IL-31和他克莫司对Hacat细胞NT4表达的影响

发布时间：2017-10-15 10:01

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【摘要】：目的 探讨IL-31、他克莫司对角质形成细胞神经营养素-4表达的影响 方法 培养人角质形成细胞（Hacat细胞）株，采用不同浓度他克莫司作用24小时，噻唑蓝比色法（MTT法）检测细胞增殖活性。IL-31、他克莫司单独或联合作用于Hacat细胞24小时后，采用实时荧光定量PCR法检测NT4mRNA表达,ELISA法分别检测12、24小时各组细胞上清液中NT4含量。 结果 1.不同浓度他克莫司对细胞增殖活性影响有差异，较低浓度他克莫司（10ng/ml、100ng/ml）对Hacat增殖活性无明显影响（P0.05）；当浓度达到1000ng/ml时细胞活性受到影响，与对照组相比差异有统计学意义（P0.01）。 2. IL-31和他克莫司对Hacat细胞NT4mRNA表达的影响：1）以不同浓度的IL-31（50ng/ml、100ng/ml）刺激Hacat细胞24h。50ng/mlIL-31组和100ng/ml IL-31NT4mRNA表达量均明显高于对照组（1.126±0.188vs1.0,P0.01；1.381±0.637vs1.0,P0.001）。2）他克莫司和IL-31单独或联合作用Hacat细胞NT4mRNA表达的影响：IL-31组细胞NT4mRNA表达量是联合作用组的1.84倍（1.351±0.101vs0.736±0.094,P0.01）；对照组NT4mRNA表达量是他克莫司组的1.62倍（1.0vs0.616±0.117,P0.05），而他克莫司组与联合作用组的NT4表达差异不明显（P0.05）。 3. IL-31和他克莫司对Hacat细胞NT4分泌的影响：1）无任何干预条件下，，Hacat细胞可以分泌一定量的NT4。2）作用12h时,各组细胞上清NT4含量无差异（P0.05）。3）作用24小时后，IL-31组细胞上清NT4含量与对照组相比明显升高（1324.48±28.42vs1237.66±67.06,P0.05），联合作用组明显低于IL-31组（1163.839±64.19vs1324.48±28.42,P0.001），他克莫司组显著低于正常组（1043.25±46.54vs1237.66±67.06,P0.01）,差异均有统计学意义。 结论 1. IL-31刺激Hacat细胞后，NT4mRNA表达量及细胞上清NT4含量均增高，提示IL-31可促进角质形成细胞NT4表达增加，并可能通过NT4通路参与AD瘙痒。 2.高浓度他克莫司对细胞活性有抑制作用。他克莫司能降低无任何作用下Hacat细胞NT4mRNA表达和细胞上清中NT4含量，同时还能拮抗IL-31促进NT4表达的作用，说明他克莫可能通过降低角质形成细胞NT4表达或分泌而发挥抗瘙痒作用。
【关键词】：白介素-31 他克莫司 神经营养素-4 特应性皮炎
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R758.2
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-13
• 1. 材料与方法13-22
• 2. 结果22-27
• 3. 讨论27-30
• 全文总结30-31
• 参考文献31-34
• 文献综述34-42
• 参考文献38-42
• 致谢42-43
• 攻读硕士期间发表论文43-44

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本文编号：1036475