复合壳多糖人工皮肤移植实验家兔后再构建的初步研究

发布时间：2020-04-24 03:32

【摘要】： 理想的皮肤替代物应包括由活性细胞构建所形成的表皮和真皮两部分，移植到实验动物后其表皮与真皮的生长、分化和缓慢再构建可恢复正常皮肤的结构。本实验采用免疫组化方法研究复合壳多糖人工皮肤移植实验家兔后表皮层角蛋白分化标志的变化及血管和基底膜的形成情况，以了解复合壳多糖人工皮肤移植后表皮的分化和真皮的再构建情况，为其临床应用提供实验依据。方法：分别将复合壳多糖人工皮肤移植前、移植后1月、移植后2月、正常人皮肤、正常兔皮肤石蜡块切片，分为实验组和阳性、阴性对照组，抗广谱角蛋白抗体免疫组化染色观察表皮层角蛋白的表达情况；抗角蛋白K5和K10单克隆抗体免疫组化染色鉴别基底层细胞和基底层上细胞以了解表皮分化情况；抗第Ⅷ因子多克隆抗体和抗层粘连蛋白多克隆抗体免疫组化染色分别标记血管内皮细胞和基底膜，了解血管和基底膜的形成情况。结果： 1. 复合壳多糖人工皮肤移植前、移植后1月及2月表皮层广谱角蛋白抗体免疫组化染色阳性，与正常皮肤相似。 2. 复合壳多糖人工皮肤移植前表皮细胞角蛋白K10抗体和角蛋白K5抗体免疫组化染色均为阳性，后者的染色较浅；移植后1月及2月基底层以上细胞角蛋白K10抗体免疫组化染色阳性，且越接近表皮表面染色越深，与正常人皮肤相似，基底层细胞角蛋白K10抗体免疫组化染色阴性。基底层细胞角蛋白K5抗体免疫组化染色弱阳性，弱于正常人皮肤，基底层以上细胞角蛋白K5抗体免疫组化染色阴性。 WP=8 3. 复合壳多糖人工皮肤移植前真皮基质内第Ⅷ因子抗体免疫组化染色阴性；移植后1月及2月真皮内第Ⅷ因子抗体免疫组化染色阳性，可见较多新生血管，以移植后1月明显，且真皮浅层血管数量较正常皮肤多。此外，移植后1月及2月部分区域基底层细胞胞膜第Ⅷ因子抗体免疫组化染色也为阳性。 4. 复合壳多糖人工皮肤移植前层粘连蛋白抗体免疫组化染色阴性，，且基底细胞未见染色；移植后1月及2月部分表、真皮交界处层粘连蛋白抗体免疫组化染色阳性，可见不连续的基底膜，而基底层细胞胞和部分基底层以上细胞的胞膜及胞浆层粘连蛋白抗体免疫组化染色阳性。正常皮肤中可见完整、连续的基底膜，基底细胞未见染色。此外，移植后1月及2月真皮内血管基底膜层粘连蛋白免疫组化染色阳性，可见较多新生血管，与第Ⅷ因子抗体免疫组化染色结果相似。 5. 阴性对照组中抗体免疫组化染色均为阴性。结论：复合壳多糖人工皮肤移植实验家兔后表皮层均有角蛋白表达，有增生性细胞和分化细胞，表皮分化良好。真皮内新生血管明显，达到了血管重建。部分区域表真皮交界处有基底膜形成。虽然基底膜的形成是断续、不完整的，但总体上复合壳多糖人工皮肤移植实验家兔后再构建良好，与正常人皮肤相似，是人皮肤的有用替代物，临床应用前景较大。
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R751.05

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