寻常型银屑病中T-bet和GATA-3表达的研究

发布时间：2020-09-14 16:31

　　银屑病是一常见的免疫性、炎症性皮肤病,呈慢性经过,反复发生,多数患者终生受累。目前的治疗手段有限,治疗效果不尽人意。因此,该病给患者带来生理和心理上的极大痛苦。虽然银屑病至今病因不明,但目前公认该病是在一定的遗传背景基础上发生T细胞介导的免疫紊乱所致,其中Th1分化优势及Th1型细胞因子在介导银屑病的发生和发展中起着重要的作用。近年来,已经证实了T细胞特异性转录因子T-bet和GATA-3是决定Th1和Th2极性分化的关键因素。T-bet是T-box家族Tbr1亚家族成员,在Th1细胞分化中起着核心作用,它不仅控制Th1细胞特征性细胞因子IFN-γ的表达,而且抑制Th2细胞特征性细胞因子IL-4的产生,还能诱导已定向的Th2细胞向相反的Th1细胞分化,因而被确认为目前所知唯一的Th1特异性转录因子。GATA-3则促进Th2细胞特征性细胞因子(IL-4等)的产生,是Th2特异性转录因子。由于T-bet和GATA-3在Th细胞分化中的重要作用,人们对它们与Th1和Th2漂移性疾病的关系产生了浓厚的兴趣。国内外的学者也为此做了大量的工作,对于T-bet、GATA-3与哮喘、炎症性肠病、异位性皮炎、类风湿关节炎等疾病的关系都有了相应的研究。最近已有国内的学者对银屑病患者外周血PBMCT-bet和GATA-3的表达水平进行了研究,但至今国内外均未见关于银屑病患者组织和外周血T-bet/GATA-3表达情况的研究报道。本研究旨在以特异性转录因子T-bet、GATA-3、Th1/Th2平衡为核心,比较寻常型银屑病患者与正常人外周血中IFN-γ和IL-4的水平以及外周血单一核细胞T-bet和GATA-3的基因表达,同时还比较患者皮损和正常人皮肤组织T-bet和GATA-3的表达,初步阐明T-bet和GATA-3在银屑病发病机制中的意义。对象和方法银屑病患者外周血标本来源为2006年9月至2007年3月住院及门诊就诊的进行期寻常型银屑病病人,抽血前1月内无系统用药史,除外其他免疫相关性疾病如肿瘤,肝炎,糖尿病等。健康对照组均取自正常体检人群,经血常规、大小便常规和肝肾功能等检测均显示正常,无重大疾病史。银屑病患者皮肤组织标本来源为2006年9月至2007年3月住院及门诊就诊的进行期寻常型银屑病病人,收取标本前1月内无系统用药史,所取皮损为两周内新发,未予局部药物治疗。正常对照组均取自外科手术病人正常腹部皮肤组织。采用ELISA法检测银屑病患者与正常人外周血中IFN-γ和IL-4的水平,RT-PCR法比较银屑病患者与正常人外周血T-bet和GATA-3的基因表达,同时用免疫组化的方法比较患者皮损和正常人皮肤T-bet和GATA-3的表达。结果 1.寻常型银屑病患者血清IFN-γ和IL-4浓度 21例寻常型银屑病患者血清IFN-γ浓度为16.20±2.00pg/ml,20例正常对照组血清IFN-γ浓度为14.78±1.96pg/ml,两者差异具有显著性(P＜0.05):21例寻常型银屑病患者血清IL-4浓度为22.12±6.70pg/ml,20例正常对照组血清IL-4浓度为26.30±5.91pg/ml,两者差异也具有显著性(P＜0.05)。 2.寻常型银屑病患者外周血单一核细胞T-bet和GATA—3的表达 21例寻常型银屑病患者外周血单一核细胞T-bet的表达显著高于正常对照组(P＜0.05),GATA—3的表达显著低于正常对照组(P＜0.05)。 3.相关性分析 3.1 T-bet表达水平与IFN-γ浓度的相关性分析寻常型银屑病患者血清IFN-γ浓度与外周血单一核细胞T-bet表达量的相关系数为0.803(P＜0.05),两者呈明显正相关。但值得注意的是,当T-bet的相对表达量较低时,两者之间几乎没有表现出相关性,而当T-bet的相对表达量较大时(＞0.33),两者之间表现的相关性较为明显。 3.2 T-bet表达水平与IL-4浓度的相关性分析寻常型银屑病患者血清IL-4浓度与外周血单一核细胞T-bet表达量的相关系数为-0.072(P＞0.05),两者之间无显著相关性。 