抑制p38MAPK信号通路调控癫痫大鼠脑组织中EAAT2表达的研究

发布时间：2018-03-21 13:38

  本文选题：癫痫　切入点：谷氨酸　出处：《遵义医学院》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:观察EAAT2在氯化锂-匹鲁卡品点燃癫痫大鼠脑组织中的表达情况,明确p38MAPK抑制剂SB203580对EAAT2的表达有无影响。方法:健康成年雄性SD大鼠随机分为以下四个组:正常对照组(n=5)、癫痫组(0h、24h、3d、1W、2W五个时间点,n=5×4)、SB203580组(n=5)及溶剂对照组(n=5)。经腹腔依次注射氯化锂-匹鲁卡品建立癫痫实验动物模型,应用Racine评分标准评估各组大鼠发作程度及首次癫痫发作持续时间,HE染色观察各组大鼠海马区病理形态学改变;Western Blot、免疫组化以及免疫荧光检测EAAT2在各组大鼠脑组织中的表达情况。结果:1.行为学结果显示:腹腔注射匹鲁卡品后10 min,癫痫组、溶剂对照组和SB203580组Racine评分依次为2.57±0.48、2.55±0.52和0.66±0.48),20min分别为:3.37±0.50、3.69±0.55和1.75±0.43),30min分别为:4.88±0.46、4.87±0.45和2.87±0.32。大鼠首次癫痫发作持续时间癫痫组为(62.56±9.22)s,溶剂对照组为(58.79±8.41)s,SB203580组为(28.35±4.00)s。各时间点Racine评分和首次癫痫发作持续时间在癫痫组和溶剂对照组中比较,差异无统计学意义(P0.05),同前两组比较,SB203580组首次癫痫发作持续时间明显缩短,并且Racine评分明显降低(P0.01)。2.HE染色结果示:正常对照组大鼠海马组织结构清晰,细胞核大小规则,未见异常病理性改变。癫痫发作3d时,大鼠海马组织出现细胞核固缩以及大部分神经细胞坏死。3.Western Blot检测EAAT2发现:正常对照组大鼠海马及颞叶新皮质中EAAT2有基础水平表达;癫痫发作后24 h EAAT2的表达较正常对照组上调,3d时表达到顶峰(P0.05);SB203580组,癫痫发作后第3d,EAAT2的表达较癫痫组(3d)显著升高(P0.05);4.免疫组化结果示:正常对照组海马EAAT2阳性细胞数为(12.60±3.44)个,癫痫组为(21.00±3.87)个,SB203580组为(33.42±9.52)个。与正常组比较,癫痫组海马中EAAT2阳性细胞数增多(P0.05);与癫痫组的对比,SB203580组大鼠海马组织中EAAT2阳性细胞数明显增多(P0.05)。5.免疫荧光对EAAT2在大鼠海马中的细胞定位发现,神经元和星形胶质细胞胞膜和胞浆中均有表达。结论:p38MAPK抑制剂SB203580可升高癫痫大鼠脑组织中EAAT2的表达,并可减轻大鼠的癫痫发作程度。
[Abstract]:Objective: to observe the expression of EAAT2 in the brain of epileptic rats induced by lithium chloride and pilocarpine. Methods: healthy adult male Sprague-Dawley rats were randomly divided into four groups: normal control group (control group), control group (control group), control group (control group), control group (control group), control group (control group), control group (n = 5) and solvent control group (n = 5). The animal model of epilepsy was established by ejecting lithium chloride and pilocarpine. Using Racine score to evaluate the severity of seizure and duration of the first epileptic seizure in each group and to observe the pathomorphological changes of hippocampal area of rats in each group by HE staining, immunohistochemistry and immunofluorescence detection of EAAT2 in brain tissue of rats in each group. Results: 1. Behavioral results showed: 10 min after intraperitoneal injection of pilocarpine, epilepsy group, The Racine scores of solvent control group and SB203580 group were 2.57 卤0.48v 2.55 卤0.52 and 0.66 卤0.48g / 20min, respectively, which were 3.37 卤0.50 卤0.69 卤0.55 and 1.75 卤0.43m 30 minutes, respectively, and were 4.88 卤0.46v 4.87 卤0.45 and 2.87 卤0.32 respectively. In the epileptic group of the first seizure duration, the scores were 62.56 卤9.22 / s and 58.79 卤8.41 / s / 203580, 28.35 卤4.00 / s, respectively. The Racine score at each time point and the first epileptic attack were 28.35 卤4.00 s in the solvent control group and in the solvent control group respectively. Duration was compared between epileptic group and solvent control group. Compared with the former two groups, the duration of the first seizure in SB203580 group was significantly shortened, and the Racine score was significantly decreased by P0.01. 2. The results of HE staining showed that the hippocampal tissue structure of normal control group was clear and the size of nucleus was regular. No abnormal pathological changes were observed. At 3 days after seizure, nucleus pyknosis and necrosis of most nerve cells were observed in hippocampal tissue of rats. The expression of EAAT2 in hippocampal and temporal lobe neocortex of normal control group was detected by Western Blot. The expression of EAAT2 at 24 h after seizure was significantly higher than that in the control group at 3 days after seizure, and the expression of EAAT2 was significantly higher than that in the epileptic group on the 3rd day after seizure. The immunohistochemical results showed that the number of EAAT2 positive cells in hippocampus of normal control group was 12.60 卤3.44). The epileptic group was 21.00 卤3.87, SB203580 was 33.42 卤9.52, compared with the normal group, The number of EAAT2 positive cells in hippocampus increased in epileptic group and the number of EAAT2 positive cells in hippocampus of SB203580 group was significantly increased compared with that of epileptic group. The localization of EAAT2 in hippocampus of rats was observed by immunofluorescence. Conclusion SB203580, a inhibitor of p38 MAPK, can increase the expression of EAAT2 in the brain tissue of epileptic rats and alleviate the seizures in rats.
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R742.1

