新型神经示踪剂CTB-CDs的应用及周围神经储备功能的研究

发布时间：2018-07-15 09:56

【摘要】：目的第一部分:观察和探讨新型碳量子点荧光神经示踪剂CTB-CDs在中枢神经系统及周围神经系统的应用效果;第二部分在建立尺神经部分切除动物模型的基础上对周围神经储备功能的发生机制进行研究和阐述。方法第一部分:将新型碳量子点荧光神经示踪剂分别注射于大鼠坐骨神经干及大鼠大脑的S1区,通过相应脊髓节段、背根神经节及大脑组织取材切片,在荧光显微镜下观察该神经示踪剂在中枢及周围神经系统的逆行示踪效果。第二部分:首先使用微型玻璃针在显微镜下进行大鼠尺神经半切模型的建立,然后用真蓝作为逆行神经示踪剂对尺神经感觉及运动神经元进行逆行示踪,计数术后不同时间点被示踪的神经元数量及有髓神经纤维数量、髓鞘厚度,并作相关统计学分析。结果1、新型神经示踪剂CTB-CDs注射于大脑S1区3天后在同侧的丘脑区域可以见到明显的荧光信号;2、CTB-CDs注射于坐骨神经中段后5天后在同侧的脊髓L3-L5平面及相应的背根神经节(DRG)均可观察到被示踪的神经元具有较强的荧光信号;3、成功建立了大鼠尺神经半切模型;4、正常尺神经示踪结果显示运动神经元为112.0±9.2个;半切后一周观察到被示踪的运动神经元数量变为13.4±8.1个;术后两周时被示踪的运动神经元数量增加到了36.8±9.7个;而在术后四周时被示踪的神经元的数量可以恢复到86.8±13.5个;观察被示踪的感觉神经元的计数情况显示对照组C8节段的神经元数量/T1节段的神经元数量为435.4±19.5个/433.8±19.1个;而实验组术后一周计数发现被示踪的神经元数量下降为340.0±12.7个/182.6±22.2个;术后两周时下降最明显为80.2±4.1个/69.8±7.1个;而在四周时发现被示踪的神经元数量有所增加,数值变为234.0±28.1个/223.2±24.2个。对照组尺神经近端有髓神经纤维数量为109.8±9.7个,术后一周实验组和术后两周实验组均下降,并且其下降幅度具有统计学意义。术后四周有髓神经纤维数量为97.4±6.9个;对近端有髓神经纤维髓鞘的厚度进行测量发现实验组与对照组的髓鞘厚度无明显差异。对照组尺神经远端有髓神经纤维数量为150.6±10.5个;术后一周实验组有髓神经纤维的数量骤减到16.4±12.5个;组织切片观察可见神经的明显脱髓鞘改变及大量的炎性细胞的浸润。术后两周实验组有髓神经纤维出现明显的洋葱皮样改变,有髓神经纤维的数量依然处于非常低的水平。远端髓鞘厚度测量发现术后一周实验组较对照组厚度明显减小,术后两周实验组较术后一周实验组厚度也明显的减小,术后四周实验组髓鞘厚度逐渐恢复至对照组水平,与正常情况下的髓鞘厚度无明显差异。同时通过甲基蓝染色可以观察到神经纤维大约有1/2面积基本恢复原有的形态,神经纤维的数量及髓鞘均恢复到与对照组相近的水平,而另1/2仍处于脱髓鞘状态。结论1、新型神经示踪剂CTB-CDs作为一种可靠的、无毒性的、具有较强荧光信号的神经示踪剂对中枢神经系统及周围神经系统均有较好的示踪效果,并可在活体中使用;2、周围神经部分切断后被切断的神经纤维两侧断端可以通过旁路神经纤维再次联通,使原有神经元与原有神经纤维末端重新连接,其实质可能是切断的神经纤维通过双向轴突侧支发芽途径使原有的断裂神经纤维再次连接,这一结论可能是周围神经储备功能的产生机制。
[Abstract]:Objective The first part : To observe and discuss the effect of new carbon quantum dot fluorescent nerve tracer CTB - CDs on central nervous system and peripheral nervous system . The original nerve fibers can be re - connected with the end of the original nerve fiber , and the essence of the nerve fibers is that the severed nerve fibers can be connected again through the bilateral axon collateral sprouting route , and the conclusion may be the generation mechanism of the peripheral nerve reserve function .
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R741

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本文编号：2123691