寻常型银屑病皮损组织中Nestin、NF

发布时间：2016-11-25 21:44

  本文关键词：寻常型银屑病皮损组织中Nestin、NF-κB及STAT3蛋白表达的检测，由笔耕文化传播整理发布。

《郑州大学》 2015年

寻常型银屑病皮损组织中Nestin、NF-κB及STAT3蛋白表达的检测

王芳  

【摘要】：背景银屑病是一种慢性的、易复发的与基因遗传、多种环境刺激诱导的自身免疫性皮肤病,以细胞的炎症和增生为特征而表现为丘疹、红斑、鳞屑的皮肤病。银屑病的发病机制虽尚未十分明确,已知银屑病表皮干细胞(stem cell)是银屑病表皮增殖的根源,Nestin是其干细胞的标志之一[1]。此外,NF-κB核转绿因子可被炎症因子IL-6,细胞增殖及ROS等激活,此激活的炎症因子可激活JAK-STAT信号转导,尤其是STAT3的磷酸化可靶向提高c-myc/cyclin D1的表达而促进细胞增殖[2-5]。因此,应用药物或其它措施抑制干细胞或抑制NF-κB及STAT3的表达上调问题已成为治疗银屑病的靶点。我们在此实验中拟对寻常型银屑病标本和从整形科获得的正常皮肤标本对Nestin、NF-κB及STAT3的免疫反应性或表达进行比较。NF-κB(nuclear factor-κB)是一种真核细胞转录因子,可被炎症和增殖激活,可调控细胞因子、趋化因子和粘附分子等在皮肤组织中表达。信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription,STAT3)。由于Nestin、NF-κB、STAT3在正常表皮中均表达于基底层,基底层是角质形成细胞增殖发生的重要部位,提示它们与细胞增殖、炎症密切相关。本研究采用免疫组化的方法检测Nestin、NF-κB、STAT3在寻常型银屑病变标本和正常皮肤标本中的表达定位,阐述其在银屑病变中的作用机制。目的拟探讨和比较寻常型银屑病与正常皮肤的Nestin、NF-κB和STAT3的表达定位和表达水平。临床资料收集2013年12月至2014年4月我院皮肤科门诊部或者住院部寻常性银屑病变标本和整形外科患者正常皮肤标本各14例。其中14例寻常型银屑病变标本均经组织病理学确诊。取到的所有组织标本送于郑州大学医学院分子细胞生物学研究中心,本研究经我院伦理委员会批准,患者均签了署知情同意书。方法各组织细胞标本于4%多聚甲醛固定、吹干及透化,应用SP试剂盒,检测Nestin,NF-κB和STAT3在寻常型银屑病变标本和正常皮肤标本的表达定位水平,各组织标本固定、脱水、透明。同时用0.3%H2O2处理入水石蜡,以抑制内源性过氧化物酶(HRP)的活性,标本经石蜡包埋处理后,行蜡块切片。应用Nestin抗体、NF-κB抗体和STAT3抗体,对皮损组及正常对照组进行以Nestin抗体、NF-κB抗体、STAT3抗体进行免疫组织化学染色,进行DAB显色并采图,同时以PBS替代一抗作为实验的阴性对照。统计学分析本研究计量资料以(x_±s)表示,两组间比较采用双侧t检验,P0.05差异具有统计学意义,P0.01差异具有显著统计学意义,所有统计学分析均应用SPSS(Statistical Product and Service Solutions)17.0软件进行处理。结果Nestin的免疫反应性定位于表皮基底层中个别干细胞的胞质内,NF-κBp65和STAT3的免疫反应性(Immunoreactivity,IR)表达定位于表皮基底细胞和棘层细胞的胞核及胞质。寻常型银屑病皮损中Nestin-IR、NF-κB-IR和STAT3-IR均明显高于正常皮肤组织,差异有统计学意义。(Nestin(167.51±0.05 vs114.38±0.03)、NF-κBp65(127.48±0.12 vs 101.27±0.04)和STAT3(196.34±0.09vs 124.63±0.06),t分别为3.852、3.372和3.012,P0.05。寻常型银屑病患者皮损中或正常皮肤标本中NF-κBp65-IR与STAT3-IR的表达均呈正关联,r分别为0.9530和0.8240,P0.05。结论寻常型银屑病皮损组织中Nestin、NF-κB和STAT3的免疫反应性较正常皮肤组织表达较高,抑制它们的表达可能是治疗该改疾病的有效途径。

【关键词】：
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R758.63
【目录】：

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