血小板活化因子乙酰水解酶活性及基因单核苷酸多态性与银屑病的关系
发布时间：2020-12-06 20:49
血小板活化因子（PAF）是由多种炎症细胞（嗜中性白细胞、巨噬细胞及酸性粒细胞等）、血小板及血管内皮细胞等产生的一种高生理活性磷脂。PAF通过与细胞膜表面的受体结合而发挥效应,已证实PAF不仅在生殖、胚胎发育、血压等方面具有调节功能,同时又是强效的炎症介质,在许多疾病如:哮喘、败血症性休克、自身免疫性疾病、变态反应性疾病、移植排斥发病过程中扮演重要角色,在动物实验中,PAF受体拮抗剂能有效地改善病变的过程。PAF在生物体内以动态形式存在,细胞受刺激后生成PAF,随之很快被代谢清除。Barr在1980年首先报道血浆中存在着一种灭活PAF的物质,即PAF乙酰水解酶（PAF-AH）。近年来的研究表明,PAF-AH在控制PAF的释放及降解,维持体内PAF的生理平衡中起着重要的作用。PAF-AH可以水解PAF 的sn-2位上的乙酰基而使PAF失活。PAF-AH根据存在形式分为两种类型即:血浆型（pPAH-AH）及细胞型（cPAF-AH）,其中后者有三种同工酶Ⅰa, Ⅰb及Ⅱ型。PAF-AHⅠb与人类LIS-1基因产物同源（99%）,LIS-1基因突变可导致MDL,即一种大脑皮层脑回缺失性疾病,已证...
【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PAF-AH活性检测反应原理
医大学硕士学位论文 林2.2 配制检测缓冲液 Buffer 1（0.1 mol/L Tris-HCl 和 1 mmol/L EGTA，pH 7.-2-硝基苯甲酸(DTNB)溶液和反应底物 2-硫代 PAF（2-Thio PAF）溶液。.3 测定 PAF-AH 活性[1]：空白对照孔为 10μl DTNB+15μl 检测缓冲液；阳性对照DTNB+10μl PAF-AH 标准品+5μl 检测缓冲液；样品孔 10μl DTNB+10μl 血浆样品+冲液，均复孔测定。上述试剂混匀后每孔加 200μl 底物 2-Thio PAF，室温放置 3读取不同时间（5 个以上时间点）各样本在 405nm 波长下的吸光度值（A405），并计本的吸光度变化率ΔA405/min，用试剂盒提供的 PAF-AH 标准品（2μg/mL）作为对
图 3 各组 PAF-AH 活性值的比较3 讨论 PAF 是由多种炎症细胞（嗜中性粒细胞、巨噬细胞、酸性粒细胞等）、血小板及血管内皮胞等产生的一种高生理活性磷脂，具有广泛的生物学活性，同时又是强效炎症介质[2]，在屑病发病中具有重要的病理生理作用。Mallet 等证实在有炎症及增生性的银屑病皮损中 PAF 含量明显高于正常人的皮肤[3]。PAF-AH 属于磷脂酶 A2 家族，特异性作用于 PAF 甘油架的 sn-2 位乙酰基，将其水解为无活性的 lyso-PAF，是 PAF 代谢的主要方式。近年来的究表明，PAF-AH 在控制 PAF 的释放及降解，维持体内 PAF 的生理平衡中起着重要的作用浆 PAF-AH 的活性可间接的反映 PAF 的含量[4]，其活性缺陷与多种炎症性、过敏性疾病具相关性，如系统性红斑狼疮，异位性皮炎，哮喘等[5]。Tjoelker 等报道了重组 PAF-AH 对F 诱发的炎症反应具有抑制作用[6]，体外实验也显示 PAF-AH 可明显抑制 PAF 诱导的中性细胞活化，而炎症过程是银屑病发病机制中的一个重要环节。鉴于以上研究推测 PAF-A能在银屑病中起到一定的作用。
本文编号：2902009
【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PAF-AH活性检测反应原理
医大学硕士学位论文 林2.2 配制检测缓冲液 Buffer 1（0.1 mol/L Tris-HCl 和 1 mmol/L EGTA，pH 7.-2-硝基苯甲酸(DTNB)溶液和反应底物 2-硫代 PAF（2-Thio PAF）溶液。.3 测定 PAF-AH 活性[1]：空白对照孔为 10μl DTNB+15μl 检测缓冲液；阳性对照DTNB+10μl PAF-AH 标准品+5μl 检测缓冲液；样品孔 10μl DTNB+10μl 血浆样品+冲液，均复孔测定。上述试剂混匀后每孔加 200μl 底物 2-Thio PAF，室温放置 3读取不同时间（5 个以上时间点）各样本在 405nm 波长下的吸光度值（A405），并计本的吸光度变化率ΔA405/min，用试剂盒提供的 PAF-AH 标准品（2μg/mL）作为对
图 3 各组 PAF-AH 活性值的比较3 讨论 PAF 是由多种炎症细胞（嗜中性粒细胞、巨噬细胞、酸性粒细胞等）、血小板及血管内皮胞等产生的一种高生理活性磷脂，具有广泛的生物学活性，同时又是强效炎症介质[2]，在屑病发病中具有重要的病理生理作用。Mallet 等证实在有炎症及增生性的银屑病皮损中 PAF 含量明显高于正常人的皮肤[3]。PAF-AH 属于磷脂酶 A2 家族，特异性作用于 PAF 甘油架的 sn-2 位乙酰基，将其水解为无活性的 lyso-PAF，是 PAF 代谢的主要方式。近年来的究表明，PAF-AH 在控制 PAF 的释放及降解，维持体内 PAF 的生理平衡中起着重要的作用浆 PAF-AH 的活性可间接的反映 PAF 的含量[4]，其活性缺陷与多种炎症性、过敏性疾病具相关性，如系统性红斑狼疮，异位性皮炎，哮喘等[5]。Tjoelker 等报道了重组 PAF-AH 对F 诱发的炎症反应具有抑制作用[6]，体外实验也显示 PAF-AH 可明显抑制 PAF 诱导的中性细胞活化，而炎症过程是银屑病发病机制中的一个重要环节。鉴于以上研究推测 PAF-A能在银屑病中起到一定的作用。
本文编号：2902009
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