肝细胞内FFA的沉积在2型糖尿病肝脏胰岛素抵抗中的作用

发布时间：2025-01-04 08:05

　　目的从临床、分子、细胞水平上探讨肝细胞内FFA的沉积对肝脏胰岛素抵抗的作用,为2型糖尿病的诊治提供新的思路。方法1.收集病例:本研究选择2016年12月至2017年11月期间在南通大学附属医院内分泌科住院的2型糖尿病患者,年龄30岁至70岁。按照排除标准去除不合适病例后,根据腰围分为腹型肥胖组(病例组)和非腹型肥胖组(对照组)两组。收集资料包括患者基本资料、临床检验检查资料、既往病史及生活习惯资料。分析腹型肥胖与糖尿病的相关性。2.建立细胞模型:在不含胎牛血清的DMEM培养基中,加入0.25mM棕榈酸(PA)刺激HepG2细胞24h。采用免疫共沉淀(IP)检测Prdx1与GRP78之间的相互作用,利用免疫荧光了解细胞内共定位;以Flag-Prdx1质粒、Flag质粒转染HepG2细胞,然后给予PA刺激,通过IP检测Flag-Prdx1与GRP78之间的相互作用。用Flag-Prdx1、Flag、si-Prdx1、si-CON转染细胞,通过Werstern blot和qRT-PCR检测p-AKT、p-GSK3β、GRP78、p-IRE1α、PEPCK、G6Pase表达水平,通过葡萄糖比色/...

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1GRP78直接与Prdx1发生相互作用A:免疫沉淀实验中，将HepG2细胞裂解蛋白分为三份，一份作为Input，一份加入Prdx1抗体，另一份加入IgG抗体，在westenblot（WB）实验中，给予抗Prdx1和GRP78抗体检测相关蛋白表达

18图1GRP78直接与Prdx1发生相互作用A:免疫沉淀实验中，将HepG2细胞裂解蛋白分为三份，一份作为Input，一份加Prdx1抗体，另一份加入IgG抗体，在westenblot（WB）实验中，给予抗Prdx1GRP78抗体检测相关蛋白表....

图2抑制Prdx1阻断ERS和肝脏IRA:westernblot实验展示了三种不同干扰位点的siRNAs在HepG2细胞中对Prdx1的干扰效率

20图2抑制Prdx1阻断ERS和肝脏IRA:westernblot实验展示了三种不同干扰位点的siRNAs在HepG2细胞中对Prd的干扰效率。B:Prdx1被干扰后该蛋白表达水平的量化图。C-D:HepG2细胞转Prdx1siRNA#....

图3Prdx1对胰岛素抵抗的HepG2细胞脂质代谢、葡萄糖摄取和葡萄糖生成的影响

22图3Prdx1对胰岛素抵抗的HepG2细胞脂质代谢、葡萄糖摄取和葡萄糖生成的影A:油红O染色法测定肝细胞脂质积累:CON组、PA组、PA+Flag组、PA+Flag-Prdx1PA+si-CON组、PA+si-Prdx1组。B：用葡萄糖荧光测定试剂盒显....

本文编号：4023154