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 郑乃智;阮旭中;李震中;王群;刘绍春;;癫痫大鼠脑组织内免疫反应特点的研究[J];医学研究通讯;2000年01期

2 郑乃智;阮旭中;李震中;王群;刘绍春;;癫痫大鼠脑组织内免疫反应特点研究[J];医学研究通讯;2000年06期

3 Kann O.;Kovács R.;Njunting M.;夏峰;;神经元激活期间慢性癫痫大鼠和人类离体海马中的代谢异常[J];世界核心医学期刊文摘(神经病学分册);2006年02期

4 曾常茜;王金岩;;实验性癫痫大鼠免疫分子的表达(英文)[J];中国临床康复;2006年14期

5 曾杨滨;刘宇明;;癫痫大鼠脑组织缝隙连接蛋白32的表达及甘珀酸对其的影响[J];临床神经病学杂志;2013年02期

6 金欣俐,王鸾升,白东升;实验性癫痫大鼠认知行为的研究[J];中华神经科杂志;2000年06期

7 孙淑玉,许继平,李玉莲,齐宏顺,范金萍;癫痫大鼠经免疫球蛋白干预后脑组织匀浆中免疫细胞因子变化的实验研究[J];山东大学学报(医学版);2005年09期

8 张广慧,张龙轩,朱遂强,苟玉兰,许峰;碱性成纤维细胞生长因子在癫痫大鼠海马中的表达[J];中国康复;2005年05期

9 孔娜;贾文艳;马骏;高小榕;高上凯;;大鼠癫痫发作可预测性的研究[J];北京生物医学工程;2007年02期

10 许虹;徐国卫;杨佳;王廷华;;绿色荧光蛋白转基因干细胞在癫痫大鼠脑内的存活及对脑电的影响[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年33期

相关会议论文 前10条

1 杨莉;还连进;黄显奋;;慢性癫痫大鼠脑线粒体功能观察[A];中国生理学会第21届全国代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2002年

2 覃小兰;杨志敏;陈党红;李晓庆;;益脑安对癫痫大鼠惊厥行为干预的实验研究[A];中华中医药学会老年神经病专题学术研讨会论文专辑[C];2006年

3 王超;张华;高国栋;;皮层电刺激对癫痫大鼠的抑制作用及其机制的初步研究[A];2011中华医学会神经外科学学术会议论文汇编[C];2011年

4 刘献增;高旭光;;急性致癫痫大鼠视-空间记忆与空间定位细胞功能的动态改变[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年

