陶玥;后文俊;李志瑜;包军;;卡泊三醇倍他米松凝胶治疗头皮银屑病疗效观察[J];海南医学;2016年24期

2 方晓波;朱文元;骆丹;;外用卡泊三醇致接触性皮炎1例[J];中国麻风皮肤病杂志;2013年09期

3 宁旭;;糠酸莫米松与卡泊三醇乳膏联合治疗慢性湿疹的近期疗效分析[J];中外医疗;2017年17期

4 续利霞;;卡泊三醇乳膏联合高能紫外线治疗白癜风疗效观察[J];皮肤病与性病;2018年04期

5 廖薇;李云鹏;邢飞;;卡泊三醇搽剂联合氟芬那酸丁酯软膏治疗头部慢性湿疹与神经性皮炎的疗效观察[J];中国药房;2014年26期

6 王芳;周爱民;;卡泊三醇治疗掌跖脓疱病的临床疗效观察[J];天津医药;2013年04期

7 姜颖娟;李元文;杨碧莲;张妙良;;卡泊三醇搽剂联合中药外洗治疗头部银屑病35例[J];环球中医药;2015年02期

8 李伟虹;;头部银屑病经卡泊三醇搽剂结合中药外洗治疗的疗效分析[J];中国医学创新;2017年16期

9 陈爱明;;卡泊三醇联合卤米松治疗银屑病临床分析[J];当代医学;2011年22期

10 陈小红,彭世瑜;卡泊三醇治疗白癜风的初步研究[J];国外医学.皮肤性病学分册;2000年03期

相关硕士学位论文 前4条

1 吕青青;卡泊三醇联合iBRD9调节Nur77敲除小鼠肠道菌群改善肠黏膜屏障和炎症因子分泌[D];中国医科大学;2019年

2 邢臣径;卡泊三醇治疗白癜风的临床疗效观察及实验研究[D];安徽医科大学;2013年

3 刘敏敏;卡泊三醇固体脂质纳米粒的研究[D];南昌大学;2011年

4 韩丽娟;骨架保留的维生素D类衍生物的重要中间体的合成与工艺改进[D];南京理工大学;2013年

本文编号：2858058