DKK1对恶性黑素瘤细胞A375增殖影响的初步研究

发布时间：2018-04-24 05:35

  本文选题：DKK1 + 恶性黑素瘤　； 参考：《重庆医科大学》2010年硕士论文

【摘要】： 目的利用DKK1腺病毒质粒,转染人恶性黑素瘤细胞株A375,观察转染后DKK1和β-catenin表达量的变化,研究DKK1高表达对恶性黑素瘤增殖的影响。 方法构建DKK1腺病毒(Adenovirus)质粒;实验分为三组:Ⅰ组:Ad-DKK1-GFP转染组(实验组)、Ⅱ组:Ad-GFP转染组(空载腺病毒对照组)、Ⅲ组:空白细胞对照组;转染人恶性黑素瘤细胞株A375,确定DKK1在人恶性黑素瘤细胞株中高表达;RT-PCR检测转染后细胞中β-catenin表达水平的改变;细胞计数检测DKK1对细胞增殖的影响;MTT检测DKK1对细胞活力的影响;建立裸鼠移植瘤模型;对瘤体重量做统计学分析;免疫组化分析瘤体内DKK1和β-catenin表达的变化。 结果1.重组腺病毒能有效转染A375细胞,转染效率较高,当MOI为80时,细胞转染效率为80%左右。2.RT-PCR检测结果:转染后的细胞内稳定高表达DKK1,而β-catenin的表达降低。3.细胞计数法检测结果:24H/48H细胞计数结果均显示:实验组与对照组比较增殖受到抑制。4.MTT法检测结果:实验组与对照组比较细胞活力降低。5.瘤体重量分析结果:实验组与对照组比较瘤体重量较轻。6.免疫组化结果:实验组的DKK1表达和对照组比较有增强,而β-catenin的表达减弱。 结论1.重组腺病毒在体外能有效转染人恶性黑素瘤细胞株A375,转染效率高。2.转染后细胞能有效表达DKK1,并能抑制β-catenin的表达。3. DKK1在体内外对A375的增殖均有一定的抑制作用。
[Abstract]:Objective to observe the expression of DKK1 and 尾 -catenin in human malignant melanoma cell line A375 by using DKK1 adenovirus plasmid, and to study the effect of high expression of DKK1 on the proliferation of malignant melanoma. Methods Adenovirusplasmid of DKK1 adenovirus was constructed, and was divided into three groups: group 鈪，

本文编号：1795395