5 黄远桂;夏峰;罗晓红;赵隽;;听源性癫痫大鼠癫痫发作时谷氨酸转运蛋白的表达与调控研究[A];全面建设小康社会：中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集（下）[C];2003年

6 曾志源;廖德阳;方一心;保天然;;马桑内酯所致急性癫痫大鼠大脑运动皮质的损伤及其可复性——光、电镜定量研究[A];中国动物学会全国显微与亚显微形态科学分会第十次形态科学与显微注射技术学术研讨会论文摘要集[C];2000年

7 刘淑红;杨谊;吕艺;葛学铭;范明;;癫痫大鼠皮层和海马内基因的差异表达[A];中国生理学会第六届应用生理学委员会全国学术会议论文摘要汇编[C];2003年

8 张笋;王维平;邢红艳;周毅;王雪历;冯连元;;丁基苯酞对戊四氮点燃慢性癫痫大鼠认知功能的影响[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年

9 张力三;胡兴越;任光丽;陈冠锋;;乌灵菌粉对慢性癫痫大鼠诱发记忆再现障碍的作用机制[A];2012年浙江省神经病学学术年会论文集[C];2012年

10 许虹;徐国卫;杨佳;;干细胞移植对癫痫大鼠的作用及其对Bax、Bcl-2表达的影响[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年

相关博士学位论文 前10条

1 徐馨;TUBB3在癫痫中的作用和机制研究[D];重庆医科大学;2016年

2 吴雪梅;Cx36及其阻断剂在海人酸点燃癫痫大鼠模型中的作用与机制研究[D];吉林大学;2016年

3 笱玉兰;癫痫大鼠海马DG区增殖的内源性神经前体细胞的演变及基因工程细胞移植治疗癫痫大鼠的实验研究[D];华中科技大学;2006年

4 方敏;Neuroligin-1在癫痫发作中的作用及机制研究[D];重庆医科大学;2013年

5 许虹;GFP转基因干细胞移植及抗痫药物对癫痫大鼠作用的研究[D];昆明医学院;2006年

6 汤翔宇;7 Tesla 磁共振功能成像对癫痫大鼠脑损伤的长期跟踪研究[D];华中科技大学;2012年

7 徐祖才;ENT1参与癫痫发作的功能及机制研究[D];重庆医科大学;2013年

8 马宝新;促红细胞生成素及其衍生物抗癫痫大鼠心肌细胞凋亡及机制的研究[D];吉林大学;2009年

9 耿明英;伽玛刀照射对癫痫大鼠兴奋性痫性发作机制的干预[D];重庆医科大学;2007年

10 楚冰;P-糖蛋白在慢性癫痫大鼠脑组织的表达及药物干预的研究[D];苏州大学;2006年

相关硕士学位论文 前10条

1 陈中玮;两种方法建立耐药性癫痫大鼠模型的对比研究[D];贵阳医学院;2015年

2 王超;钙敏感受体在戊四氮点燃慢性癫痫大鼠模型心肌细胞中的表达及作用机制[D];佳木斯大学;2015年

3 刘阳;钙敏感受体调控MAPK途径参与癫痫大鼠心肌细胞凋亡[D];佳木斯大学;2015年

4 魏冲;柴芍平痫汤加减对癫痫大鼠的实验及临床疗效观察[D];山东中医药大学;2015年

5 张峗;利拉鲁肽对癫痫大鼠海马氧化应激及神经元细胞凋亡的影响[D];山西医科大学;2016年

6 李晓锋;MicroRNA-16调控SERT在匹罗卡品慢性癫痫大鼠中的作用和机制研究[D];福建医科大学;2015年

7 李中贵;δ ENaC在颞叶癫痫患者及癫痫大鼠模型中的表达研究[D];重庆医科大学;2016年

8 胡荣;Calsyntenin1在癫痫大鼠脑组织中的表达和功能研究[D];重庆医科大学;2016年

9 陈倩;抑制p38MAPK信号通路调控癫痫大鼠脑组织中腺苷A1受体及ENT1表达的研究[D];遵义医学院;2017年

10 杨樟;抑制p38MAPK信号通路调控癫痫大鼠脑组织中EAAT2表达的研究[D];遵义医学院;2017年

，

本文编号：1644084