3.3 GATA-3表达水平与IFN-γ浓度的相关性分析寻常型银屑病患者血清IFN-γ浓度与外周血单一核细胞GATA-3表达量的相关系数为-0.5244(P＞0.05),两者之间无显著相关性。 3.4 GATA-3表达水平与IL-4浓度的相关性分析寻常型银屑病患者血清IL-4浓度与外周血单一核细胞GATA-3表达量的相关系数为0.452(P＞0.05),两者之间无显著相关性。 4.寻常型银屑病患者皮损与正常人皮肤中CD4和CD8表达水平的比较 (1)CD4在银屑病患者皮损中主要表达于淋巴细胞胞膜上,主要是皮损组织真皮乳头层浸润的淋巴细胞以及几乎所有移入表皮棘层的淋巴细胞呈阳性表达:在正常人皮肤中几乎未见有CD4的表达。两者比较有显著性差异(P＜0.01)。 (2)CD8在银屑病患者皮损中仅散在表达于真皮乳头层浸润的淋巴细胞胞膜上,在移入表皮棘层的淋巴细胞胞膜上未见表达;在正常人皮肤中几乎未见有CD8的表达。两者比较无显著性差异(P＞0.05)。 5.寻常型银屑病患者皮损与正常人皮肤中T-bet和GATA-3表达水平的比较 (1)T-bet在银屑病患者皮损中主要表达于淋巴细胞胞核内,大多数阳性的淋巴细胞位于真皮乳头层,在移入表皮棘层的淋巴细胞胞核内也有部分表达,在真皮乳头部扩张的血管周围浸润的大部分淋巴细胞中表达为阳性,而且染色相对较深;T-bet在正常人皮肤中几乎未见表达。两者比较有显著性差异(P＜0.01)。另外通过对同一患者两张切片的粗略比较发现CD4表达较强的皮损组织T-bet的表达也相对较强,但阳性淋巴细胞浸润的范围及部位却不太一致。 (2)GATA-3只有在少数银屑病患者皮损组织的淋巴细胞胞核中有散在表达,且表达较弱:GATA-3也只有在少数正常皮肤组织的淋巴细胞胞核中有散在表达,且表达较弱。两者比较无显著性差异(P＞0.05)。结论 1.寻常型银屑病患者血清IFN-γ浓度高于正常对照组,IL-4浓度低于正常对照组,进一步证实银屑病存在Th1分化优势。 2.寻常型银屑病患者外周血单一核细胞T-bet的表达显著高于正常对照组,而且T-bet表达水平与血清IFN-γ浓度呈显著正相关;寻常型银屑病患者外周血单一核细胞GATA-3的表达显著低于正常对照组,但与血清IFN-γ浓度无显著相关性。提示T-bet可能是通过与IFN-γ形成的正反馈调节环在寻常型银屑病的发生和发展中起到重要的促进作用,而GATA-3对进行期寻常型银屑病则起到负性调节的作用。 3.T-bet在寻常型银屑病患者皮损组织中的表达显著高于正常对照组,且在CD4表达较强的皮损组织中表达也相对较强,但同一患者T-bet和CD4阳性淋巴细胞浸润的范围及部位却不太一致,同时GATA-3的表达却与正常组无显著性差异。提示Th1细胞转录因子T-bet在寻常型银屑病的发生和发展中起重要的作用。
【学位单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2008
【中图分类】：R758.63
【部分图文】：

患者,寻常型银屑病,进行期,对照组

21例进行期寻常型银屑病患者外周血单一核细胞T一bet的表达显著高于正常对照组(P<0.05)。21例进行期寻常型银屑病患者外周血单一核细胞GATA一3的表达显著低于正常对照组 (P<0.05)。(表4，图1)表4.患者组与对照组T一bet和GATA一3的表达(x+s)组别例数T一betGATA一3患者组对照组t检验21l20.32+0.07*0.09+0.030.04+0.01* 0.11+0.02*表示与对照组相比P<0.05

表达水平,相关性分析,相关性,相系数

图3T一bet表达水平与IL一浓度的相关性3.GATA一3表达水平与IL一4浓度的相关性分析寻常型银屑病患者血清IL一4浓度与外周血单一核细胞GATA一3表达量的相系数为0.452(P>0.05)，两者之间无显著相关性(图4)。

银屑病,患者,正常人,皮肤

GATA一3在银屑病患者皮损中的表达(100x)

【参考文献】