人参皂苷Rg1对系统性红斑狼疮的免疫调节作用的实验研究

发布时间：2017-08-20 22:40

  本文关键词：人参皂苷Rg1对系统性红斑狼疮的免疫调节作用的实验研究

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【摘要】：目的Rg1对系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞的免疫调节作用。方法收集处于非活动期的系统性红斑狼疮患者和性别和年龄匹配(±2岁)健康受试者各10名。从患者和健康受试者外周血分离CD3+T细胞,用伴刀豆球蛋白(Con A)体外刺激,并向培养基中加入Rg1。培养48小时后,细胞收集用于后续实验。T淋巴细胞增殖实验采用CCK-8法。CD4+T细胞、CD8+T细胞和产生IFN-γ和IL-4的CD4+T细胞比例采用流式细胞仪测定。Th1/Th2相关细胞因子IFN-γ和IL-4基因表达采用实时荧光定量PCR测定。IFN-γ和IL-4细胞培养上清水平采用酶联免疫吸附法测定。结果Rg1明显抑制ConA诱导的健康受试者和系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞增殖,且抑制率健康受试者高于系统性红斑狼疮患者;Rg1降低系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞产生IFN-γ的CD4+T细胞比例抑制IFN-γ产生和m RNA表达;Rg1增加系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞产生IL-4的CD4+T细胞比例,增强IL-4产生和m RNA表达,而对健康受试者T淋巴细胞影响不大。结论Rg1可能通过调节T细胞活化和Th1/Th2平衡来改善系统性红斑狼疮患者的免疫功能。
【关键词】：人参皂苷Rg1 系统性红斑狼疮 T淋巴细胞 干扰素-γ 白介素-4
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R593.241
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-7
• 第1章 实验材料和方法7-22
• 1.1. 实验材料7-12
• 1.1.1. 临床资料和标本收集7-8
• 1.1.2. 实验试剂8-9
• 1.1.3. 实验仪器9-10
• 1.1.4. PCR引物10-11
• 1.1.5. 实验耗材11
• 1.1.6. 主要试剂的配置方法11-12
• 1.2. 实验方法12-22
• 1.2.1. 人外周血CD3+T淋巴细胞的分离12-15
• 1.2.2. CCK-8 法检测T淋巴细胞的增殖15-17
• 1.2.3. 荧光定量PCR实验17-20
• 1.2.4. 流式检测CD4+、CD8+细胞比例以及CD4+IFN-γ+和CD4+IL-4+细胞比例20-21
• 1.2.5. ELISA法检测细胞培养上清中IFN-γ及IL-4 蛋白水平21
• 1.2.6. 统计学分析方法21-22
• 第2章 实验结果22-32
• 2.1. 人外周血T淋巴细胞分选成功22
• 2.2. 培养 48h后T淋巴细胞光镜下形态22-23
• 2.3. T淋巴细胞增殖实验结果23-26
• 2.3.1. 不同浓度ConA对T淋巴细胞增殖的刺激作用23-24
• 2.3.2. ConA诱导的T淋巴细胞在不同细胞浓度时的增殖效果24-25
• 2.3.3. 不同浓度Rg1对ConA诱导的T淋巴细胞增殖效果的影响25
• 2.3.4. 人参皂苷Rg1对ConA诱导的人外周血T淋巴细胞的增殖作用的影响25-26
• 2.4. 人参皂苷Rg1对人外周血T淋巴细胞IFN-γ及IL-4mRNA水平的影响26-28
• 2.5. 人参皂苷Rg1对人外周血T淋巴细胞CD4+、CD8+细胞比例的影响28-29
• 2.6. 人参皂苷Rg1对人外周血T淋巴细胞CD4+IFN-γ+和CD4+IL-4+细胞比例的影响29-30
• 2.7. 人参皂苷 Rg1 对人外周血 T 淋巴细胞培养上清 IFN-γ及 IL-4 蛋白水平的影响30-32
• 第3章 讨论32-36
• 结论36-37
• 参考文献37-40
• 知情同意书40-41
• 综述 人参皂苷免疫调节作用的研究进展41-51
• 综述参考文献47-51
• 攻读学位期间的研究成果51-52
• 致谢52-53

【参考文献】

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本文编号：709337