强骨饮调节破骨细胞外泌体影响成骨细胞分化的初步研究

发布时间：2021-10-12 22:36

　　目的初步探究强骨饮调节破骨细胞来源外泌体影响成骨细胞分化的内在机制。方法制备强骨饮含药血清,构建破骨分化和成骨分化模型。设置对照血清组和含药血清组,共同干预破骨细胞分化,找到最佳含药血清浓度。采用免疫印迹法检测两组细胞外泌体释放情况。将两组外泌体加入成骨分化模型中,采用化学发光法检测碱性磷酸酶（ALP）含量,采用实时荧光定量测量成骨特异性转录因子（Runx2）、骨桥蛋白（OPN）、骨钙素（OCN）表达情况。最后运用免疫印迹法检测强骨饮干预下破骨分化的β环状蛋白表达以及外泌体作用成骨分化的β环状蛋白表达。结果细胞染色显示含药血清可明显抑制TRAP活性。在两组破骨分化模型外泌体中均表达CD9、CD63、CD81蛋白。在两组外泌体干预下,ALP、Runx2、OPN和OCN的表达较对照组均降低,但含药血清组中成骨因子表达较对照血清组增加。两组成骨分化模型在外泌体干预下β环状蛋白检测较对照组均减少,但含药血清组β环状蛋白较对照血清组增加。含药血清组破骨细胞检测β环状蛋白较对照血清组增加。结论强骨饮可抑制破骨分化,改善破骨来源外泌体对成骨分化的抑制作用。破骨来源外泌体可能传递miRNA作用wnt/... 

【文章来源】：中国骨质疏松杂志. 2020,26(11)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

RAW264.7细胞的TRAP染色A:对照组，无任何处理;B:加入M-CSF和RANKL诱导破骨与不同浓度对照血清;C:加入M-CSF和RANKL诱导破骨与不同浓度含药血清(**P<0.01)。

图1 RAW264.7细胞的TRAP染色A:对照组，无任何处理;B:加入M-CSF和RANKL诱导破骨与不同浓度对照血清;C:加入M-CSF和RANKL诱导破骨与不同浓度含药血清(**P<0.01)。2.3 外泌体对OB模型ALP活性的影响

OB模型均能促进OCN、OPN、RUNX2基因转录，加入外泌体Exo-Con和Exo-Drug均抑制OCN、OPN、RUNX2基因转录，但Exo-Drug对OCN、OPN、RUNX2基因转录抑制作用弱于Exo-Con。表明外泌体抑制OB分化，破骨分化诱导RAW264.7细胞外泌体抑制BM-MSC的成骨分化，加入含药血清降低对OB分化的抑制作用(图4)。2.5 强骨饮含药血清对wnt/β-catenin通路的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]强骨饮对去卵巢大鼠骨折愈合骨小梁Micro-CT改变研究[J]. 姚建亮,王博,吴鹏,刘康,史晓林.  中国骨质疏松杂志. 2016(11)
[2]强骨饮对去卵巢骨质疏松大鼠骨显微结构的影响[J]. 王博,吴鹏,史晓林.  中医正骨. 2016(07)



本文编号：3433435