高糖对THP-1细胞TLR4介导的信号调节的影响
本文关键词:高糖对THP-1细胞TLR4介导的信号调节的影响
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【摘要】:目的探讨高糖状态下巨噬细胞株THP-1经TLR4不同配体刺激后信号通路激活的改变,明确巨噬细胞激活在糖尿病肾病中的炎症机制。方法用正常和高糖培养THP-1细胞,用TLR4的配体LPS和HSP60刺激,收集上清和细胞,采用ELISA和Real-time PCR检测IL-10、IL-1β、TNF-α的蛋白及m RNA的表达水平,用Western blot检测NF-κB(P65)、AKT(Ser473)介导的信号通路分子的表达水平。结果高糖刺激下IL-10 m RNA表达的高峰值晚于正常组,出现延迟现象,但蛋白表达无明显变化。而IL-1β和TNF-α无论m RNA和蛋白水平的表达均高于正常对照组。Western blot结果显示LPS刺激细胞0、15、30、60、120、180 min,正常组P-NF-κB p65的表达于60 min达到高峰,而高糖组15 min时达到高峰,P-AKT的表达于60 min时表达增高,高糖组在同一时间点总体高于正常组;高糖状态下LPS和HSP60刺激细胞0、30、60、180 min后,P-NF-κB p65、P-AKT(Ser473)均高于对照组。结论高糖状态能促进TLR4介导的促炎因子的表达,不同配体刺激的结果相似。
【作者单位】: 河北医科大学免疫教研室/河北省中医院检验科;
【关键词】: TLR 糖尿病肾病 巨噬细胞 LPS HSP
【基金】:河北省自然科学基金(H2014206212)
【分类号】:R587.2;R692.9
【正文快照】: 糖尿病肾病(,)是糖尿病(diabetes mellitus,DM)造成的严重和危害性较大 的一种慢性并发症[1]。其发病机制与慢性炎症有关,动物实验和DN临床患者的研究中均发现肾脏组织大量浸润的炎症细胞以巨噬细胞为主[2]。其浸润程度与肾组织的损害程度趋势一致呈正相关[3]。因此,巨噬细胞
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