ALA-PDT对尖锐湿疣角质形成细胞增殖凋亡的影响

发布时间：2017-03-25 15:14

  本文关键词：ALA-PDT对尖锐湿疣角质形成细胞增殖凋亡的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景和目的尖锐湿疣(condyloma acuminatum,CA)是皮肤科临床常见的性传播疾病(sexually transmitted diseases,STD),本病是由人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染引起,临床表现为生殖器等部位皮肤粘膜疣状增生物。本病具有传染性强,增生快,治疗后易复发等特点。目前该病临床治疗的方法有多种,如激光、冷冻、外用药物等,这些方法虽可清除疣体,但不能清除HPV亚临床感染和潜伏感染,因而治疗后易复发。艾拉光动力疗法(5-盐酸氨酮戊酸光动力疗法,5-aminolevulinic acid photodynamic therapy,ALA-PDT)是治疗CA的新方法,其治疗原理是利用与异常组织具有高度亲和力的光敏剂,两者相互结合后在特定光源的照射下产生光毒性,从而破坏病变细胞而周围正常组织不受损伤,这种疗法具有创伤小,复发率低等优点。但ALA-PDT治疗CA的确切效应机制缺乏系统研究,ALA-PDT对CA组织角质形成细胞的增殖、凋亡的影响目前尚无研究报道。本课题通过观察ALA-PDT治疗前后CA组织角质形成细胞增殖、凋亡的变化,探讨ALA-PDT疗法对CA角质形成细胞增殖凋亡的影响。材料与方法1材料52例CA患者均来自郑州大学第一附属医院皮肤性病科门诊,其中男33例,女19例。年龄18-60岁,平均33.15岁;病程15-120天,平均51.89天;临床表现典型,经醋酸白检测显示阳性,原位杂交法证实为HPV感染,组织病理确诊,符合CA临床及实验室诊断标准。患者均未经任何系统及局部治疗,排除其他系统疾病。2方法对符合入选标准的52例CA患者进行ALT-PDT治疗,治疗前取疣体组织作为对照组,治疗后1周取疣体组织作为实验组。分别利用原位末端标记法(TUNEL)及免疫组化SP法,检测CA组织角质形成细胞中增殖相关基因Ki-67及细胞凋亡的阳性表达情况。结果判定:Ki-67阳性表达细胞定位在细胞核,核内为棕黄色颗粒,核边界清晰。根据角质形成细胞中阳性表达细胞的百分数及着色强度进行半定量分级评分。阳性细胞所占总细胞百分比:0分、1分、2分、3分、4分;分别对应≤10%、11%~25%、26%~50%、51%~75%、≥76%。着色强度评分:0分、1分、2分、3分;分别对应不着色、浅黄色、黄色、棕黄色;将其二者评分相乘得出总分。9-12分代表强阳性(+++),6-8分代表阳性(++),1-4分代表弱阳性(+),0分代表阴性。TUNEL阳性表达细胞定位在细胞核,核内着棕褐色颗粒,胞核出现固缩;选取阳性切片中凋亡小体及凋亡细胞数最多的高倍视野(×400)5个,计数100个细胞的阳性细胞数,取其平均值算出凋亡指数(apoptosis index,AI),增殖指数(Proliferation index,PI)算法同AI。3统计学处理利用SPSS17.0统计软件对数据进行统计学分析,ALT-PDT治疗前后两组间Ki-67阳性表达率比较采用χ2检验;表达强度差异采用秩和检验,ALT-PDT治疗前后两组间凋亡指数及增殖指数比较用t检验;P0.05为差异有统计学意义。结果1 ALT-PDT治疗前后CA组织中ki-67的表达ki-67阳性显色主要定位在细胞核,核内着棕黄色颗粒,胞核境界清晰。52例ALT-PDT治疗前CA角质形成细胞中ki-67的阳性表达为44例,阳性表达率为84.61%(44/52),表达强度多在++~+++;治疗后CA角质形成细胞中ki-67的阳性表达为22例,阳性表达率为42.31%(22/52),表达强度多在-~++。治疗前后两组阳性表达率差异具有统计学意义(c2=20.070,P0.001);两组间阳性表达强度差异具有统计学意义(H=28.94,P0.001)。治疗前ki-67的增殖指数为80.26土5.07%,治疗后为42.68土3.06%;治疗前后两组增殖指数差异具有统计学意义(P0.001)。2 ALT-PDT治疗前后CA组织中凋亡细胞的表达TUNEL阳性细胞显色多分布于CA组织表皮的中上层,定位在细胞核,核内着棕褐色颗粒。52例ALT-PDT治疗前CA角质形成细胞中可见凋亡细胞表达强度多在+~++,凋亡指数(Al)平均为(13.94土2.35)%;治疗后CA角质形成细胞中凋亡细胞表达强度多在++~+++;凋亡指数(Al)平均为(73.88土7.65)%,治疗前后两组凋亡指数差异具有统计学意义(P0.001)。结论1.ALA-PDT治疗后CA角质形成细胞中ki-67阳性表达率、表达强度及PI均降低,表明ALA-PDT能够抑制角质形成细胞的增殖,抑制CA的增生。2.ALA-PDT治疗后CA角质形成细胞中AI明显高于治疗前,表明ALA-PDT能够促进角质形成细胞凋亡,促进CA的消退。3.ALA-PDT抑制角质形成细胞的增殖、促进角质形成细胞的凋亡是其治疗CA的机制之一。
【关键词】：尖锐湿疣 ALA-PDT ki-67 细胞凋亡
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R752.53
【目录】：

• 中文摘要4-7
• abstract7-13
• 缩略词表13-14
• 1 前言14-16
• 2 材料与方法16-22
• 2.1 临床资料16
• 2.2 主要试剂、仪器16-18
• 2.3 实验方法18-21
• 2.4 统计学处理21-22
• 3 结果22-25
• 3.1 ALT-PDT治疗前后的CA角质形成细胞中ki-67 的表达22-23
• 3.2 ALT-PDT治疗前后的CA角质形成细胞凋亡的变化23-25
• 4 讨论25-30
• 5 结论30-31
• 参考文献31-33
• 附图33-35
• 综述 光动力疗法在皮肤科应用现状及进展35-54
• 参考文献50-54
• 个人简历、在读期间发表的论文54-55
• 致谢55

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 李涛,徐小琴,史则峡;165例下生殖道尖锐湿疣阴道镜诊断分析[J];华西医学;2002年01期

2 刘仲荣;杨慧兰;;皮肤病光动力疗法系列讲座(五)——光动力疗法治疗微静脉畸形[J];中国美容医学;2009年09期

  本文关键词：ALA-PDT对尖锐湿疣角质形成细胞增殖凋亡的影响，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：267401